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金钗石斛生物总碱对体外低氧低糖培养海马神经元β位点剪切酶1和β淀粉样蛋白的影响 被引量：5
1
作者 苏义 付英杰 +2 位作者 李国艳 詹剑 余昌胤 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2013年第8期870-873,共4页
目的观察金钗石斛生物总碱(DNLA)对体外低氧低糖培养乳鼠海马神经元细胞活力、β位点剪切酶1(β-site APP-cleaving enzyme 1,BACE-1)和β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的影响。方法取新生SD乳鼠海马神经元原代培养、鉴定,培养至... 目的观察金钗石斛生物总碱(DNLA)对体外低氧低糖培养乳鼠海马神经元细胞活力、β位点剪切酶1(β-site APP-cleaving enzyme 1,BACE-1)和β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的影响。方法取新生SD乳鼠海马神经元原代培养、鉴定,培养至第8天,分为:正常对照组、溶媒对照组、低氧低糖组、DNLA干预组。观察时间点为12、24和36h。采用MTT法检测海马神经元细胞活力,ELISA法测定BACE-1蛋白含量,放射免疫法检测培养液中Aβ含量。结果正常对照组与溶媒对照组各时间点海马神经元细胞活力、BACE-1和Aβ含量比较,差异无统计学意义(P>0.05);与正常对照组比较,低氧低糖组各时间点海马神经元细胞活力明显降低,BACE-1和Aβ含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.01);与低氧低糖组比较,DNLA干预组各时间点海马神经元细胞活力明显增高,BACE-1和Aβ含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 DNLA可提高低氧低糖培养海马神经元细胞活力,降低低氧低糖培养的乳鼠海马神经元BACE-1和Aβ含量。 展开更多
关键词 石斛 抗氧化剂 海马 淀粉样b蛋白 脑梗死
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阿尔茨海默病新型免疫治疗方法 被引量：2
2
作者 Priyanka Sabharwal Thomas Wisniewski 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2014年第3期139-151,共13页
阿尔茨海默病为世界范围内的痴呆常见类型,是目前全球关注的健康热点问题。针对β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积和过度磷酸化tau蛋白聚集的内在生物化学机制已有深入研究,来源于正常可溶性Aβ肽的Aβ寡聚体被认为最具毒性。然而,纤维状Aβ聚集... 阿尔茨海默病为世界范围内的痴呆常见类型,是目前全球关注的健康热点问题。针对β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积和过度磷酸化tau蛋白聚集的内在生物化学机制已有深入研究,来源于正常可溶性Aβ肽的Aβ寡聚体被认为最具毒性。然而,纤维状Aβ聚集形成淀粉样斑块和淀粉样脑血管病是阿尔茨海默病的主要病理改变;而异常磷酸化tau蛋白沉积并形成可溶性毒性寡聚体,进而聚集成为神经原纤维缠结,则是其另一重要病理特征。目前,已有许多措施用于抑制、清除或减缓阿尔茨海默病淀粉样斑块的病理进程,而免疫治疗是这一领域中的新的突破。针对Aβ沉积阿尔茨海默病动物模型进行的主动和被动免疫治疗,已取得重大研究成果。然而,临床试验仅有极少数据显示出明确的疗效,究其原因在于免疫治疗引起的并发症。主动免疫实验引起的脑炎,以及被动免疫治疗在少数人群中诱发的血管源性水肿或淀粉样蛋白相关显像异常已有相关报道。迄今为止,单纯针对tau蛋白聚集的治疗仍然仅局限于小鼠模型,鲜有研究同时针对Aβ沉积和tau蛋白聚集两种病理特征。到目前为止,大部分免疫治疗均以自身蛋白为靶向,尽管其构造异常,在取得疗效的同时,需防止引起过度毒性炎症反应的可能。为取得更好的疗效,未来的免疫治疗应集中在毒性寡聚体,并以阿尔茨海默病的所有病理特征为靶向。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淀粉样b蛋白 微管相关蛋白质类 免疫疗法 综述
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复方金思维对阿尔茨海默病大鼠脑组织ProSAP/Shank蛋白表达的影响 被引量：1
3
作者 李小黎 田金洲 +3 位作者 盛树力 赵志炜 徐意 姬志娟 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第21期35-37,共3页
目的:观察突触后蛋白ProSAP/Shank在模型大鼠脑内表达的变化,探讨复方金思维对阿尔茨海默病大鼠的神经保护作用。方法:实验于2004-11-15/2005-02在北京中医药大学东直门医院药理实验室及首都医科大学宣武医院神经生化室进行。取雄性SD大... 目的:观察突触后蛋白ProSAP/Shank在模型大鼠脑内表达的变化,探讨复方金思维对阿尔茨海默病大鼠的神经保护作用。方法:实验于2004-11-15/2005-02在北京中医药大学东直门医院药理实验室及首都医科大学宣武医院神经生化室进行。取雄性SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只:①生理盐水组:脑海马注入2μL生理盐水,3d后灌胃3mL的双蒸水。②模型组:脑海马缓慢注入2μL淀粉样β蛋白1～42(5g/L),复制拟阿尔茨海默病模型,造模后3d灌胃3mL的双蒸水。③盐酸多奈哌齐组:造模同模型组,造模后3d灌胃盐酸多奈哌齐(0.92mg/kg)。④金思维组:同前造模,造模后3d灌胃复方金思维(由人参、肉苁蓉、石菖蒲、郁金等组成,浓度0.36g/mL,剂量0.7μL/g)。所有给药均1次/d,连续4周。4周后以Morris水迷宫测试大鼠学习期间的逃避潜伏期和游泳距离,记忆测定中的记忆能力,以进行行为学评价。检测大鼠脑海马CA1区、皮质突触后蛋白ProSAP/Shank的变化应用免疫组化方法。结果:经补充后32只大鼠进入结果分析。①Morris水迷宫的学习、记忆测试结果:模型组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力显著低于生理盐水组(P<0.01),盐酸多奈哌齐组、金思维组大鼠逃避潜伏期、游泳距离及记忆能力较模型组高(P<0.05),盐酸多奈哌齐组和金思维组无差异(P>0.05)。②脑海马CA1区ProSAP/Shank蛋白免疫组化测定结果:模型组平均面密度低于生理盐水组和金思维组(14.35±3.66,21.21±5.66,19.67±3.83,P<0.05),模型组的平均吸光度也低于生理盐水组、盐酸多奈哌齐组和金思维组(68.74±5.98,121.93±8.69,84.36±13.56,84.58±8.24,P<0.01)。③脑皮质区ProSAP/Shank蛋白免疫组化测定结果:模型组的平均吸光度低于生理盐水组和金思维组(84.12±19.40,138.93±28.62,106.53±5.08,P<0.01)。结论:淀粉样β蛋白海马注射可致海马CA1区及皮质Shank蛋白表达下降,说明淀粉样β蛋白聚集损 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 突触 淀粉样b蛋白 中药 大鼠
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姜黄素修饰透明质酸的自组装特性及其对Aβ40聚集的抑制作用:透明质酸相对分子质量的影响 被引量：1
4
作者 董晓燕 林进忠 蒋志强 《天津大学学报（自然科学与工程技术版）》 EI CSCD 北大核心 2018年第8期870-878,共9页
淀粉样β蛋白(amyloidβ-peptide,Aβ)的聚集是阿尔兹海默症的主要病因.姜黄素(curcumin,Cur)是一种良好的Aβ聚集小分子抑制剂,但其存在水溶性和稳定性差等缺点.针对该问题,笔者先前将Cur修饰在透明质酸(hyaluronic acid,HA)上形成自... 淀粉样β蛋白(amyloidβ-peptide,Aβ)的聚集是阿尔兹海默症的主要病因.姜黄素(curcumin,Cur)是一种良好的Aβ聚集小分子抑制剂,但其存在水溶性和稳定性差等缺点.针对该问题,笔者先前将Cur修饰在透明质酸(hyaluronic acid,HA)上形成自组装纳米粒子CHA,不仅改善了Cur的水溶性和稳定性,而且还提高了Cur对Aβ聚集的抑制效果.为进一步考察HA的相对分子质量对纳米粒子自组装特性及其对Aβ聚集的抑制作用的影响,本研究将Cur分别以不同修饰度(substitution degree,SD)修饰在相对分子质量40、300和1,000的HA上,得到3类CHA.实验结果表明:HA相对分子质量能影响CHA的纳米结构及其最佳SD,HA相对分子质量越大,形成的CHA纳米结构越疏松,因而其最佳SD越大;在最佳SD下,相对分子质量为300的HA自组装形成的CHA的纳米结构最为合适,其抑制效果最好.研究结果对自组装纳米药物的设计具有重要的参考意义. 展开更多
关键词 淀粉样b蛋白 纳米抑制剂 自组装纳米粒子 姜黄素一透明质酸结合物
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阿尔茨海默病胰岛素样生长因子Ⅰ受体与β淀粉样蛋白的相关性分析 被引量：1
5
作者 刘歆 张一娜 +1 位作者 姜礼红 滕宗艳 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期1062-1065,共4页
目的从受体角度探讨中枢胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF—Ⅰ）信号失调和阿尔茨海默病可能的分子发病机制。方法不同浓度的Aβ1-42。处理体外培养的原代海马神经细胞，流式细胞术鉴定细胞凋亡比例，实时定量PCR和Western印迹法检钡0IGF—Ⅰ受... 目的从受体角度探讨中枢胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF—Ⅰ）信号失调和阿尔茨海默病可能的分子发病机制。方法不同浓度的Aβ1-42。处理体外培养的原代海马神经细胞，流式细胞术鉴定细胞凋亡比例，实时定量PCR和Western印迹法检钡0IGF—Ⅰ受体的表达。结果海马神经细胞第7天发育成熟；经流式细胞术检测，Aβ1-42 0、30、60、100μmoL／L各处理组的细胞凋亡比例呈浓度依赖性增高。PCR结果提示30（1．72β0．33）和60μmol／L（1．86±0．36）处理组的IGF—Ⅰ受体水平明显高于对照组（设为1）（P〈0．01），100txmol／L组（0．70±0．15）则明显低于对照组（P〈0．05）。Western结果与PCR结果趋势相似，30和60μmol／L处理组的蛋白水平为1．08±0．04，1．74±0．08（P〈0．01），100μmol／L组为0．79±0．11（P〈0．05）。结论Aβ1-42诱导大鼠海马细胞IGF—I受体的表达发生改变，可能为阿尔茨海默病发病的分子机制之一。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淀粉样b蛋白 海马 受体 IGF一1型
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缺血性卒中后认知损害：病理生理学机制和预测因素 被引量：7
6
作者 金岳心子 徐运 《国际脑血管病杂志》 2017年第3期263-267,共5页
缺血性卒中引起的认知损害日益引起关注，探究其病理生理学机制和相关临床预测指标对了解疾病的发生、发展和治疗至关重要。文章从脑白质损伤、淀粉样蛋白异常沉积、血脑屏障破坏和突触可塑性损伤等方面探讨了卒中后认知损害的病理生理... 缺血性卒中引起的认知损害日益引起关注，探究其病理生理学机制和相关临床预测指标对了解疾病的发生、发展和治疗至关重要。文章从脑白质损伤、淀粉样蛋白异常沉积、血脑屏障破坏和突触可塑性损伤等方面探讨了卒中后认知损害的病理生理学机制，并对可用于预测卒中后认知损害的危险因素、影像学检查和物学标志物进行了综述。 展开更多
关键词 卒中 脑缺血 认知障碍 痴呆 血管性 炎症 淀粉样b蛋白肽 血脑屏障 神经元可塑性 生物标志物 危险因素
原文传递
荧光标记的突变型淀粉样前体蛋白裂解过程的细胞研究
7
作者 李晓晴 张苏明 +3 位作者 骆清铭 张旻 张智红 薛峥 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期189-194,共6页
目的研究淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APP）酶解过程，构建含有Swedish和APP717两种突变的荧光真核表达系统。方法以pcDNA3．0-APP为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）得到含有APP717突变的APP最后300个碱基片段（C99）... 目的研究淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APP）酶解过程，构建含有Swedish和APP717两种突变的荧光真核表达系统。方法以pcDNA3．0-APP为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）得到含有APP717突变的APP最后300个碱基片段（C99）；以pcDNA3．0-CFP—CaM-YFP酶切产物为模板，通过PCR分别得到编码蓝色荧光蛋白（CFP）和黄色荧光蛋白（YFP）碱基序列；生物合成含有Swedish突变的APP中间54个碱基片段（54bp）。利用基因工程技术将CFP、54bp、YFP、C99片段克隆至载体质粒pcDNA3．0中，通过酶切、PCR、测序鉴定最终得到重组质粒pcDNA3．0-CFP-54bp-YFP-C99和pcDNA3．0-CFP-54bp-YFP，并将其转染至人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞中，利用多光子共聚焦显微镜观察荧光表达，检测荧光共振能量转移（FRET）以及免疫细胞化学染色观察B淀粉样蛋白（Ag）。结果（1）基因序列分析证明重组质粒构建成功。（2）利用多光子共聚焦显微镜观察转染细胞，显示融合基因能够准确表达蓝色和黄色荧光。（3）表达CFP-54bp—YFP的细胞有FRET现象，而表达CFP-54bp-YFP-C99的细胞中观察不到FRET现象。（4）利用多光子共聚焦显微镜发现CFP-54bp-YFP-C99转染的细胞中有YFP标记的Aβ产生并沉积在胞质胞膜以及细胞间隙中。（5）免疫细胞化学检测证实CFP-54bp-YFP—C99经过裂解可以产生Aβ，Aβ在细胞膜、细胞质、细胞间隙聚集沉积。结论（1）融合基因的表达产物能够完成APP的有序裂解产生Aβ。（2）Ag有可能产生于APP由胞质至胞膜的运输过程中。（3）研究显示C99对于APP被裂解有重要意义，可能起到信号肽样的引导定位作用。（4）在细胞外形成沉积之前，Aβ已经在细胞内聚集导致细胞形态改变。 展开更多
关键词 淀粉样b蛋白前体 荧光共振能量转移 显微镜检查 共焦 转染
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