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白细胞介素-6对活化星形胶质细胞线粒体生物发生的影响及机制 被引量：1
1
作者 陈笑兰 王阳 +4 位作者 张天楠 王平军 黄锦达 陈欣欣 曾其毅 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期213-217,共5页
目的研究白细胞介素(IL)-6对活化星形胶质细胞(AS)线粒体生物发生的影响,并初步探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)在其中的可能作用。方法分离新生大鼠大脑皮质AS并纯化培养,将AS简单随机分为正常对照组(对照组)、脂多糖(LPS)+干扰素-γ(IFN... 目的研究白细胞介素(IL)-6对活化星形胶质细胞(AS)线粒体生物发生的影响,并初步探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)在其中的可能作用。方法分离新生大鼠大脑皮质AS并纯化培养,将AS简单随机分为正常对照组(对照组)、脂多糖(LPS)+干扰素-γ(IFN-γ)组(LPS+IFN-γ组)、LPS+IFN-γ+IL-6组(IL-6组)、LPS+IFN-γ+IL-6受体小干扰RNA(siRNA)+IL-6组(siRNA组)、LPS+IFN-γ+阴性对照(NC)+IL-6组(NC组)5组,处理时间均为6 h。处理结束后,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤坏死因子α(TNF-α) mRNA及IL-1β mRNA表达;荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS);荧光素酶法检测三磷酸腺苷(ATP)水平;CCK-8法检测细胞存活率;蛋白印迹法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子α(PGC-1α)、核呼吸因子(NRF-1)、线粒体转录因子A(TFAM)、磷酸化AMPK(p-AMPK)蛋白表达水平。结果1.与对照组相比,LPS+IFN-γ组TNF-α mRNA、IL-1β mRNA相对表达量(2.548±0.154比1.000±0.001,P=0.000、2.912±0.102比1.000±0.001,P=0.000)、ROS[(245.307±13.379)相对荧光单位(RFU)比(69.460±7.257) RFU,P=0.000]及ATP水平[(1.558±0.008) nmol/mg蛋白比(1.016±0.025) nmol/mg蛋白,P=0.000]均显著升高,细胞存活率(0.840±0.013比1.000±0.001,P=0.000)下降,NRF-1(0.406±0.045比0.157±0.016,P=0.017)、TFAM(0.605±0.025比0.416±0.013,P=0.005)表达升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2.与LPS+IFN-γ组相比,IL-6组ATP水平[(1.763±0.028) nmol/mg蛋白比(1.558±0.008) nmol/mg蛋白,P=0.000]、细胞存活率(0.910±0.024比0.840±0.013,P=0.008)及PGC-1α(0.724±0.027比0.586±0.039,P=0.000)、NRF-1(1.036±0.211比0.406±0.045,P=0.000)、TFAM(0.786±0.058比0.605±0.025,P=0.002)、p-AMPK(1.094±0.223比0.755±0.084,P=0.014)表达均显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。3.与IL-6组相比,siRNA组ATP水平[(1.187±0.005) nmol/mg蛋白比(1.763±0.028) nmol/mg蛋白,P=0.000]及细胞存活率(0.680±0.040比0.910±0.024,P=0.000)均下降,PGC-1α(0.631±0.022� 展开更多
关键词 活化星形胶质细胞 白细胞介素-6 线粒体生物发生 腺苷酸活化蛋白激酶
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