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试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNA A1555G突变的比较研究 被引量:3
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作者 李琦 戴朴 +3 位作者 黄德亮 金政策 康东洋 张昕 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2008年第1期49-52,共4页
目的通过比较试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNAA1555G突变的不同特点,探索应用标准试剂盒和PAGE银染方法检测线粒体DNAA1555G突变的快速筛查和诊断方法。方法采用线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法... 目的通过比较试剂盒配合琼脂糖EB染色法和PAGE银染法分析线粒体DNAA1555G突变的不同特点,探索应用标准试剂盒和PAGE银染方法检测线粒体DNAA1555G突变的快速筛查和诊断方法。方法采用线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法检测线粒体DNA1555位点正常者229例,A>G突变阳性者17例,验证此试剂盒配合PAGE银染法检测的有效性和准确性。结果线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法检测结果与酶切EB染色和测序结果完全吻合。结论线粒体DNAA1555G突变诊断试剂盒配合PAGE胶电泳银染法和试剂盒配合EB检测法较前者更为灵敏和清晰,在分析线粒体DNAA1555G突变方面具有简单、价廉、结果直观的特点,适合在中国用于进行此突变的大规模筛查或预防性检查。 展开更多
关键词 耳聋 线粒体DNA 突变 聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染 溴化乙锭染色
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PCR-RFLP法检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变 被引量:2
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作者 刘建伟 吴多斌 +2 位作者 叶玲 王磊 王鲁宁 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期210-212,共3页
目的 建立一种简便、实用的检测亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)等位基因 C677T点突变的方法 ,并初步观察部分健康老人和老年血管性痴呆 (VD)患者中 MTHFR等位基因 C677T点突变情况。方法  PCR特异性扩增 MTHFR基因序列 ,扩增产物用限... 目的 建立一种简便、实用的检测亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)等位基因 C677T点突变的方法 ,并初步观察部分健康老人和老年血管性痴呆 (VD)患者中 MTHFR等位基因 C677T点突变情况。方法  PCR特异性扩增 MTHFR基因序列 ,扩增产物用限制性内切酶 Hinf 酶切 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)分离、溴化乙锭染色后 ,观察酶切位点的限制性片段长度多态性 (RFLP)图谱。共检测标本 1 67例 ,其中健康老人(≥ 65岁 ) 1 38例、老年 VD 2 9例 ,并计算了各基因型频率和等位基因频率。结果 健康老人组和老年 VD患者组均检测到 C等位基因野生型 (CC)、杂合子 (CT)和 T等位基因纯合子 (TT)基因型 ,各组 MTHFR基因的 C677T点突变中 T突变位点的频率分别为 43.8%、51 .7%。结论 该方法简便、实用 ,适于一般实验室应用及流行病学调查。 展开更多
关键词 PCR—RFLP法 检测 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 老年血管性痴呆 VD 聚丙烯酞胺凝胶电泳 溴化乙锭染色 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性
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土耳其阿达那地区地方性利什曼病传统诊断技术与聚合酶链反应诊断技术的比较
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作者 Culha G. Uzun S. +1 位作者 Ozcan K. 任建文 《世界核心医学期刊文摘(皮肤病学分册)》 2006年第8期35-36,共2页
Background: Cutaneous leishmaniasis (CL) has long been reported in the Cukurova region. We have compared the sensitivity of the conventional methods of diagnosis by microscopy and cultivation of lesion aspirates again... Background: Cutaneous leishmaniasis (CL) has long been reported in the Cukurova region. We have compared the sensitivity of the conventional methods of diagnosis by microscopy and cultivation of lesion aspirates against polymerase chain reaction (PCR) amplification of parasite-specific DNA from these samples. Methods: The samples (n = 25) were obtained from patients clinically diagnosed with CL at the regional dermatology clinic. Aliquots of the samples were stained with Giemsa for microscopy and cultured in Novy-Nicolle-McNeal(NNN) blood agar for promastigote growth. The remainder were subjected to DNA extraction for PCR amplification of the conserved region of kinetoplastmini circle DNA. PCR products of the expected size (120 bp) were observed after agarose gel electrophoresis, followed by staining with ethidium bromide. Results: The positive rates from 25 samples were 44% , 68% , and 100% for cultivation, microscopy, and, respectively. Conclusions: The PCR method used appears to be the most sensitive for the diagnosis of CL in this region. 展开更多
关键词 聚合酶链反应(PCR) 皮肤利什曼病 诊断技术 血琼脂培养基 地方性 土耳其 GIEMSA染色 显微镜检查 琼脂糖凝胶电泳 溴化乙锭染色
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HLA-D基因配型的单链构型多态性银染分析
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作者 张玉琴 李国选 +2 位作者 于妍 焦丽欣 王申五 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期200-203,共4页
用PCR/单链构型多态性(SSCP)/银染方法做HLA-D基因配型。取供、受者DNA,对HLA-DQA、DRB、DQB及DPB位点作PCR(第2外显子多态部分),然后对产物进行SSCP,电泳条带经银染后分析结果,以确定供、受者HLA-D基因型是否一致,银染较之溴化乙锭染... 用PCR/单链构型多态性(SSCP)/银染方法做HLA-D基因配型。取供、受者DNA,对HLA-DQA、DRB、DQB及DPB位点作PCR(第2外显子多态部分),然后对产物进行SSCP,电泳条带经银染后分析结果,以确定供、受者HLA-D基因型是否一致,银染较之溴化乙锭染色灵敏度高25倍左右,为骨髓移植前进行HLA-DQA、DRB、DQB及DPB基因配型提供了较为灵敏的非放射性的手段。该方法亦可应用于其它单链构型多态性分析。 展开更多
关键词 HLA-D基因配型 单链构型多态性 聚合酶链反应 DNA银染 溴化乙锭染色
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琼脂糖凝胶电泳溴化乙锭染色与荧光片段自动分析检测IgH基因产物的比较
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作者 姜淑芳 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 2002年第6期376-376,共1页
关键词 琼脂糖凝胶电泳 溴化乙锭染色 荧光片段自动分析 检测 IgH基因产物
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