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重组含有Epstein-Barr病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)基因的杆状病毒在昆虫细胞中的表达 被引量:4
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作者 周玲 刘海鹰 +3 位作者 柯越海 王汉明 马林 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期210-214,共5页
用杆状病毒表达系统重组病毒,在昆虫细胞中表达了完整的含有EBV-LMP1基因3个外显子开放读码框架的长2.3kb的cDNA片段。用重组病毒感染Sf9细胞,用免疫荧光染色,结果表明:48小时表达重组蛋白,72小时细胞较... 用杆状病毒表达系统重组病毒,在昆虫细胞中表达了完整的含有EBV-LMP1基因3个外显子开放读码框架的长2.3kb的cDNA片段。用重组病毒感染Sf9细胞,用免疫荧光染色,结果表明:48小时表达重组蛋白,72小时细胞较完整,免疫荧光染色强阳性,96小时后细胞出现破碎。我们采集72小时的组织培养上清和细胞破碎裂解液,分别采用SDS-PAGE、HPLC分子筛法,用免疫蛋白印迹法实验证明,表达的蛋白能被抗LMP1的单克隆抗体所识别,测定表达蛋白的分子量为60kD。经蛋白含量扫描图分析,采用Sephadex-75柱初步纯化表达的LMP1蛋白,将后者进行裸鼠体内致瘤实验,未见肿瘤生长。 展开更多
关键词 杆状病毒 昆虫细胞 潜伏感染膜蛋白 纯化
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高分化及低分化鼻咽癌细胞株中Epstein-Barr病毒潜伏感染膜蛋白(LMP1)基因的原位杂交与克隆及序列分析 被引量:5
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作者 苏玲 滕智平 +1 位作者 赵全壁 曾毅 《病毒学报》 CSCD 北大核心 1995年第2期114-118,共5页
应用染色体原位杂交、PCR扩增、克隆及核苷酸序列分析等方法,分析了CNE1和CNE3细胞株中的潜伏感染膜蛋白(LMP1)基因。CNE1是来自我国东北的高分化鼻咽癌细胞株,CNE3是来自广西的低分化鼻咽癌细胞株。染色体... 应用染色体原位杂交、PCR扩增、克隆及核苷酸序列分析等方法,分析了CNE1和CNE3细胞株中的潜伏感染膜蛋白(LMP1)基因。CNE1是来自我国东北的高分化鼻咽癌细胞株,CNE3是来自广西的低分化鼻咽癌细胞株。染色体原位杂交结果表明,CNE1细胞中LMP1基因存在于细胞核内,整合在第一号染色体上,CNE3中LMP1基因则随机存在于细胞核内及多条染色体上。用PCR方法分别从CNE1及CNE3中扩增得到了LMP1基因片段(外显子3),核苷酸序列分析证明,来自CNE1的LMP1与来自B95-8细胞的LMP1核苷酸序列同源性极高,达99.5%,而CNE3的LMP1基因与B95-8的LMP1基因同源性为93%。 展开更多
关键词 EB病毒 潜伏感染膜蛋白 原位杂交 鼻咽肿瘤
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EBV潜伏感染膜蛋白1在肺癌组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 李翠梅 韩光亮 张淑杰 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第5期42-43,共2页
目的探讨潜伏感染膜蛋白1(LMP1)在肺组织中的表达意义。方法采用免疫组化法对手术切除的肺癌组织(108例)及癌旁正常肺组织(22例)中的EB病毒(EBV)潜伏感染膜蛋白1(LMP1)进行检测,并用图像分析法进行形态学定量。结果肺癌及癌旁组织中的L... 目的探讨潜伏感染膜蛋白1(LMP1)在肺组织中的表达意义。方法采用免疫组化法对手术切除的肺癌组织(108例)及癌旁正常肺组织(22例)中的EB病毒(EBV)潜伏感染膜蛋白1(LMP1)进行检测,并用图像分析法进行形态学定量。结果肺癌及癌旁组织中的LMP1阳性率分别为6.5%和0,两者比较无统计学差异(P>0.05),但癌组织中LMP1的平均面积明显高于癌旁组织(P<0.05),表明癌组织中的LMP1表达量高于癌旁组织。结论LMP1在肺组织细胞的恶性转化中可能起一定作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 潜伏感染膜蛋白 EB病毒
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鼻咽癌组织中Epstein-Barr病毒潜伏感染膜蛋白基因片段的克隆及分析 被引量:1
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作者 余升红 陈卫平 +1 位作者 李扬 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期10-14,共5页
从两例鼻咽癌(NPC)病人的活检组织切片中,用PCR方法扩增出EB病毒潜伏感染膜蛋白(LMP)基因的ExonⅠ、IntronⅠ、ExonⅡ和IntronⅡ共500bp的片段,克隆入载体pGEM-3zf(+)′,测定核... 从两例鼻咽癌(NPC)病人的活检组织切片中,用PCR方法扩增出EB病毒潜伏感染膜蛋白(LMP)基因的ExonⅠ、IntronⅠ、ExonⅡ和IntronⅡ共500bp的片段,克隆入载体pGEM-3zf(+)′,测定核苷酸序列,其中有一个样品所测序列段与台湾株相似,另一个样品则与E95-8极为相似。由此可知,中国大陆南方的NPC组织中EBV-LMP基因存在不同的变异。 展开更多
关键词 潜伏感染膜蛋白 基因克隆 EB病毒 鼻咽肿瘤
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EB病毒阳性肺癌组织中LMP-1、p53、Bcl-2及MMP-9表达 被引量:3
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作者 王梅梅 熊亚南 +5 位作者 朱丽华 袁丽杰 张淑杰 章广玲 甄永占 刘志勇 《肿瘤学杂志》 CAS 2013年第6期431-434,共4页
[目的]检测EB病毒(EBV)阳性肺癌组织中EBV潜伏感染膜蛋白-1(LMP-1)、p53、Bcl-2及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达情况,分析它们与肺癌发生发展的关系。[方法]采用原位杂交法检测108例肺癌组织和22例癌旁正常肺组织中EBV编码的小RNA-1(EBV ... [目的]检测EB病毒(EBV)阳性肺癌组织中EBV潜伏感染膜蛋白-1(LMP-1)、p53、Bcl-2及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达情况,分析它们与肺癌发生发展的关系。[方法]采用原位杂交法检测108例肺癌组织和22例癌旁正常肺组织中EBV编码的小RNA-1(EBV encoded small RNA-1,EBER-1)。免疫组织化学的方法检测EBER-1阳性和阴性肺癌组织中LMP-1、p53、Bcl-2及MMP-9的表达。[结果]108例肺癌组织中EBER-1阳性36例,阳性率33.3%;22例癌旁正常肺组织中EBER-1阳性1例,阳性率4.5%,差异有统计学意义(P<0.01)。EBER-1阳性和阴性的肺癌组织中LMP-1阳性率分别为11.1%和4.2%,差异无统计学意义(P>0.05);在EBER-1阳性肺癌组织中p53、Bcl-2的平均面积(AA)和积分光密度(IOD)均高于阴性组,差异有统计学意义。在EBER-1阳性肺癌组织中MMP-9AA和IOD均高于阴性组,但差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]EBV感染可能通过影响LMP-1、Bcl-2、p53和MMP-9在肺癌组织中的表达,进而在肺癌的发生、发展和转移中发挥作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 EB病毒小RNA(EBER-1) 原位杂交 潜伏感染膜蛋白-1(LMP-1) p53 Bcl-2 基质金属蛋白酶-9(MMP-9)
原文传递
EB病毒相关胃癌潜伏感染膜蛋白-1表达的研究 被引量:1
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作者 李淑英 高金兰 +1 位作者 夏庆安 周天戟 《华北煤炭医学院学报》 2006年第4期435-436,共2页
①目的探讨EB病毒阳性胃癌(EBVaGC)中潜伏感染膜蛋白-1(LMP-1)的表达状况。②方法原位杂交法检测胃癌患者石蜡包埋组织标本中EB病毒编码的小RNA(EBV encoded RNA,166bps,EBER-1);免疫组化法检测EBVaGC中LMP-1。③结果EBVaGC中无LMP-1表... ①目的探讨EB病毒阳性胃癌(EBVaGC)中潜伏感染膜蛋白-1(LMP-1)的表达状况。②方法原位杂交法检测胃癌患者石蜡包埋组织标本中EB病毒编码的小RNA(EBV encoded RNA,166bps,EBER-1);免疫组化法检测EBVaGC中LMP-1。③结果EBVaGC中无LMP-1表达。④结论EB病毒阳性胃癌中缺乏潜伏感染膜蛋白LMP1的表达。 展开更多
关键词 EB病毒 胃肿瘤 免疫组化 潜伏感染膜蛋白-1
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