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温氏附红细胞体16S rRNA基因的序列测定和分析 被引量:6
1
作者 付媛 李树清 +5 位作者 杜凯 刘琴 周艳琴 刘恩勇 姚宝安 赵俊龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期518-522,共5页
从自然感染附红细胞体的湖北黄牛无菌采集血液,分离附红细胞体并提取病原基因组,用血营养菌的16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1.5 kb的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析。结果表明该片段全长为1 471 bp(GenB... 从自然感染附红细胞体的湖北黄牛无菌采集血液,分离附红细胞体并提取病原基因组,用血营养菌的16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1.5 kb的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析。结果表明该片段全长为1 471 bp(GenBank收录号为AY946266),同源性分析表明该序列与Neimark公布的温氏附红细胞体(AF016546)的16S rRNA基因序列同源性达到98.7%,证实该病原为温氏附红细胞体,从分子生物学水平证实了温氏附红细胞体在湖北省的存在。将该序列与5种支原体、14种血营养菌及边缘无浆体等的相应序列进行比较,建立系统发育树,结果表明温氏附红细胞体同边缘无浆体的关系较远,而与肺炎支原体组的亲缘关系较近。 展开更多
关键词 温氏细胞体 16S RRNA PCR 序列分析
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温氏附红细胞体生物学特性研究 被引量:6
2
作者 张富梅 韩福生 +2 位作者 赵彦岭 薛瑞辰 李春红 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第8期49-51,共3页
以自然感染温氏附红细胞体(E.wenyoni)的牛血作为试验材料,采用镜检法观察了E.wenyoni的形态学特征,应用SDS-PAGE和免疫印迹技术分析了E.wenyoni的抗原蛋白组成。结果显示,E.wenyoni呈多形性,具有折光性,游离于血浆中的E.wenyoni具有运... 以自然感染温氏附红细胞体(E.wenyoni)的牛血作为试验材料,采用镜检法观察了E.wenyoni的形态学特征,应用SDS-PAGE和免疫印迹技术分析了E.wenyoni的抗原蛋白组成。结果显示,E.wenyoni呈多形性,具有折光性,游离于血浆中的E.wenyoni具有运动性,附着于红细胞上似乎停止运动,但实际上却能使红细胞发生震颤;SDS-PAGE结果显示,E.wenyoni主要由9种蛋白组成,分子量范围为24ku~150ku,应用免疫印迹试验筛选出了3种特异性蛋白质,分子量分别为147.31ku,49.03ku和35.72ku。本试验为准确诊断牛附红细胞体感染提供了可靠依据。 展开更多
关键词 温氏细胞体 形态学特性 抗原特性
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云南大理州奶牛附红细胞体病的诊断和分析 被引量:8
3
作者 杨蔚 周应良 杨华 《中国奶牛》 2018年第5期44-46,共3页
2013年夏季,云南省大理州的部分奶牛场奶牛首次出现以发热、气喘、渐进性贫血和消瘦为主要症状的疾病,整体发病率为3%,经对病牛血液进行染色镜检,初步诊断为疑似奶牛附红细胞体感染。目前,附红细胞体病染色镜检诊断法虽被基层技术人员... 2013年夏季,云南省大理州的部分奶牛场奶牛首次出现以发热、气喘、渐进性贫血和消瘦为主要症状的疾病,整体发病率为3%,经对病牛血液进行染色镜检,初步诊断为疑似奶牛附红细胞体感染。目前,附红细胞体病染色镜检诊断法虽被基层技术人员普遍采用,但该方法的假阳性率较高,并不能真实反映实际的发病情况,对该病的有效防控造成一定困扰。因此,笔者以该批患牛的保存血液为材料,建立了一种奶牛附红细胞体病巢氏PCR检测方法,并将该检测结果与染色镜检结果进行比较,为该病的检测及防控提供参考。 展开更多
关键词 奶牛 温氏细胞体 PCR
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冀西北地区奶牛附红细胞体病的流行病学研究 被引量:5
4
作者 李子平 王鹏 +3 位作者 胡自然 李子清 张占民 张富梅 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第27期16803-16804,16925,共3页
[目的]为奶牛附红细胞体病的防治提供科学依据。[方法]采用悬滴镜检法对冀西北地区规模化奶牛养殖场和散养奶牛户奶牛附红细胞体病的流行情况进行调查,研究了奶牛温氏附红细胞体病的感染率、发病率、传播途径和死亡率,并提出综合防治措... [目的]为奶牛附红细胞体病的防治提供科学依据。[方法]采用悬滴镜检法对冀西北地区规模化奶牛养殖场和散养奶牛户奶牛附红细胞体病的流行情况进行调查,研究了奶牛温氏附红细胞体病的感染率、发病率、传播途径和死亡率,并提出综合防治措施。[结果]无论夏季还是冬季,该地区奶牛附红细胞体的感染率均较高,且夏季高于冬季,但发病率均不高。红细胞感染率夏季高于冬季。母子之间存在垂直传播,并且呈现出母代感染率高则子代感染率也相应升高的趋势。红细胞感染率在90%以上奶牛组与阴性奶牛组相比,总蛋白(TP)和球蛋白(G)显著降低(P<0.05),白蛋白(A)有所降低,谷-丙转氨酶(ALT)和谷-草转氨酶(AST)有所升高,但差异不显著。[结论]该研究为保障冀西北地区奶牛业的健康发展提供了科学依据。 展开更多
关键词 奶牛 温氏细胞体 流行病学研究
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温氏附红细胞体双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:4
5
作者 王健 秦建华 +2 位作者 张富梅 高轩 包永占 《河北北方学院学报(自然科学版)》 2007年第2期39-43,共5页
采用辛酸硫酸铵法从温氏附红细胞体高免血清中提取IgG,过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶,建立了检测温氏附红细胞体抗原的双抗体夹心ELISA.结果显示:抗体最佳包被量为156μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1∶400,抗原最低检出量为6.64μg/mL,... 采用辛酸硫酸铵法从温氏附红细胞体高免血清中提取IgG,过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶,建立了检测温氏附红细胞体抗原的双抗体夹心ELISA.结果显示:抗体最佳包被量为156μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1∶400,抗原最低检出量为6.64μg/mL,抗原及酶标抗体的最佳作用时间分别为1 h.应用建立的检测方法对河北省内222份奶牛血样进行了检测,阳性检出率为91.0%.证实:该方法灵敏度高,简便快速,适合作群体检测. 展开更多
关键词 温氏细胞体 双抗夹心ELISA 奶牛 检测
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温氏附红细胞体部分16S rRNA基因的序列测定和分析 被引量:3
6
作者 张浩吉 谢明权 +5 位作者 张健騑 蒲文君 覃宗华 王政富 顾万军 蔡建平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期152-155,共4页
从确诊为附红细胞体感染的黄牛无菌采集血样,抽提附红细胞体基因组DNA,用实验设计的能扩增多种动物血营养菌部分16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,结果扩增出大小约为370bp的DNA片段。PCR产物序列测定和系统进化分析显示,实验获得的核... 从确诊为附红细胞体感染的黄牛无菌采集血样,抽提附红细胞体基因组DNA,用实验设计的能扩增多种动物血营养菌部分16SrRNA基因的通用引物进行PCR扩增,结果扩增出大小约为370bp的DNA片段。PCR产物序列测定和系统进化分析显示,实验获得的核苷酸序列为温氏附红细胞体的16SrRNA基因,与国外报道的温氏附红细胞体的同源性为97%。反映出不同地理株的温氏附红细胞体存在一定的遗传差异,为牛附红细胞体病的诊断和分子流行病学研究提供科学依据。 展开更多
关键词 温氏细胞体 16S RRNA基因 序列分析
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牛附红细胞体16SrRNA基因的克隆测序及分析 被引量:3
7
作者 周作勇 聂奎 +2 位作者 胡世君 周荣琼 唐成 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期329-333,341,共6页
无菌采集自然感染附红细胞体的牛血液,提取全血基因组,用血营养菌16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1500 bp的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析。结果,所克隆的牛附红细胞体基因片段大小为1 454 bp,GenBank登... 无菌采集自然感染附红细胞体的牛血液,提取全血基因组,用血营养菌16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增,得到长约1500 bp的扩增片段,将其克隆到pMD18-T载体后进行测序和分析。结果,所克隆的牛附红细胞体基因片段大小为1 454 bp,GenBank登录号为FJ375309(丰都株)。序列比对结果显示,牛附红细胞体丰都株与武汉株(AY946266)最高,达99.7%,与支原体科代表种同源性为60.7%~76.2%,而与立克次氏体科的立克次氏体和无形体科的无形体同源性仅为51.4%~56.4%,表明牛附红细胞体应归为支原体科,附红细胞体属,而不应属于立克次氏体目,无浆体科。对国内外牛温氏附红细胞体的亲缘关系分析表明,牛温氏附红细胞体无明显的地域性差别趋势。 展开更多
关键词 温氏细胞体 16S RRNA 序列分析
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奶牛温氏支原体16S rRNA基因的PCR扩增、克隆及分析 被引量:2
8
作者 苏乾莲 黄维义 +2 位作者 张为宇 陈明 拉伊萨 《中国兽医寄生虫病》 CAS 2008年第6期1-5,共5页
目的对奶牛温氏支原体16S rRNA基因进行PCR扩增及克隆分析。方法从自然感染体的广西奶牛无菌采集血液,分离温氏支原体并提取病原基因组,用血营养菌的16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆到PGEM-Teasy载体后进行测序和分析... 目的对奶牛温氏支原体16S rRNA基因进行PCR扩增及克隆分析。方法从自然感染体的广西奶牛无菌采集血液,分离温氏支原体并提取病原基因组,用血营养菌的16S rRNA基因的通用引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆到PGEM-Teasy载体后进行测序和分析,并与Gene bank上搜索的温氏支原体相应序列进行比较,建立系统发育树。结果PCR扩增得到长约1.5 kb的扩增片段,测序结果显示该片段全长为1 453 bp,同源性分析表明该序列与Neimark公布的温氏支原体(前称温氏附红细胞体)(AF016546)的16S rRNA基因序列同源性达到97.4%,与系统发育进化树表明本株温氏支原体同本地株的关系较近,而与国外株的新缘关系较远。国内公布的广西株同源性为99.8%。结论结果表明证实该病原为温氏支原体,从分子生物学水平证实了温氏支原体在广西的存在。由于本试验分离得到的牛温氏支原体与国外发表的牛温氏支原体核苷酸序列相差2.6%,因此两者的基因型存在一定的差异,这对该病的分子流行病学分析具有一定的意义。 展开更多
关键词 温氏细胞体 16S RRNA基因 克隆 序列分析
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8种药物对温氏附红细胞体的体外杀灭效果 被引量:3
9
作者 高光平 毕可东 +1 位作者 陈萍 邹明 《河北科技师范学院学报》 CAS 2009年第1期1-6,31,共7页
为确定药物对温氏附红细胞体病的体外杀灭效果,在70 mL RPMI-1640培养液中添加30 mL新生牛血清,2.0 g葡萄糖,0.20 g NaHCO3,37℃,体积分数为0.05的CO2条件下,进行了咪唑苯脲、磷酸伯氨喹、盐酸多西环素、敌百虫、延胡索酸泰妙菌素、依... 为确定药物对温氏附红细胞体病的体外杀灭效果,在70 mL RPMI-1640培养液中添加30 mL新生牛血清,2.0 g葡萄糖,0.20 g NaHCO3,37℃,体积分数为0.05的CO2条件下,进行了咪唑苯脲、磷酸伯氨喹、盐酸多西环素、敌百虫、延胡索酸泰妙菌素、依沙吖啶、三氮眯、大蒜素注射液等8种药物对温氏附红细胞体的体外药物杀灭试验。结果表明,咪唑苯脲、磷酸伯氨喹的杀灭效果最好,且在有效浓度范围内对红细胞的影响较轻微;敌百虫、依沙吖啶的杀灭效果也很好,但是对红细胞的损伤较咪唑苯脲和磷酸伯氨喹重。因此,治疗温氏附红细胞体病应首选咪唑苯脲或磷酸伯氨喹,其次为敌百虫和依沙吖啶。 展开更多
关键词 温氏细胞体 药物杀灭 杀灭效果
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奶牛温氏附红细胞体16S rRNA基因的克隆及系统进化分析 被引量:2
10
作者 张富梅 王建永 +2 位作者 赵月兰 包永占 秦建华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1132-1135,共4页
无菌采集感染温氏附红细胞体(E.wenyoni)的牛血液,抽提E.wenyoni基因组DNA,参考GenBank发表的E.wenyoni16S rRNA基因序列(AF016546),设计1对特异性引物,扩增并克隆E.wenyoni16S rRNA部分基因,基因产物大小为1 005 bp。序列比较结果显示... 无菌采集感染温氏附红细胞体(E.wenyoni)的牛血液,抽提E.wenyoni基因组DNA,参考GenBank发表的E.wenyoni16S rRNA基因序列(AF016546),设计1对特异性引物,扩增并克隆E.wenyoni16S rRNA部分基因,基因产物大小为1 005 bp。序列比较结果显示,所测序列与参考序列(AF016546)同源性最高,达97.9%。系统发育分析表明,所测序列与支原体属病原代表种的序列接近,同源性约为70%,而与无浆体科病原代表种的序列相差较远,同源性约为50%。可见,E.wenyoni应归为支原体属,而不应属于立克次氏体目、无浆体科。 展开更多
关键词 奶牛 温氏细胞体 16S RRNA基因 系统进化分析
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温氏附红细胞体对奶牛免疫水平的影响 被引量:2
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作者 陈萍 毕可东 王兆学 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第26期8247-8248,共2页
选择5头感染温氏附红细胞体的奶牛和5头健康奶牛,分别进行红细胞C3b受体花环率、免疫复合物花环率、B淋巴细胞EA花环率、外周血中T淋巴细胞百分率、淋巴细胞转化率的测定。结果表明,感染温氏附红细胞体的奶牛其红细胞C3b受体花环率、免... 选择5头感染温氏附红细胞体的奶牛和5头健康奶牛,分别进行红细胞C3b受体花环率、免疫复合物花环率、B淋巴细胞EA花环率、外周血中T淋巴细胞百分率、淋巴细胞转化率的测定。结果表明,感染温氏附红细胞体的奶牛其红细胞C3b受体花环率、免疫复合物花环率、B淋巴细胞EA花环率、外周血中T淋巴细胞百分率、淋巴细胞转化率明显低于健康奶牛,且二者在0.01水平上有差异。这说明温氏附红细胞体对奶牛的免疫水平有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 温氏细胞体 免疫水平 奶牛
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奶牛温氏附红细胞体抗原特性研究
12
作者 张富梅 赵月兰 +2 位作者 秦建华 左玉柱 张宁 《中国农学通报》 CSCD 2006年第12期34-36,共3页
研究目的为制备E.wenyoni特异性诊断抗原及研制高效附红细胞体疫苗提供基础进行试验;方法从自然感染温氏附红细胞体(E.wenyoni)的牛血液中纯化附红细胞体后,采用SDS-PAGE和免疫印迹技术分析E.wenyoni抗原蛋白组分;结果SDS-PAGE结果显示,... 研究目的为制备E.wenyoni特异性诊断抗原及研制高效附红细胞体疫苗提供基础进行试验;方法从自然感染温氏附红细胞体(E.wenyoni)的牛血液中纯化附红细胞体后,采用SDS-PAGE和免疫印迹技术分析E.wenyoni抗原蛋白组分;结果SDS-PAGE结果显示,E.wenyoni全蛋白分子量范围为24kD ̄150kD,主要的9种蛋白质分子量分别为141.34kD,107.27kD,86.03kD,68.05kD,56.21kD,44.30kD,32.99kD,28.89kD,24.59kD;免疫印迹筛选出3特异性蛋白质,分子量分别为147.31kD,49.03kD,35.72kD;结论E.wenyoni主要由九种类抗原蛋白组成,3种特异性蛋白质,可作为E.weny-oni特异性诊断抗原及附红细胞体疫苗的保护性抗原。 展开更多
关键词 奶牛 温氏细胞体 抗原 SDS-PAGE 免疫印迹
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自然感染温氏附红细胞体奶牛血液学指标的研究 被引量:1
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作者 张富梅 秦建华 +2 位作者 白迎春 李寸欣 王健 《中国奶牛》 2006年第12期37-38,共2页
选用自然感染温氏附红细胞体的奶牛40头,分为两组,每组20头,Ⅰ组红细胞感染率小于10%,Ⅱ组大于90%,测定血液中红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积、白细胞数以及红细胞渗透脆性和红细胞沉降率,结果显示,随着感染强度的提高,血液学指标... 选用自然感染温氏附红细胞体的奶牛40头,分为两组,每组20头,Ⅰ组红细胞感染率小于10%,Ⅱ组大于90%,测定血液中红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积、白细胞数以及红细胞渗透脆性和红细胞沉降率,结果显示,随着感染强度的提高,血液学指标发生了明显变化,机体的正常机能受到了影响。 展开更多
关键词 奶牛 温氏细胞体 血液学指标
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温氏附红细胞体病PCR诊断方法的建立及其应用 被引量:2
14
作者 李树清 杜凯 +4 位作者 胡永强 陈声国 陈志飞 周艳琴 赵俊龙 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期817-821,共5页
为建立特异、敏感、快速的温氏附红细胞体诊断方法,根据温氏附红细胞体16S rRNA基因序列(GenBank登录号为AY946266),设计1对种特异性引物,建立了温氏附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该方法能特异性地扩增温... 为建立特异、敏感、快速的温氏附红细胞体诊断方法,根据温氏附红细胞体16S rRNA基因序列(GenBank登录号为AY946266),设计1对种特异性引物,建立了温氏附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该方法能特异性地扩增温氏附红细胞体16S rRNA基因序列的特异性片段,检测温氏附红细胞体最低DNA量为0.178 fg。利用该方法对湖北省、江苏省和黑龙江省温氏附红细胞体病感染情况进行了流行病学调查,结果显示阳性感染率分别为10.3%、5.3%、45.8%,说明温氏附红细胞体在湖北省、江苏省和黑龙江省均存在,流行病学调查显示湖北省感染率较高、流行较广。 展开更多
关键词 温氏细胞体 PCR 16SrRNA 应用
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猪附红细胞体病再认识
15
作者 袁春景 《当代畜禽养殖业》 2012年第3期31-33,共3页
附红细胞体病简称附红体病,是多种动物共患的一种散发的热性、溶血性传染病。常呈隐性感染,临床病畜常以发热、贫血、腹泻和黄疸为特征。1病原寄生在红细胞体表面的温氏附红细胞体。
关键词 细胞体 温氏细胞体 隐性感染 传染病 溶血性 表面 病畜
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牛附红细胞体病的防治
16
作者 张立颖 《中国动物保健》 2011年第7期55-56,共2页
牛附红细胞体病是由牛温氏附红细胞体寄生于人和动物红细胞表面及血浆中引起的一种热性、溶血性人畜共患传染病,该病主要以发热、消瘦、贫血、黄疸为主要特征。
关键词 细胞体 温氏细胞体 人畜共患传染病 防治 细胞表面 溶血性 寄生 消瘦
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温氏附红细胞体PCR检测方法的建立 被引量:1
17
作者 王健 刘媛 +1 位作者 秦建华 张富梅 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第12期70-72,共3页
本研究旨在建立1种快速准确检测温氏附红细胞体感染的分子生物学诊断方法。根据温氏附红细胞体的16S rRNA基因参考序列的保守区,利用软件Primer Premier 5.0设计合成了1对特异性引物,对温氏附红细胞体的基因组DNA进行PCR检测。结果表明... 本研究旨在建立1种快速准确检测温氏附红细胞体感染的分子生物学诊断方法。根据温氏附红细胞体的16S rRNA基因参考序列的保守区,利用软件Primer Premier 5.0设计合成了1对特异性引物,对温氏附红细胞体的基因组DNA进行PCR检测。结果表明,扩增出1段985bp的DNA序列,EcoRⅠ酶切鉴定得到2条500bp左右的条带,与预期结果一致,说明该方法扩增出了温氏附红细胞体的特异性条带。通过敏感性、特异性、重复性和临床样品检测试验证明,该方法具有特异、灵敏、快速的优点。结果提示,所建立的方法具有较高的特异性和灵敏性,可用于牛附红细胞体病诊断和流行情况监测。 展开更多
关键词 温氏细胞体 PCR
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温氏附红细胞体特异抗原组分免疫效果分析
18
作者 王健 刘媛 +2 位作者 张富梅 李子平 秦建华 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第1期71-73,共3页
从感染率90%以上的阳性牛血中分离温氏附红细胞体,利用反复冻融-超声波裂解法制备温氏附红细胞体抗原蛋白悬液,通过切胶纯化和免疫印迹法筛选具有良好免疫原性的抗原组分,制备温氏附红细胞体亚单位疫苗,并同时将抗原悬液灭活后制成温氏... 从感染率90%以上的阳性牛血中分离温氏附红细胞体,利用反复冻融-超声波裂解法制备温氏附红细胞体抗原蛋白悬液,通过切胶纯化和免疫印迹法筛选具有良好免疫原性的抗原组分,制备温氏附红细胞体亚单位疫苗,并同时将抗原悬液灭活后制成温氏附红细胞体灭活苗。疫苗经检测合格后在小鼠动物模型上进行免疫持续期测定和免疫效力检验。结果显示,温氏附红细胞体亚单位疫苗对小鼠的免疫持续期为12周,免疫保护率为100%,灭活苗免疫保护率为80%,表明温氏附红细胞体特异抗原组分亚单位疫苗具有较好的免疫原性,能诱导小鼠产生良好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 温氏细胞体 抗原组分 亚单位疫苗 免疫保护
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奶牛温氏附红细胞体病的研究进展
19
作者 杨蔚 周浪 +2 位作者 袁鸿胜 李艳梅 杨华 《兽医导刊》 2021年第14期156-157,共2页
奶牛附红细胞体病是以发热、贫血为主要症状的一种疾病,感染奶牛的主要是温氏附红细胞体。目前对于附红细胞体的研究不是很深入,对其形态学、病理学、免疫学方面还不够了解。奶牛温氏附红细胞体的鉴定方法多种多样,包括镜检、血清学检... 奶牛附红细胞体病是以发热、贫血为主要症状的一种疾病,感染奶牛的主要是温氏附红细胞体。目前对于附红细胞体的研究不是很深入,对其形态学、病理学、免疫学方面还不够了解。奶牛温氏附红细胞体的鉴定方法多种多样,包括镜检、血清学检测、分子生物学检测等。本文主要介绍奶牛温氏附红细胞体鉴定方法的研究进展,并对该病做了一些简要分析。 展开更多
关键词 温氏细胞体 鉴定 特异性
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奶牛附红细胞体16SrRNA基因的克隆测序及系统发育进化树的建立 被引量:1
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作者 陈明 黄维义 +3 位作者 张为宇 李莉萍 韦家周 周春明 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2006年第3期8-10,共3页
为了从分子水平上证实奶牛附红细胞体的存在及研究其分类学地位,利用原核生物16S rRNA基因通用引物对分离纯化的疑似奶牛附红细胞体进行16S rRNA基因的PCR扩增及克隆测序。结果扩增出长约1.5 kb的目的片段,测序结果表明:目的片段长度为1... 为了从分子水平上证实奶牛附红细胞体的存在及研究其分类学地位,利用原核生物16S rRNA基因通用引物对分离纯化的疑似奶牛附红细胞体进行16S rRNA基因的PCR扩增及克隆测序。结果扩增出长约1.5 kb的目的片段,测序结果表明:目的片段长度为1 439 bp,其核苷酸序列与国外已发表的牛温氏附红细胞体(E.wenyoni)的16SrRNA基因片段同源性高达97.1%,暂称为中国广西株(E.wenyoniCGX)。系统发育进化树显示:E.wenyoni和其他血营养菌在系统进化关系上组成了一个大的进化分支,与支原体科、支原体属的病原最接近(75%),而与立克次体科的病原较远(55%)。分析结果支持了Nei mark等和Messick等提出的将这类血营养菌划归支原体科、支原体属的建议。 展开更多
关键词 温氏细胞体 16S RRNA 克隆 系统发育进化树
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