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题名马铃薯液泡蔗糖转化酶原核表达及多克隆抗血清的制备
被引量：1
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作者
巩慧玲
吕鹏
刘金宝
梁金永
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机构
兰州理工大学生命科学与工程学院
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出处
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期155-160,共6页
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基金
旱区作物逆境生物学国家重点实验室(西北农林科技大学)开放课题(CSBAAKF2018006)
国家自然科学基金项目(31860397)。
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文摘
马铃薯液泡蔗糖转化酶在马铃薯块茎低温糖化过程中起着关键作用。将马铃薯液泡蔗糖转化酶基因StVIN1的N端部分片段连接到原核表达载体pET-28a,将重组质粒pET-28a-StVIN1-N通过热激的方法转化到宿主大肠杆菌BL21(DE3)中,经0.84 mmol/L IPTG诱导得到带有6×His标签的融合蛋白。以纯化后的蛋白为抗原免疫家兔,获得多克隆抗血清。利用得到的抗血清对纯化后的蛋白进行Western blot鉴定,结果表明所制备的多克隆抗血清具有良好的特异性。
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关键词
马铃薯
液泡蔗糖转化酶
原核表达
多克隆抗血清
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Keywords
potato
vacuolar invertase
prokaryotic expression
polyclonal antisera
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分类号
S532
[农业科学—作物学]
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题名马铃薯液泡蔗糖转化酶基因超表达载体的构建
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作者
巩慧玲
吕鹏
刘金宝
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机构
兰州理工大学生命科学与工程学院
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出处
《中国食品工业》
2020年第7期40-42,共3页
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文摘
目的:构建马铃薯StVIN1超表达载体,为构建马铃薯超表达液泡蔗糖转化酶植株提供基础。方法:提取马铃薯总RNA并反转录成cDNA,用同源重组的方法连接到超表达载体pCAMBIA-1303上,将重组质粒转入克隆菌株2984中并进行菌落PCR及质粒酶切鉴定,最后构建成功的重组质粒用冻融法转入根癌农杆菌GV3101中并进行菌落PCR鉴定。结果:通过菌落PCR及质粒酶切鉴定,构建出超表达载体pCAMBIA-1303-StVIN1成功转入根癌农杆菌GV3101中。
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关键词
马铃薯
液泡蔗糖转化酶
超表达载体构建
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分类号
S53
[农业科学—作物学]
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