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题名深绿木霉中碳代谢抑制因子CRE1功能特性研究
被引量：2
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作者
李佩忆
周于聪
李雅乾
陈捷
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机构
上海交通大学农业与生物学院农业部都市农业(南方)重点实验室
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期17-25,共9页
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基金
国家自然科学基金（31201557）
上海市自然科学基金（12ZR1414100）
高等学校博士学科点新教师专项科研基金（20120073120070）资助项目
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文摘
木霉菌（Trichoderma spp.）是一种广泛存在于土壤及植物根系生境中的丝状真菌,具有拮抗植物病原真菌和促进植物生长的双重功效。碳代谢抑制子CRE1全局性调控细胞生长代谢过程,保障木霉在不同生境中的存活及拮抗病原菌特性。比较深绿木霉（T.atroviride）T23及其Cre1突变株（T23Δcre1）在不同培养基中的生长和代谢特性,结果表明：cre1基因沉默后,T23Δcre1较T23菌丝生长变慢,产孢滞后且降低一个数量级,cre1对菌丝生长和产孢的调控依赖于培养基组分。此外,cre1基因抑制几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶基因转录,区别性调控部分次级代谢合成的非核糖体肽合成酶NRPS和聚酮合成酶PKS基因的表达。综上,碳代谢因子CRE1作为一个多效性的转录调控因子,抑制细胞壁降解酶和代谢产物合成相关的基因表达,赋予木霉菌在环境中的适应性和竞争性,是深绿木霉T23生长的必要因子。
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关键词
深绿木霉T23
碳代谢抑制因子CRE1
生长
酶活特性
次级代谢合成基因
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Keywords
Trichoderma atroviride 23
Carbon catabolite repressor CRE1
Growth
Enzyme activity characteristics
Secondary metabolism synthesis genes
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分类号
Q291
[生物学—细胞生物学]
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题名改良ATMT转化技术在深绿木霉基因敲除中的应用
被引量：2
- 2
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作者
周于聪
谢秋瑾
宋凯
杨朝晖
陈捷
李雅乾
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机构
上海交通大学农业与生物学院农业部都市南方重点试验室
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出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期58-64,共7页
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基金
国家自然科学基金(31201557)
上海市自然科学基金(12ZR1414100)
高等学校博士学科点新教师专项科研基金(20120073120070)资助项目
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文摘
木霉菌是环境中具有重要经济价值的丝状真菌之一。高效率的基因敲除技术是深入研究木霉菌功能的必要手段。研究改进了传统的农杆菌介导的遗传转化技术（ATMT）,成功构建深绿木霉T23中碳代谢抑制因子cre1基因敲除突变株。首先查找深绿木霉全基因组序列,比对并扩增cre1基因侧翼序列,以改造后的p1300qh质粒为骨架构建cre1敲除载体p C1300qh：cre1-up∷hyg∷cre1-down,转化到农杆菌AGL-1。通过优化ATMT转化中木霉菌分生孢子浓度,改良培养方式和延长诱导转化时间等参数,获得最佳转化条件：木霉菌分生孢子浓度为8×10~6,筛选培养基改为IM培养基,诱导转化时间延长,成功筛选到可能的转化子10个。最后,经鉴定有1个转化子为cre1敲除转化子,9个为T-DNA随机插入。因此,为深绿木霉菌基因功能研究提供了可借鉴的高效便捷的遗传转化方法。
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关键词
深绿木霉T23
农杆菌介导的遗传转化方法ATMT
碳代谢抑制因子CRE1
筛选鉴定
优化
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Keywords
Trichoderma atroviride 23 Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation Carbon catabolite repressor CREI Identification Optimization
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分类号
Q819
[生物学—生物工程]
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