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题名免疫磁珠分离技术纯化和检测泰泽氏病原体的研究
被引量：4
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作者
何静云
刘星
张丽芳
李红
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机构
中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所
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出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2006年第2期126-131,共6页
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文摘
目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法。方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Western blot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty。结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0·5μg/107beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1h,敏感性达到103菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的Ty RJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×103、116×103、55×103;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty。结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法。
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关键词
免疫磁珠
泰泽氏病原体
血清学试验
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Keywords
Immunomagnetic beads
Clostridium piliformis
Serodiagnostic reagent
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分类号
R378
[医药卫生—病原生物学]
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题名实验动物泰泽氏病原体检测
被引量：1
- 2
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作者
傅林锋
吴江蓉
陈国怀
魏天文
宁磊
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机构
卫生部兰州生物制品研究所
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出处
《微生物学免疫学进展》
1997年第2期46-50,共5页
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文摘
采用肝压印片、姬姆萨染色，对昆明小鼠、ＮＩＨ小鼠、ＬＩＢＰ／１小鼠、Ｗｉｓｔａｒ大鼠、豚鼠、金黄色地鼠、兔进行泰泽氏病原体调查，结果表明除兔以外各种动物，均发现有泰泽氏病原体感染，并以两种形式存在于肝组织中。第一种为典型毛发样杆菌，成束状排列；第二种为杆状或梭状，菌体长短粗细不一，分散于组织间。在肝压印片中也可见到菌体芽胞和游离芽胞。
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关键词
泰泽氏病原体
实验动物
泰泽氏病
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Keywords
Tyzzers organism(Bacillus piliforms) liver pressed slide sproe
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分类号
S858.951.2
[农业科学—临床兽医学]
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题名泰泽氏病原体抗原表位相关肽的初步筛选与鉴定
被引量：1
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作者
孙庆莉
王多春
阚飙
李红
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机构
中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
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出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2005年第4期231-234,共4页
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文摘
目的获得泰泽氏病原体抗原表位相关肽,用于实验动物血清中该病原体感染相关抗体的检测。方法选用泰泽氏病原体的四种单克隆抗体(M2、M3、M4、M5)作为配基,从噬菌体表面展示的随机7肽文库中筛选单抗识别的抗原表位,获得特异性噬菌体克隆;并采用ELISA、Western blot方法对其进行分析鉴定,获得阳性噬菌体克隆。结果获得阳性噬菌体克隆5个,其展示的融合蛋白能被泰泽氏病原体的免疫血清识别,ELISA检测A值的P/N为8.0～17.1;Western blot分析显示单一特异性条带,相对分子质量约为38×103。结论本研究获得的5个阳性克隆所表达的融合蛋白,为泰泽氏病原体抗原表位相关肽,可作为该病原体隐性感染血清学检测的候选抗原。
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关键词
肽库
泰泽氏病原体
抗原
表位
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Keywords
Phage random peptide library （RPL）
Tyzzer＇ s Organism
Antigen
Epitope
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分类号
R378
[医药卫生—病原生物学]
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