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螺旋藻基因组DNA制备方法的摸索与比较 被引量：5
1
作者 邰丽华 于涛 +3 位作者 张晓嵘 安伟 栗淑媛 乔辰 《科学技术与工程》 2007年第22期5755-5758,共4页
为了得到高质量的螺旋藻基因组DNA,采用超声波法和溶菌酶法两种方法提取基因组DNA,并对实验方法进行了摸索与比较。结果表明:影响螺旋藻基因组DNA制备质量和得率的重要因素之一是螺旋藻细胞壁的破壁程度。本实验中采用两种破壁方法均可... 为了得到高质量的螺旋藻基因组DNA,采用超声波法和溶菌酶法两种方法提取基因组DNA,并对实验方法进行了摸索与比较。结果表明:影响螺旋藻基因组DNA制备质量和得率的重要因素之一是螺旋藻细胞壁的破壁程度。本实验中采用两种破壁方法均可得到高质量高得率的螺旋藻基因组DNA,但超声波法破壁不易掌控,而适当浓度的溶菌酶法可获得较理想的结果。 展开更多
关键词 螺旋藻基因组DNA 制备 超声波法 溶菌酶法
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鱿鱼肌肉组织细菌基因组DNA提取方法的优化 被引量：7
2
作者 王建玲 赵鹏程 +1 位作者 邓弘毅 金杨 《浙江农业科学》 2013年第6期737-740,共4页
采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法结合十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、SDS法结合溶菌酶法和CTAB法结合溶菌酶法对鱿鱼肌肉组织中细菌基因组DNA的提取效果进行比较。结果表明,SDS法结合CTAB法和SDS法结合溶菌酶法提取细菌总DNA的效果相近,CTA... 采用十二烷基苯磺酸钠(SDS)法结合十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、SDS法结合溶菌酶法和CTAB法结合溶菌酶法对鱿鱼肌肉组织中细菌基因组DNA的提取效果进行比较。结果表明,SDS法结合CTAB法和SDS法结合溶菌酶法提取细菌总DNA的效果相近,CTAB法结合溶菌酶法提取细菌总DNA的效果相对较差,3种方法所提取的细菌总DNA纯度均较高,无需纯化即可进行进一步PCR扩增试验。变性梯度凝胶电泳结果说明,SDS法结合CTAB法较另两种方法能更真实地揭示待测样本中微生物的实际组成。 展开更多
关键词 鱿鱼 SDS法 CTAB法 溶菌酶法 DGGE
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3种方法对临床菌血症样本细菌DNA提取的比较 被引量：5
3
作者 赵晓丽 李晓霞 +3 位作者 刘德华 任宝军 邵剑春 胡大春 《昆明医科大学学报》 CAS 2014年第4期117-120,共4页
目的寻找一种简单、有效的提取临床菌血症样本细菌DNA的方法.方法分别用碱液加热裂解法、溶菌酶法和商品DNA提取液法提取细菌DNA,用临床常见病原菌特异性引物,进行PCR扩增.结果 (1)商品DNA提取液法提取革兰阴性菌DNA,经PCR扩增后得到特... 目的寻找一种简单、有效的提取临床菌血症样本细菌DNA的方法.方法分别用碱液加热裂解法、溶菌酶法和商品DNA提取液法提取细菌DNA,用临床常见病原菌特异性引物,进行PCR扩增.结果 (1)商品DNA提取液法提取革兰阴性菌DNA,经PCR扩增后得到特异性目的片段,但未扩增出革兰阳性菌的特异性目的片段;(2)碱液加热裂解法、溶菌酶法提取革兰阴、阳性菌DNA,经PCR扩增后均得到特异性目的片段,但碱液加热裂解法比溶菌酶法能扩增到更低浓度的细菌DNA目的片段.结论碱液加热裂解法是3种方法中最简单有效的细菌DNA提取方法,适用于临床病原菌基因组DNA提取. 展开更多
关键词 细菌DNA 碱液加热裂解法 溶菌酶法 商品DNA提取法
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不同裂解方式对微生物DNA提取的影响 被引量：2
4
作者 凌云 王晶 +1 位作者 王越菲 彭自然 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第12期61-64,共4页
分子生物学试验中的细胞裂解及DNA提取是试验的第1步,但是由于细胞种类多样、细胞壁成分复杂,DNA提取的效果容易受到提取方法的影响。针对以上问题,主要研究溶菌酶、蛋白酶K、十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)、十六烷... 分子生物学试验中的细胞裂解及DNA提取是试验的第1步,但是由于细胞种类多样、细胞壁成分复杂,DNA提取的效果容易受到提取方法的影响。针对以上问题,主要研究溶菌酶、蛋白酶K、十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,简称SDS)、十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyl trimethyl ammonium bromide,简称CTAB)等4种化学方法对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌以及大肠杆菌3种代表性细菌细胞的裂解效果。结果表明:溶菌酶+SDS法对3种微生物的裂解效果都不错,但可能造成蛋白质污染且DNA碎片较多;溶菌酶+热冻法对于金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的裂解效果较好且蛋白质污染较少;蛋白酶K+CTAB法仅对金黄色葡萄球菌的裂解提取效果较好;溶菌酶+蛋白酶K法的提取效果最差。在试验中可以根据需要选择不同的裂解方式,从而达到操作性、重现性及经济性的统一。 展开更多
关键词 微生物细胞裂解 DNA提取 溶菌酶法 混合法 热冻法
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番鸭唾液乳杆菌外膜蛋白提取方法的优化
5
作者 张杰 陈晓佳 +4 位作者 张叶飞 谢璐娜 李林 白丁平 黄小红 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第8期214-219,共6页
为获得较大浓度的唾液乳杆菌外膜蛋白,试验对唾液乳杆菌外膜蛋白的提取方法进行了筛选和优化,比较了Sarkosy l法、PMSF法和溶菌酶法,筛选出最佳提取方法,并通过单因素试验和正交试验优化提取条件。结果表明:溶菌酶法所提取的蛋白量大,... 为获得较大浓度的唾液乳杆菌外膜蛋白,试验对唾液乳杆菌外膜蛋白的提取方法进行了筛选和优化,比较了Sarkosy l法、PMSF法和溶菌酶法,筛选出最佳提取方法,并通过单因素试验和正交试验优化提取条件。结果表明:溶菌酶法所提取的蛋白量大,目的条带清晰,表明溶菌酶法优于PMSF法和Sarkosyl法;各提取因素影响的大小顺序为氯化锂水浴温度>溶菌酶浓度>氯化锂浓度>氯化锂水浴时间>溶菌酶反应时间>溶菌酶反应温度;溶菌酶法的最佳提取条件为2.5 mg/mL溶菌酶,23℃水浴90 min,0.5 mol/mL氯化锂处理,30℃水浴25 h。 展开更多
关键词 唾液乳杆菌 外膜蛋白 溶菌酶法 氯化锂 提取条件 优化
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