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宫颈癌组织中Zac1和LEF1的表达及临床意义 被引量：3
1
作者 刘燕 朱莉 田冰 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第10期1216-1220,共5页
目的 探讨宫颈癌患者中多形性腺瘤基因样锌指因子1(Zac1)与淋巴增强子结合因子1(LEF1)的表达及其临床意义。方法 选取2014年5月至2017年5月该院诊治的83例宫颈癌患者为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测宫颈癌组织和癌旁组织中Zac1与L... 目的 探讨宫颈癌患者中多形性腺瘤基因样锌指因子1(Zac1)与淋巴增强子结合因子1(LEF1)的表达及其临床意义。方法 选取2014年5月至2017年5月该院诊治的83例宫颈癌患者为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测宫颈癌组织和癌旁组织中Zac1与LEF1的相对表达水平;采用统计学分析癌组织中Zac1、LEF1的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系;采用Pearson相关分析Zac1和LEF1相对表达水平的相关性;采用Kaplan-Meier生存分析Zac1、LEF1的表达对宫颈癌患者生存预后的影响;采用多因素COX回归分析影响宫颈癌患者生存预后的危险因素。结果 与癌旁组织比较,宫颈癌组织中Zac1的相对表达水平较低,LEF1相对表达水平较高(P<0.05)。宫颈癌中Zac1与LEF1的相对表达水平呈负相关(r=-0.570,P<0.001)。宫颈癌中Zac1、LEF1的相对表达水平与肿瘤FIGO分期及淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、病理类型、肿瘤分化程度和浸润深度无关(P>0.05)。低Zac1表达的宫颈癌患者的生存率明显低于高Zac1表达患者,高LEF1表达的宫颈癌患者的生存率明显低于低LEF1表达患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,Zac1低表达(HR=2.473,95%CI 1.560~4.610),LEF1高表达(HR=1.780,95%CI 1.091~2.283),肿瘤FIGO分期Ⅱ期(HR=1.731,95%CI 1.112~2.502)及淋巴结转移(HR=2.810,95%CI 1.353~4.816)是宫颈癌患者生存预后的危险因素。结论 宫颈癌中Zac1表达降低,LEF1表达升高,两者的表达与肿瘤FIGO分期和淋巴结转移有关,是新的评价宫颈癌预后的肿瘤标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 多形性腺瘤基因样锌指因子1 淋巴增强子结合因子1
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淋巴增强子结合因子1在肾间质纤维化中的作用及机制
2
作者 张蒙 王惠明 《医学研究杂志》 2023年第11期83-88,15,共7页
目的探讨淋巴增强子结合因子1(lymphoid enhancer binding factor 1,LEF1)在肾间质纤维化中的作用及机制。方法将18只C57BL/6小鼠,采用完全随机设计分为单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)3天组、UUO 7天组和假手术... 目的探讨淋巴增强子结合因子1(lymphoid enhancer binding factor 1,LEF1)在肾间质纤维化中的作用及机制。方法将18只C57BL/6小鼠,采用完全随机设计分为单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)3天组、UUO 7天组和假手术组。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及Masson染色观察肾组织病理变化,Western blot法及免疫组化法检测肾组织中LEF1的表达。Western blot法检测10ng/ml及20ng/ml转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激24h后LEF1的蛋白表达。体外培养HK-2细胞,并分为4组,即Ctrl siRNA组、LEF1siRNA组、Ctrl siRNA+TGF-β1组和LEF1siRNA+TGF-β1组。Western blot法检测HK-2中LEF1、纤连蛋白(fibronectin,FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、多聚磷酸核糖聚合酶剪切体(cleaved poly ADP-ribose polymerase,cleaved PARP)、半胱氨酸蛋白酶-3剪切体(cleaved caspase-3)等蛋白的相对表达水平,比较4组细胞各蛋白相对表达水平的差异。流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。结果UUO组出现小管扩张、炎性细胞浸润及胶原沉积,LEF1表达高于假手术组(P<0.05)。TGF-β1可导致HK-2细胞中LEF1的蛋白表达水平升高(P<0.05)。LEF1siRNA转染HK-2细胞敲低其表达可以减轻细胞的纤维化反应(P<0.05)。敲低LEF1可以延缓上皮间充质转化(epithelial–mesenchymal transition,EMT)进程并减轻HK-2的凋亡(P<0.05)。结论LEF1可以通过促进肾小管上皮细胞发生EMT进而诱导凋亡,最终导致肾间质纤维化。 展开更多
关键词 肾间质纤维化 淋巴增强子结合因子1 单侧输尿管梗阻 上皮间充质转化
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沉默长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1对人脐静脉内皮细胞的影响 被引量：1
3
作者 张昊冉 王雯秋 +7 位作者 林俊杰 乔军波 王新军 方斌 陈长宽 王宇娇 朱高赞 刘文博 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第9期1674-1676,共3页
目的观察长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1(LEF1-AS1)基因沉默后对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移和血管生成能力的影响。方法采用RNA干扰技术,在HUVEC(美国模式培养物集存库)中沉默LEF1-AS1基因的表达,细胞分为对照组与... 目的观察长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1(LEF1-AS1)基因沉默后对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移和血管生成能力的影响。方法采用RNA干扰技术,在HUVEC(美国模式培养物集存库)中沉默LEF1-AS1基因的表达,细胞分为对照组与实验组,即NC组和si-LEF1-AS1组,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测转染效果;细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell分别检测细胞增殖和迁移力的变化;体外血管生成实验检测LEF1-AS1对血管生成能力的影响。两组间比较采用独立样本t检验。结果RT-qPCR结果显示,si-LEF1-AS1组LEF1-AS1 mRNA的相对表达量(0.059±0.010)低于NC组(1.000±0.018),差异有统计学意义(t=40.824,P<0.01);CCK-8实验结果显示,HUVECs在处理24 h后si-LEF1-AS1组细胞的吸光度(A)值(0.103±0.004)少于NC组(0.129±0.006),在处理48 h后si-LEF1-AS1组细胞的A值(0.235±0.016)也少于NC组(0.431±0.018),在处理72 h后si-LEF1-AS1组细胞的A值(0.454±0.029)也少于NC组(0.846±0.034);Transwell迁移实验结果显示si-LEF1-AS1组迁移到小室下侧的相对细胞数(0.446±0.025)少于NC组(1.000±0.046),差异有统计学意义(t=17.120,P<0.01);血管形成实验结果显示si-LEF1-AS1组的总成管长度(3152.333±200.959)少于NC组(13263.667±247.823),差异有统计学意义(t=54.891,P<0.01)。结论沉默长链非编码RNA LEF1-AS1抑制HUVEC细胞的增殖、迁移及血管生成能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1 人脐静脉内皮细胞 增殖 迁移 血管生成
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LEF1慢病毒表达载体的构建及稳定肺癌细胞株的鉴定
4
作者 滕宇 李丽莉 +5 位作者 马丽 张丽娜 王玥 顾勐 王子宇 岳文涛 《生命科学仪器》 2016年第5期33-37,59,共6页
肺癌作为恶性肿瘤死亡的主要原因,其发生机制涉及诸多肿瘤相关基因的异常表达。淋巴增强子结合因子1(LEF1)是经典Wnt/β-catenin信号通路的关键转录因子,在多种肿瘤的侵袭及转移过程中发挥重要作用。本文通过构建LEF1过表达的慢病毒载体... 肺癌作为恶性肿瘤死亡的主要原因,其发生机制涉及诸多肿瘤相关基因的异常表达。淋巴增强子结合因子1(LEF1)是经典Wnt/β-catenin信号通路的关键转录因子,在多种肿瘤的侵袭及转移过程中发挥重要作用。本文通过构建LEF1过表达的慢病毒载体,在293T细胞中包装慢病毒颗粒,感染目的肺癌细胞并筛选获得稳定表达LEF1的A549及H1299肺癌细胞株,为后续鉴定LEF1直接调控的靶基因奠定细胞学基础。功能研究结果显示,过表达LEF1使上皮细胞标志物E-cadherin表达下调,而间充质细胞标志物N-cadherin表达上调,因而对肺癌细胞的上皮-间充质转化过程(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)具有明显的促进作用。 展开更多
关键词 淋巴增强子结合因子 慢病毒 肺癌 上皮-间充质转化
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异体毛乳头细胞对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制
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作者 尚亚鸽 张丽霞 +4 位作者 韩超 李梦洋 罗亮 王许杰 胡大海 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期772-780,共9页
目的探索异体毛乳头细胞(DPC)对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制。方法该研究为实验研究。利用显微解剖结合胶原酶消化法自5只6周龄雄性C57BL/6J小鼠触须毛囊中提取DPC并成功鉴定。将18只8周龄雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表... 目的探索异体毛乳头细胞(DPC)对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制。方法该研究为实验研究。利用显微解剖结合胶原酶消化法自5只6周龄雄性C57BL/6J小鼠触须毛囊中提取DPC并成功鉴定。将18只8周龄雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为磷酸盐缓冲液(PBS)组及DPC组(每组9只小鼠),在所有小鼠背部创建全层皮肤缺损创面模型。分别于伤后2、4、6 d,通过创面周围皮下注射给予DPC组小鼠含1×10^(6)个第4代DPC的细胞悬液100μL、PBS组小鼠等体积的PBS。伤后3、7、10、14 d,观察2组小鼠创面愈合情况及毛发生长情况并测量创面剩余面积;另测量2组小鼠伤后14 d创面毛发覆盖面积。伤后14 d,收集2组小鼠创面组织标本,行苏木精-伊红染色观察新生毛囊情况并计数,行Masson染色观察真皮层胶原沉积情况并测量胶原沉积面积,采用免疫荧光法检测Wnt/β连环蛋白信号通路相关分子β连环蛋白、淋巴增强结合因子1(Lef1)的蛋白表达,分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量反转录PCR法检测β连环蛋白、Lef1的蛋白和mRNA表达。各实验样本数均为3。结果与PBS组相比,DPC组小鼠伤后各时间点创面再上皮化速度加快,且在伤后10、14 d可见更多毛发生长。伤后7、10、14 d,DPC组小鼠创面剩余面积分别为(13.92±2.90)、(3.69±1.78)、(1.09±0.14)mm^(2),分别明显小于PBS组的(26.19±2.06)、(10.84±3.59)、(6.75±2.11)mm^(2)(t值分别为5.85、3.09、4.63,P值均<0.05)。伤后14 d,DPC组小鼠创面毛发覆盖面积为(62±7)mm^(2),明显大于PBS组的(35±6)mm 2(t=2.89,P<0.05)。伤后14 d,与PBS组比较,DPC组小鼠创面组织中新生毛囊数量明显增多(t=5.43,P<0.05),真皮层胶原沉积面积明显缩小(t=3.56,P<0.05)。伤后14 d,免疫荧光法和蛋白质印迹法检测均显示,DPC组小鼠创面组织中β连环蛋白(t值分别为5.49、4.25,P值均<0.05)和Lef1(t值分别为7.50、11.54,P值均<0.05)的蛋白表� 展开更多
关键词 创伤和损伤 伤口愈合 淋巴样增强子结合因子1 胶原 毛囊再生 毛乳头细胞 Wnt/β连环蛋白信号通路
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淋巴样增强因子-1在胰腺导管腺癌中的表达及对预后的影响
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作者 李珂珂 孔盼盼 +2 位作者 易超 王喜艳 晏冬 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2021年第10期608-613,共6页
目的研究Wnt信号通路中淋巴样增强因子-1(LEF-1)在胰腺导管腺癌(PDAC)中的表达及其意义。方法采用荧光定量PCR检测人PDAC细胞株PANC-1和正常胰腺导管上皮细胞株HPDE6中LEF-1 mRNA的相对表达情况;收集2012年6月至2013年12月新疆医科大学... 目的研究Wnt信号通路中淋巴样增强因子-1(LEF-1)在胰腺导管腺癌(PDAC)中的表达及其意义。方法采用荧光定量PCR检测人PDAC细胞株PANC-1和正常胰腺导管上皮细胞株HPDE6中LEF-1 mRNA的相对表达情况;收集2012年6月至2013年12月新疆医科大学附属肿瘤医院肝胆胰外科保存的胰腺癌组织标本45例及其对应的癌旁组织标本45例, 应用免疫组织化学法检测癌组织及癌旁组织中LEF-1的表达情况, 分析LEF-1的表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果荧光定量PCR示PANC-1细胞株中LEF-1 mRNA的相对表达量明显高于HPDE-6细胞株(2.895±0.485vs. 1.006±0.126, t=3.056, P<0.001)。免疫组织化学结果显示, LEF-1在癌组织中高表达33例(73.3%), 高于癌旁组织的12例(26.7%), 差异有统计学意义(χ^(2)=14.815, P<0.001);LEF-1的表达与术前糖类抗原(CA)19-9水平(P<0.001)、局部淋巴结转移(P=0.041)有关。生存分析示, PDAC患者整体中位总生存期(OS)为22.0个月, LEF-1高表达患者(n=33)中位OS为19.0个月, LEF-1低表达患者(n=12)中位OS为31.0个月, 差异有统计学意义(χ^(2)=5.554, P=0.018)。单因素Cox回归分析结果显示, 与OS相关的因素有年龄(HR=1.962, 95%CI为1.043~3.692, P=0.037)、LEF-1(HR=2.253, 95%CI为1.097~4.630, P=0.027)和CA19-9(HR=2.667, 95%CI为1.258~5.656, P=0.011)。多因素Cox回归分析示, CA19-9(HR=6.431, 95%CI为1.078~38.382, P=0.041)、CA125(HR=0.151, 95%CI为0.027~0.839, P=0.031)、原发肿瘤大小(HR=8.364, 95%CI为1.925~36.335, P=0.005)、LEF-1(HR=2.281, 95%CI为1.025~5.075, P=0.043)是影响PDAC患者预后的独立危险因素。结论 LEF-1在PDAC组织中表达上调, 与术前CA19-9水平、局部淋巴结转移呈正相关, 是PDAC患者预后的独立影响因素。 展开更多
关键词 淋巴样增强子结合因子1 WNT信号通路 胰腺肿瘤 预后
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