我国牛羊流行性出血病血清抗体调查 被引量：10

1

作者 杨振兴 吕敏娜 +6 位作者 朱沛 杨恒 肖雷 廖德芳 谢佳芮 朱建波 李华春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期29-34,共6页

为了解流行性出血病(EHD)在我国的流行和分布情况,本研究采用竞争ELISA试验方法,对2015年～2017年我国吉林、河北、西藏、重庆、云南等15个省区的6 413份牛羊血清样品进行检测。结果显示,未发现绵羊EHDV阳性血清,山羊EHDV血清阳性率较... 为了解流行性出血病(EHD)在我国的流行和分布情况,本研究采用竞争ELISA试验方法,对2015年～2017年我国吉林、河北、西藏、重庆、云南等15个省区的6 413份牛羊血清样品进行检测。结果显示,未发现绵羊EHDV阳性血清,山羊EHDV血清阳性率较低(0～4%),而牛血清EHDV阳性率有明显的地域性和季节性,由北向南逐渐升高(0～65.83%),表明EHD在我国的流行已具有广泛性;秋季阳性率(61.11%～65%)明显高于春季(10%～16.67%)和夏季(29%～32%),表明该病的流行分布状况与其媒介昆虫的活动有密切关系。本研究是我国首次大规模的EHD血清学调查,对有效防控该病提供了重要的实验数据。 展开更多

关键词 流行性出血病 血清学调查 竞争ELISA

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流行性出血病流行情况

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作者 施远国 吕敏娜 +7 位作者 李颖鑫 吴寒光 蔡海明 廖申权 戚南山 李娟 刘荣启 孙铭飞 《广东畜牧兽医科技》 2023年第6期82-88,共7页

流行性出血病(EHD)是由流行性出血病病毒(EHDV)感染引起的,由媒介昆虫传播的流行性虫媒病毒病。主要感染鹿、牛、羊,最易感动物是白尾鹿。此病在热带、亚热带地区流行,被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告的动物疫病。该文从流行性出... 流行性出血病(EHD)是由流行性出血病病毒(EHDV)感染引起的,由媒介昆虫传播的流行性虫媒病毒病。主要感染鹿、牛、羊,最易感动物是白尾鹿。此病在热带、亚热带地区流行,被世界动物卫生组织(OIE)列为法定报告的动物疫病。该文从流行性出血病的病原学、流行病学、诊断、防控等方面进行综述,旨在提高对流行性出血病危害性的认知,为流行性出血病的防控策略提供科学理论依据。 展开更多

关键词 流行性出血病 病原学 流行性 检测 防控

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2021年昆明市晋宁区流行性出血病调查报告

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作者 杨松 董明生 +1 位作者 朱建波 肖雷 《上海畜牧兽医通讯》 2023年第1期37-39,共3页

为了解流行性出血病(epizootic hemorrhagic disease,EHD)在昆明市晋宁区流行和分布情况,采用竞争性酶联免疫吸附测定方法,对2021年该地区1413份肉牛、山羊(包括奶山羊和肉山羊)血清样品进行流行性出血病病毒(epizootic hemorrhagic dis... 为了解流行性出血病(epizootic hemorrhagic disease,EHD)在昆明市晋宁区流行和分布情况,采用竞争性酶联免疫吸附测定方法,对2021年该地区1413份肉牛、山羊(包括奶山羊和肉山羊)血清样品进行流行性出血病病毒(epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)抗体检测。结果显示:山羊血清EHDV抗体阳性率较低(肉山羊阳性率为0,奶山羊阳性率为0.73%),而肉牛血清EHDV抗体阳性率较高(48.99%),舍饲牛群血清EHDV抗体阳性率高于半牧半舍牛群和放牧牛群。结果表明:昆明市晋宁区肉牛群中EHD普遍流行。该调查结果对昆明市晋宁区EHD流行病学研究具有重要意义。 展开更多

关键词 流行性出血病 血清学调查 竞争性酶联免疫吸附测定

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流行性出血病的全球流行及分布

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作者 罗倩敏 韦丽 +12 位作者 韩佃刚 叶玲玲 杨云庆 董俊 张冲 李静 尹尚莲 李瑶瑶 何昌霖 董仙兰 李丹丹 唐晓萍 艾军 《中国动物检疫》 CAS 2022年第11期96-104,共9页

流行性出血病(EHD)是由流行性出血病病毒(EHDV)引起的,经库蠓属媒介昆虫传播的非接触性传染病。根据世界动物卫生组织(WOAH)通报及相关文献报道,EHDV已在美洲、非洲、大洋洲、亚洲流行传播,流行范围逐渐扩大;欧洲虽尚未报告EHDV感染病例... 流行性出血病(EHD)是由流行性出血病病毒(EHDV)引起的,经库蠓属媒介昆虫传播的非接触性传染病。根据世界动物卫生组织(WOAH)通报及相关文献报道,EHDV已在美洲、非洲、大洋洲、亚洲流行传播,流行范围逐渐扩大;欧洲虽尚未报告EHDV感染病例,但地中海周边亚非国家暴发的EHD疫情,对欧洲构成了较高的入侵风险。本文根据文献记载以及WOAH统计信息,综述了EHDV的病原学特征及其全球流行分布状况,据此提出了EHDV宿主规模逐渐扩大、传播方式发生变化、病毒基因发生重配、人为因素促进病毒变异、气候变化引起传播媒介活跃等风险因素。基于EHDV全球流行传播情况,针对性提出了我国防控EHD的建议,以期为有效防范EHD传入提供借鉴。 展开更多

关键词 流行性出血病 流行与分布 传播路线

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云南省牛流行性出血病血清学调查 被引量：1

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作者 寇美玲 谢佳芮 +1 位作者 杨振兴 苗海生 《中国动物检疫》 CAS 2021年第7期14-17,共4页

为了解牛流行性出血病(epidemic hemorrhagic disease,EHD)在云南省的流行和分布情况,采用竞争ELISA方法,2019年对11个县市的1199份牛血清进行流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)抗体检测,同时从各县市检测出... 为了解牛流行性出血病(epidemic hemorrhagic disease,EHD)在云南省的流行和分布情况,采用竞争ELISA方法,2019年对11个县市的1199份牛血清进行流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)抗体检测,同时从各县市检测出的阳性血清中,随机选取18~50份通过微量血清中和试验进行血清型鉴定。结果显示:云南省11个县市均检测出EHDV抗体阳性样品,阳性率介于49.3%~91.3%,平均为81.8%;各地普遍存在3个及以上血清型,其中EHDV-7、-10、-6、-5血清型检出率较高,EHDV-8、-2血清型检出率较低,未检出EHDV-1型。结果表明,EHD在云南省流行广泛且较严重,流行血清型复杂。结果提示,需持续开展EHDV血清学监测,重视对该病的防控。此次血清学调查为我国西南地区EHD防控提供了数据参考。 展开更多

关键词 流行性出血病 牛 血清学 竞争ELISA 微量血清中和试验 云南省

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流行性出血病研究进展

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作者 董仙兰 韩佃刚 +9 位作者 董俊 杨云庆 祝贺 叶玲玲 张冲 尹尚莲 李瑶瑶 何昌霖 罗倩敏 艾军 《上海畜牧兽医通讯》 2021年第4期37-41,共5页

本文对流行性出血病的病原、流行病学、疫苗等的研究进展进行概述,以期为探索特异性强、灵敏度高、高效经济的诊断方法和开发疫苗研究提供参考。

关键词 流行性出血病 临床症状 流行病学 诊断方法 疫苗 研究进展

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加利福尼亚黑尾鹿蓝舌病的流行性出血病病毒的实验感染

7

作者 Work,TM 徐坤 《国外特种经济动植物》 1993年第4期24-26,共3页

关键词 鹿 黑尾鹿 蓝舌病 流行性出血病

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鹿流行性出血病酶联免疫吸附试验法的研究初报(第一部分)

8

作者 李晓成 孟广校 《动物检疫》 1991年第1期1-5,共5页

目前,用于检测鹿流行性出血病(EHD)的血清学方法较多,根据现有的资料和我们的实验结果,认为酶联免疫吸附试验(ELISA)用于检测EHDV群特异性抗体比现有的其它血清学方法优越。如快速、灵敏,节省材料,特别是结果较为可靠。近年来,许多学者... 目前,用于检测鹿流行性出血病(EHD)的血清学方法较多,根据现有的资料和我们的实验结果,认为酶联免疫吸附试验(ELISA)用于检测EHDV群特异性抗体比现有的其它血清学方法优越。如快速、灵敏,节省材料,特别是结果较为可靠。近年来,许多学者对Ibaraki病毒进行了深入研究,该病毒不仅在核酸类型,核酸电泳图谱。 展开更多

关键词 鹿 流行性出血病 检测 抗体 ELISA

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鹿流行性出血病与蓝舌病在琼脂扩散试验中交叉反应的初步研究

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作者 李晓成 《动物检疫》 1990年第5期3-7,共5页

鹿流行性出血病(Epizootic Haemorhagic Disease of deer——EHD)病毒与蓝舌病病毒(Bluetongue virus—BTV)在病聋学分类上同属于呼肠孤病毒科环状病毒属。这两种病均以昆虫为传播媒介,病的发生具有明显的季节性和地区性,感染家养及野... 鹿流行性出血病(Epizootic Haemorhagic Disease of deer——EHD)病毒与蓝舌病病毒(Bluetongue virus—BTV)在病聋学分类上同属于呼肠孤病毒科环状病毒属。这两种病均以昆虫为传播媒介,病的发生具有明显的季节性和地区性,感染家养及野生的反刍动物,有时为带毒的隐性感染。在诊断上常用血清学和病毒学方法。 展开更多

关键词 鹿 流行性出血病 蓝舌病 琼脂扩散

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广东一株牛源流行性出血病病毒的分离鉴定 被引量：23

10

作者 吕敏娜 朱建波 +10 位作者 李娟 杨振兴 林栩慧 陈琴苓 张健騑 廖申权 戚南山 吴彩艳 陈志虹 李华春 孙铭飞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期67-70,共4页

为了解广东反刍动物流行性出血病(EHD)的感染情况,本研究对采集的牛血液样品进行EHD病毒(EHDV)的RT-PCR检测,对核酸检测为阳性的样品进行病毒分离鉴定。将阳性样品接种BHK-21细胞连续传3代时出现细胞病变,扩增出了VP7基因,进行BLAST序... 为了解广东反刍动物流行性出血病(EHD)的感染情况,本研究对采集的牛血液样品进行EHD病毒(EHDV)的RT-PCR检测,对核酸检测为阳性的样品进行病毒分离鉴定。将阳性样品接种BHK-21细胞连续传3代时出现细胞病变,扩增出了VP7基因,进行BLAST序列比对,结果表明该分离株与国内外EHDV分离株的同源性达98%~100%,TCID_(50)为10^(-6.5)/50μL,不能凝集鸡红细胞,表明该分离株为EHDV,命名为GD-N133。根据VP2基因序列的分析和微量中和试验结果,确定该病毒株为EHDV-1型。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒 牛 血清型 分离 鉴定

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蓝舌病病毒和流行性出血病病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：18

11

作者 杨振兴 朱建波 +6 位作者 李占鸿 李卓然 何于雯 谢佳芮 李华春 廖德芳 杨恒 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1104-1111,共8页

为建立检测蓝舌病病毒(BTV)和流行性出血病病毒(EHDV)的快速诊断方法,笔者根据BTV的第10基因节段(Seg-10)和EHDV的第5基因节段(Seg-5)序列,分别设计BTV与EHDV的特异性引物和TaqMan探针,经过反应条件优化,建立了同时检测两种病毒的双重... 为建立检测蓝舌病病毒(BTV)和流行性出血病病毒(EHDV)的快速诊断方法,笔者根据BTV的第10基因节段(Seg-10)和EHDV的第5基因节段(Seg-5)序列,分别设计BTV与EHDV的特异性引物和TaqMan探针,经过反应条件优化,建立了同时检测两种病毒的双重荧光定量RT-PCR方法,并进行了特异性、灵敏度、重复性和临床样品检测验证。用该方法对BTV Seg-10和EHDV Seg-5节段的体外转录ssRNA为模板绘制标准曲线,相关系数(R^2)均大于0.995,线性关系较好;该方法可检测不同血清型的BTV和EHDV,与阿卡斑病病毒(AKAV)、中山病病毒(CHUV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、口蹄疫病毒(FMDV)和牛流行热病毒(BEFV)无交叉反应,表明该方法特异性强;对2种标准品的检出极限均为10 copies/uL,比常规RT-PCR敏感性高10倍;组内和组间重复试验的变异系数均小于2%;用所建立的双重荧光定量RT-PCR方法及常规RT-PCR方法,对100份血液样品和50份病毒液分别进行检测,符合率均大于90%。以上结果表明所建立的双重荧光定量RT-PCR方法具有快速、准确、敏感和稳定等优点,为BTV和EHDV感染的早期快速诊断、高通量检测及流行病学调查提供了有效的技术方法。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒 流行性出血病病毒 双重荧光定量RT-PCR

原文传递

流行性出血病病毒(EHDV)血清7型毒株在中国的首次分离与鉴定 被引量：16

12

作者 杨振兴 孟锦昕 +6 位作者 肖雷 朱建波 廖德芳 高林 李占鸿 杨恒 李华春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期602-610,共9页

流行性出血病(EHD)是由流行性出血病病毒(EHDV)感染反刍动物引起的一种虫媒病毒病,为了解中国云南EHDV的感染情况和病毒遗传特征,笔者课题组在云南省师宗县以EHDV血清学和核酸阴性的牛、羊为哨兵动物,拟对流行于云南省的EHDV进行分离与... 流行性出血病(EHD)是由流行性出血病病毒(EHDV)感染反刍动物引起的一种虫媒病毒病,为了解中国云南EHDV的感染情况和病毒遗传特征,笔者课题组在云南省师宗县以EHDV血清学和核酸阴性的牛、羊为哨兵动物,拟对流行于云南省的EHDV进行分离与鉴定。将采集于哨兵动物的EHDV核酸阳性血液接种BHK-21细胞进行病毒分离;通过血清中和试验与病毒Seg-2、Seg-3 ORF区的序列分析,确定病毒的血清型与遗传特征;采用C-ELISA和qRT-PCR方法对EHDV感染动物血液中的抗体水平与病毒核酸进行监测。结果如下:从2013年8月采集自云南师宗县哨兵牛的血样中分离出一株EHDV(毒株号YNSZ/V269/2013),血清中和试验结果表明分离的病毒为血清型7型(EHDV-7);Seg-2、Seg-3序列分析表明分离的病毒属EHDV-7 Eastern型,与日本毒株和澳大利亚EHDV-7型毒株具有最近的亲缘关系。哨兵动物病毒核酸转阳后,血清抗体迅速上升,3周后达最高点并能在该水平持续较长时间,而病毒核酸含量却迅速下降,7周后已经检测不到。本研究首次报道了EHDV-7型毒株在中国的分离、毒株序列特征以及在动物上的感染特性。研究结果可为进一步开展中国EHDV-7型病毒的全基因组测序、流行病学调查、诊断方法的建立和致病性等相关研究提供基础。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒 病毒分离鉴定 血清型 序列分析

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流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立 被引量：15

13

作者 朱建波 杨振兴 +6 位作者 肖雷 高林 苗海生 何于雯 孟锦昕 杨恒 李华春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1440-1450,共11页

为能简便、快速地进行流行性出血病病毒(epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)抗体监测,采用纯化的6型EHDV抗原包被ELISA板,以豚鼠抗EHDV-2型多克隆抗体作为竞争抗体,建立了检测EHDV群特异性抗体的竞争ELISA(C-ELISA)方法。结果... 为能简便、快速地进行流行性出血病病毒(epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)抗体监测,采用纯化的6型EHDV抗原包被ELISA板,以豚鼠抗EHDV-2型多克隆抗体作为竞争抗体,建立了检测EHDV群特异性抗体的竞争ELISA(C-ELISA)方法。结果显示:抗原最佳包被浓度为5.12μg·mL-1(1∶10 000),竞争抗体最佳稀释倍数为1∶10 000;通过对各270份阴性和阳性的牛、羊血清检测,确定该检测方法临界值为50%;特异性试验表明该ELISA方法仅能检测出不同血清型EHDV抗体,具有较好的群特异性;对已知抗体效价的阳性血清检测表明,建立的C-ELISA方法敏感性好于血清中和试验(SNT)和琼脂扩散试验(AGID);分别用C-ELISA、SNT、RTPCR和病毒分离试验对监控动物采集的血清和抗凝血样品进行检测,ELISA结果与其他3种方法检测结果对应一致。结果表明本研究建立的C-ELISA为EHDV抗体的检测提供了一种快速、敏感、稳定的方法。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒 多克隆抗体 竞争ELISA

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流行性出血病病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量：11

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作者 杨振兴 朱建波 +6 位作者 廖德芳 李占鸿 肖雷 高林 李楠 杨恒 李华春 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期280-286,共7页

为建立流行性出血病病毒(EHDV)群特异性核酸检测方法,本研究根据GenBank中登录的EHDV毒株内衣壳结构蛋白VP7基因的保守区,设计并合成1对特异性引物,建立了一步法RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性、敏感度和临床样品的检测试验。结果表... 为建立流行性出血病病毒(EHDV)群特异性核酸检测方法,本研究根据GenBank中登录的EHDV毒株内衣壳结构蛋白VP7基因的保守区,设计并合成1对特异性引物,建立了一步法RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性、敏感度和临床样品的检测试验。结果表明,该方法能特异性地检出不同地区分离的不同血清型EHDV,而对蓝舌病病毒(BTV)、中山病病毒(CHUV)和赤羽病病毒(AKAV)无交叉反应,具有较好的特异性;不同血清型的EHDV最低检出量级为1×10~2copies/uL。同时,该方法能有效地从临床抗凝血样品中检测出EHDV核酸,与病毒分离试验结果进行比较,符合率为100%。说明所建立的方法特异性强、敏感性高、可靠性好,可用于EHDV的快速检测、流行病学调查和试验研究。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒 一步RT-PCR 分子诊断

原文传递

血清6型流行性出血病病毒在我国云南的首次分离与鉴定 被引量：11

15

作者 杨振兴 寇美玲 +6 位作者 李占鸿 廖德芳 肖雷 朱建波 高林 李华春 杨恒 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1113-1119,共7页

为对流行于我国云南省的流行性出血病病毒(EHDV)进行分离与鉴定,以掌握我国流行EHDV的遗传特征与感染特性,本研究将2012年8月采集于哨兵牛的EHDV核酸阳性血液接种BHK-21细胞以分离病毒;通过血清中和试验与分离病毒的Seg-2、Seg-3基因测... 为对流行于我国云南省的流行性出血病病毒(EHDV)进行分离与鉴定,以掌握我国流行EHDV的遗传特征与感染特性,本研究将2012年8月采集于哨兵牛的EHDV核酸阳性血液接种BHK-21细胞以分离病毒;通过血清中和试验与分离病毒的Seg-2、Seg-3基因测序分析,确定病毒的血清型与遗传特征;采用C-ELISA和荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)方法对EHDV感染哨兵牛血清中的抗体水平与血液中病毒核酸进行动态监测。结果显示,经BHK-21细胞分离出一株EHDV(YNSZ/V003/2012),血清中和试验显示分离病毒属于EHDV-6型。病毒Seg-2、Seg-3基因序列分析显示YNSZ/V003/2012血清型为EHDV-6型,地域型为东方型,与日本EHDV-6亲缘关系最近。哨兵牛感染该病毒后,血清中的特异性抗体迅速上升,感染3周后抗体达最高点并能够在该水平维持较长时间,而血液中病毒核酸含量则呈迅速下降趋势,感染7周后已经检测不到病毒核酸。本研究首次报道了EHDV-6型病毒株在我国云南的分离、序列特征以及在动物中的感染特性,为进一步开展EHDV-6型的流行病学调查和致病性等相关研究奠定了基础。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒 病毒分离鉴定 血清型 序列分析

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2013~2016年中国流行性出血病病毒血清型5型的分离与遗传特征分析 被引量：11

16

作者 杨振兴 李占鸿 +7 位作者 吴健敏 王金萍 肖雷 寇美玲 朱建波 廖德芳 李华春 杨恒 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期475-483,共9页

流行性出血病病毒(Epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)是一种严重危害反刍动物的虫媒病毒,全世界已发现9种血清型EHDV,长久以来我国EHDV血清型分布、病毒活动规律和病毒遗传特征不明确,对我国的畜牧业进出口和牛羊养殖业构成... 流行性出血病病毒(Epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV)是一种严重危害反刍动物的虫媒病毒,全世界已发现9种血清型EHDV,长久以来我国EHDV血清型分布、病毒活动规律和病毒遗传特征不明确,对我国的畜牧业进出口和牛羊养殖业构成了潜在威胁。本文首次报道了2013~2016年在云南省与广西壮族自治区设立的哨兵动物中,9株EHDV-5型毒株的分离以及病毒基因节段2、3与6(Seg-2、Seg-3、Seg-6)的序列特征。中国分离的9株EHDV-5型毒株Seg-2,Seg-3与Seg-6及其编码蛋白之间高度保守,核酸与氨基酸序列相似度均大于99%,在系统发生树上聚为紧密的一簇,表明我国云南与广西流行的EHDV-5有着最近的共有祖先。中国与澳大利亚EHDV-5毒株不同基因节段之间也有着较高的序列相似度(>91%),表明两地流行EHDV-5型毒株有着共同的起源。中国毒株的Seg-2与Seg-6在系统发生树上虽与澳大利亚毒株(CSIRO 157)聚为一簇,但最终形成了独立的进化分支,表明中国流行的EHDV-5发生了独立的进化。本研究首先丰富了世界范围内EHDV-5型毒株资源,其次为我国开展EHDV-5病毒的更深入研究提供了宝贵材料和理论数据。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒(EHDV) 序列分析 血清型 地域基因型

原文传递

云南省边境地区牛流行性出血病病毒血清学调查 被引量：8

17

作者 和东华 杨振兴 +3 位作者 高林 谢佳芮 李华春 朱建波 《云南畜牧兽医》 2016年第5期7-10,共4页

云南省边境地区属热带亚热带气候,吸血昆虫种类繁多,虫媒病毒活动频繁,但流行性出血病病毒对牛的感染情况不清。为了明确流行性出血病病毒在云南省边境地区的活动情况,分别从云南省边境的8个市(县)共收集了2 737份牛血清,通过竞争性酶... 云南省边境地区属热带亚热带气候,吸血昆虫种类繁多,虫媒病毒活动频繁,但流行性出血病病毒对牛的感染情况不清。为了明确流行性出血病病毒在云南省边境地区的活动情况,分别从云南省边境的8个市(县)共收集了2 737份牛血清,通过竞争性酶联免疫吸附试验进行检测,并对部分代表性阳性血清样品进行细胞微量中和试验,确定了各地存在的流行性出血病病毒血清型。本次调查结果对于云南省边境地区流行性出血病的防控提供了科学依据。 展开更多

关键词 云南省 边境地区 流行性出血病病毒 血清型

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流行性出血病病毒血清分型RT-PCR方法的建立及应用 被引量：6

18

作者 杨振兴 李占鸿 +4 位作者 宋子昂 李卓然 朱建波 廖德芳 杨恒 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期85-92,共8页

以决定流行性出血病病毒(EHDV)血清型的第二基因节段(Seg-2)为检测靶基因,设计7对特异性引物,建立用于鉴定EHDV血清型的RT-PCR检测方法,并通过对扩增产物的测序,进一步了解病毒Seg-2的遗传特性。特异性试验结果显示,该检测方法可准确鉴... 以决定流行性出血病病毒(EHDV)血清型的第二基因节段(Seg-2)为检测靶基因,设计7对特异性引物,建立用于鉴定EHDV血清型的RT-PCR检测方法,并通过对扩增产物的测序,进一步了解病毒Seg-2的遗传特性。特异性试验结果显示,该检测方法可准确鉴定不同血清型的EHDV毒株,与蓝舌病病毒、中山病病毒、阿卡斑病毒均无交叉反应;灵敏度试验结果显示,对不同血清型EHDV核酸的检测下限均可达102拷贝;对我国不同时间与不同地域分离的EHDV毒株进行血清型RT-PCR鉴定,结果显示分离的31株EHDV分属EHDV-1、-5、-6、-7与-10型等5种血清型,与血清中和试验的鉴定结果完全吻合。以上结果表明,该方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,可快速准确地鉴定EHDV毒株的血清型。 展开更多

关键词 流行性出血病病毒(EHDV) 血清型 Seg-2 RT-PCR 检测方法 分子诊断

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4种动物虫媒病病毒多重RT-PCR检测方法的建立 被引量：5

19

作者 阮周曦 花群义 +6 位作者 杨俊兴 曾少灵 曹琛福 秦智锋 吕建强 林庆燕 周晓黎 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第2期25-31,共7页

分别设计和合成4对特异性引物,通过对反应条件的优化,初步建立了鉴别蓝舌病病毒(BTV)、鹿流行性出血病病毒(EHDV)、水疱性口炎病毒(VSV)和赤羽病病毒(AKV)的多重RT-PCR检测方法,并对其特异性和敏感性进行了检测。结果表明,所设计的4对... 分别设计和合成4对特异性引物,通过对反应条件的优化,初步建立了鉴别蓝舌病病毒(BTV)、鹿流行性出血病病毒(EHDV)、水疱性口炎病毒(VSV)和赤羽病病毒(AKV)的多重RT-PCR检测方法,并对其特异性和敏感性进行了检测。结果表明,所设计的4对引物可对同一样品中的VSV、BTV、EHDV和AKV进行特异性扩增,所扩增的目的片段的长度分别为301、351、537、250bp。建立的四重RT-PCR检测方法能够检测出10-7稀释的细胞培养病毒液,4种病毒之间没有发生交叉反应,说明该检测方法特异性强,敏感性较高。所建立的多重RT-PCR方法可用于上述4种动物虫媒病病毒的快速鉴别诊断,在动物检疫、临床诊断和流行病学调查方面具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒 鹿流行性出血病病毒 水疱性口炎病毒 赤羽病病毒 多重RT-PCR

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鹿流行性出血病病毒可视化RT-LAMP现场检测方法的建立 被引量：5

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作者 李富祥 赵文华 杨仕标 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1481-1485,共5页

为建立鹿流行性出血病病毒(EHDV)可视化RT-LAMP检测方法。本研究根据EHDV内衣壳蛋白(VP7)基因保守序列设计2对特异性引物,通过反应条件优化,建立了EHDV可视化RT-LAMP检测方法。本研究建立的RT-LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h;利用该... 为建立鹿流行性出血病病毒(EHDV)可视化RT-LAMP检测方法。本研究根据EHDV内衣壳蛋白(VP7)基因保守序列设计2对特异性引物,通过反应条件优化,建立了EHDV可视化RT-LAMP检测方法。本研究建立的RT-LAMP方法的最佳反应条件为62℃1 h;利用该方法检测口蹄疫病毒、牛病毒性腹泻病毒、蓝舌病病毒、非洲马瘟病毒和4个血清型EHDV的RNA样品,结果显示该方法能检测4个血清型EHDV RNA,与其他病毒RNA无交叉反应,特异性较强;该方法最低可检测到4.7×10^-8ng/μL的RNA,敏感性是普通RT-PCR方法的1000倍。应用建立的RT-LAMP和普通RT-PCR方法分别对85份牛血液样品进行检测,结果显示,二者阳性和阴性符合率分别为100%和98.8%。本研究建立的EHDV可视化RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、快速和高通量检测的优点,为牛EHDV感染提供了快速可视化现场检测方法。 展开更多

关键词 鹿流行性出血病病毒 反转录环介等温扩增 可视化现场检测

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