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Aspergillus ficuum产果聚糖酶体系的分析
被引量:
1
1
作者
王静
金征宇
《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》
CSCD
北大核心
2002年第4期424-427,共4页
采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Aspergillusficuum产果聚糖酶体系进行了分离 ,获得8条谱带 ;进一步运用薄层色谱 (TLC)和高效液相色谱 (HPLC)法进行分析 ,发现 8条谱带中有 3条属于外切菊粉酶 ,2条属于内切菊粉酶 ,证明了Aspergillusfi...
采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Aspergillusficuum产果聚糖酶体系进行了分离 ,获得8条谱带 ;进一步运用薄层色谱 (TLC)和高效液相色谱 (HPLC)法进行分析 ,发现 8条谱带中有 3条属于外切菊粉酶 ,2条属于内切菊粉酶 ,证明了Aspergillusficuum能同时产内切菊粉酶和外切菊粉酶 .
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关键词
果
聚
糖酶
外切菊粉酶
内切菊粉酶
活性
聚
丙烯酰胺
凝胶电泳
法
分离
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职称材料
热诱导潜在食物中毒威胁源重组M型金黄色葡萄球菌肠毒素去折叠及聚合过程
被引量:
1
2
作者
刘骥
田万帆
+3 位作者
唐俊妮
陈娟
赵燕英
于基成
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第21期32-45,共14页
热失活工艺是降低加工食品中潜在的细菌和毒素含量的有效手段。M型金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxins M,SEM)归属于V型超抗原,具有较弱的催吐活性,是一种潜在的金黄色葡萄球菌所致食物中毒威胁源。本研究利用圆二色光...
热失活工艺是降低加工食品中潜在的细菌和毒素含量的有效手段。M型金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxins M,SEM)归属于V型超抗原,具有较弱的催吐活性,是一种潜在的金黄色葡萄球菌所致食物中毒威胁源。本研究利用圆二色光谱、荧光光谱、变性/活性聚丙烯酰胺凝胶电泳监测重组M型金黄色葡萄球菌肠毒素(recombinant staphylococcal enterotoxin M,rSEM)热诱导变性过程。结果表明,在低于40℃时,rSEM具有富含α-螺旋(17%)、β-折叠(32%)、转角(21%)的天然折叠态结构,分子表面唯一的121号色氨酸残基位于β-掌型结构域中相对疏水的环境中。随着温度从42℃升高到55℃,rSEM二级结构中减少的α-螺旋含量被增加的β-折叠/转角含量所弥补,蛋白质分子之间聚集状态未发生明显改变,最大荧光发射波长明显蓝移,同时350 nm和340 nm波长处的荧光强度比表现出反S型曲线,说明42~55℃温和加热可导致另一种形式的rSEM折叠中间态(intermediate state,IS)形成。在55~90℃温度范围内,rSEM二级结构基本维持稳定。与此同时,当加热温度从65℃升高至80℃时,350 nm与340 nm波长处的荧光发射强度比并未显示出蛋白处于完全变性状态,说明在加热过程中rSEM二级结构基本维持稳定,而三级结构具有较大动态变化的可能性,这可能与β-掌型结构域可以通过诱导契合结合具有不同构象的主要组织性相容复合体等位基因产物有关系。此外,在70℃乃至更高的温度,rSEM的聚集程度明显增加并且在90℃时达到最大。综上,rSEM中间态形成、聚合体产生以及稳定的β-折叠/转角结构是该蛋白在高温下依然保持热稳定性的基础。通过对rSEM热诱导去折叠过程的研究有助于阐明rSEM耐热机理,未来利用该方法对其他各类金葡菌肠毒素热失活机制进行类似研究将利于食品安全性生产工艺过程的改善。
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关键词
M型金黄色葡萄球菌肠毒素
圆二色光谱
荧光光谱
变性/
活性
聚
丙烯酰胺
凝胶电泳
热失活
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职称材料
题名
Aspergillus ficuum产果聚糖酶体系的分析
被引量:
1
1
作者
王静
金征宇
机构
江南大学食品学院
出处
《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》
CSCD
北大核心
2002年第4期424-427,共4页
文摘
采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对Aspergillusficuum产果聚糖酶体系进行了分离 ,获得8条谱带 ;进一步运用薄层色谱 (TLC)和高效液相色谱 (HPLC)法进行分析 ,发现 8条谱带中有 3条属于外切菊粉酶 ,2条属于内切菊粉酶 ,证明了Aspergillusficuum能同时产内切菊粉酶和外切菊粉酶 .
关键词
果
聚
糖酶
外切菊粉酶
内切菊粉酶
活性
聚
丙烯酰胺
凝胶电泳
法
分离
Keywords
fructanohydrolase
exoinulinase
endoinulinase
native PAGE
分类号
O658.9 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
热诱导潜在食物中毒威胁源重组M型金黄色葡萄球菌肠毒素去折叠及聚合过程
被引量:
1
2
作者
刘骥
田万帆
唐俊妮
陈娟
赵燕英
于基成
机构
西南民族大学食品科学与技术学院
西南民族大学畜牧兽医学院
大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021年第21期32-45,共14页
基金
“十三五”国家重点研发计划重点专项(2018YFD0500500)
四川省科技计划项目(2019YJ0261,2019JDJQ0017)
+1 种基金
生物技术与资源利用教育部重点实验室开放课题(KF2020008)
中央高校基本科研业务费专项资金项目(2016NZYQN37)。
文摘
热失活工艺是降低加工食品中潜在的细菌和毒素含量的有效手段。M型金黄色葡萄球菌肠毒素(staphylococcal enterotoxins M,SEM)归属于V型超抗原,具有较弱的催吐活性,是一种潜在的金黄色葡萄球菌所致食物中毒威胁源。本研究利用圆二色光谱、荧光光谱、变性/活性聚丙烯酰胺凝胶电泳监测重组M型金黄色葡萄球菌肠毒素(recombinant staphylococcal enterotoxin M,rSEM)热诱导变性过程。结果表明,在低于40℃时,rSEM具有富含α-螺旋(17%)、β-折叠(32%)、转角(21%)的天然折叠态结构,分子表面唯一的121号色氨酸残基位于β-掌型结构域中相对疏水的环境中。随着温度从42℃升高到55℃,rSEM二级结构中减少的α-螺旋含量被增加的β-折叠/转角含量所弥补,蛋白质分子之间聚集状态未发生明显改变,最大荧光发射波长明显蓝移,同时350 nm和340 nm波长处的荧光强度比表现出反S型曲线,说明42~55℃温和加热可导致另一种形式的rSEM折叠中间态(intermediate state,IS)形成。在55~90℃温度范围内,rSEM二级结构基本维持稳定。与此同时,当加热温度从65℃升高至80℃时,350 nm与340 nm波长处的荧光发射强度比并未显示出蛋白处于完全变性状态,说明在加热过程中rSEM二级结构基本维持稳定,而三级结构具有较大动态变化的可能性,这可能与β-掌型结构域可以通过诱导契合结合具有不同构象的主要组织性相容复合体等位基因产物有关系。此外,在70℃乃至更高的温度,rSEM的聚集程度明显增加并且在90℃时达到最大。综上,rSEM中间态形成、聚合体产生以及稳定的β-折叠/转角结构是该蛋白在高温下依然保持热稳定性的基础。通过对rSEM热诱导去折叠过程的研究有助于阐明rSEM耐热机理,未来利用该方法对其他各类金葡菌肠毒素热失活机制进行类似研究将利于食品安全性生产工艺过程的改善。
关键词
M型金黄色葡萄球菌肠毒素
圆二色光谱
荧光光谱
变性/
活性
聚
丙烯酰胺
凝胶电泳
热失活
Keywords
staphylococcal enterotoxin M
circular dichroism
fluorescence
sodium dodecyl sulfate/native polyacrylamide gel electrophoresis
heat inactivation
分类号
TS201.6 [轻工技术与工程—食品科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Aspergillus ficuum产果聚糖酶体系的分析
王静
金征宇
《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》
CSCD
北大核心
2002
1
下载PDF
职称材料
2
热诱导潜在食物中毒威胁源重组M型金黄色葡萄球菌肠毒素去折叠及聚合过程
刘骥
田万帆
唐俊妮
陈娟
赵燕英
于基成
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
下载PDF
职称材料
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