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新生期反复惊厥大鼠神经行为改变及溶酶体酶抑制剂的干预作用 被引量：6
1
作者 闫建珍 倪宏 张乐玲 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期214-217,共4页
目的探讨溶酶体酶抑制剂（CBI）在三氟乙醚致新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路。方法90只生后6d（P6）的健康SD大鼠随机分为3组（n=30）：对照（CONT）组、反复惊厥（RS）组及CBI组，RS组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发... 目的探讨溶酶体酶抑制剂（CBI）在三氟乙醚致新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路。方法90只生后6d（P6）的健康SD大鼠随机分为3组（n=30）：对照（CONT）组、反复惊厥（RS）组及CBI组，RS组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次，每次间隔30min，连续9d；CONT组同样操作但不吸入三氟乙醚；CBI组惊厥前腹腔注射CBI（总量2μl），同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥，方法同RS组。分别于生后不同时间段检测体格、神经发育以及认知情感能力，并于末次惊厥后1．5h、3h、6h、24h及第35天五个时间点（n=6）取大脑皮层组织，采用免疫印迹技术检测自噬相关蛋白cathepsin B的表达。结果P14时Rs组体质量（27．28±1．60）k，低于CONT组（33．45±1．57）kg，差异具有显著性（P〈0．0001）。神经发育指标显示悬崖回避时间，日龄P12时RS组历时（2．10±1．45）s，延长于CBI组（1．05±0．32）s，差异有显著性（P〈0．05）。旷场行为测试：RS组水平运动（20．00±13．08）次，少于CONT组（57．83±33．22）次，差异有显著性护〈0．05）；RS组垂直运动（2．50±2．43）次，少于CONT组和CBI组[分别为（22．17±10．74）次，（9．33±5．39）次]，差异有显著性（P〈0．01）。Western blot法检测，RS组在1．5h、3h、6h、24h各时间点CathepsinB的表达明显高于CONT组（P〈0．05）；CBI组于1．5h、3h、6h、24h各时间点cathepsin B的表达明显低于RS组妒〈0．05）。P35时间点3组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致神经行为损伤。 展开更多
关键词 惊厥 新生期 生长发育 旷场实验 溶酶体酶抑制剂
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溶酶体酶抑制剂对神经细胞内Nicastrin表达水平的影响
2
作者 彭雪华 龙志敏 +1 位作者 骆世芳 贺桂琼 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期2975-2978,共4页
目的探讨溶酶体酶抑制剂对阿尔茨海默病(AD)相关蛋白Nicastrin(NCT)表达的影响,以期明确NCT的蛋白降解是否与溶酶体途径有关。方法在用人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用溶酶体酶抑制剂处理NCT细胞株,并结合... 目的探讨溶酶体酶抑制剂对阿尔茨海默病(AD)相关蛋白Nicastrin(NCT)表达的影响,以期明确NCT的蛋白降解是否与溶酶体途径有关。方法在用人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y建立稳定表达NCT细胞株的基础上,应用溶酶体酶抑制剂处理NCT细胞株,并结合Western印迹、亚细胞器的分级分离、免疫荧光双标等技术,检测溶酶体酶抑制剂处理后神经细胞内NCT的表达变化。结果亚细胞器分级分离实验显示,正常情况下神经细胞内的NCT主要分布于内质网和高尔基复合体,少量NCT分布于溶酶体。Western印迹结果显示,溶酶体酶抑制剂处理后,神经细胞内源性和外源性成熟NCT(mNCT)的表达显著增强,且溶酶体酶抑制剂氯喹对mNCT蛋白表达的增强效应呈剂量依赖性和时间依赖性,但溶酶体抑制剂对非成熟NCT(imNCT)的表达无影响;免疫荧光双标结果显示,溶酶体酶抑制剂处理后,细胞内NCT的表达增强,且增多的NCT主要聚集在溶酶体内。结论神经细胞内mNCT的降解与溶酶体途径有关。 展开更多
关键词 溶酶体酶抑制剂 NICASTRIN 神经细胞 蛋白降解
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