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共表达PRRSVGP5蛋白和CSFV E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答
被引量：
4
1
作者
孙建富
赵和平
+7 位作者
李娜
孙元
夏照和
周艳君
王煜
祁巧芬
鲁承
仇华吉
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1714-1722,共9页
为了获得新型双价"自杀性"DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因的甲病毒复制子载...
为了获得新型双价"自杀性"DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因的甲病毒复制子载体疫苗pSFV1CS-E2中。为了增强免疫效果,在密码子优化的GP5基因中插入了泛DR表位(PADRE),在CSFV E2基因后融合伪狂犬病病毒(PrV)UL49基因,获得了6种重组质粒。间接免疫荧光试验显示,PRRSV GP5和CSFV E2基因在瞬时转染的293T细胞中得到同时表达。将6种重组质粒和空载体pSFV1CS分别免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测血清抗体水平,通过基于CSFE/WST-8的淋巴细胞增殖试验和细胞因子ELISA评价疫苗诱导的细胞免疫。结果显示,除pSFV1CS组外,从各疫苗组小鼠血清中均可检测到低水平的针对GP5和E2蛋白的抗体;各疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后均能诱导特异性的淋巴细胞增殖;部分疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4;引入UL49的疫苗组细胞免疫应答显著高于其它疫苗组。结果表明,这些共表达GP5和E2蛋白的自杀性DNA疫苗可以诱导体液免疫和细胞免疫,PrV UL49可以增强其细胞免疫应答。
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关键词
“自杀性”DNA疫苗
猪繁殖与呼吸综合征病毒
猪瘟病毒
泛
dr
表位
VP22转导蛋白
共表达
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题名
共表达PRRSVGP5蛋白和CSFV E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答
被引量：
4
1
作者
孙建富
赵和平
李娜
孙元
夏照和
周艳君
王煜
祁巧芬
鲁承
仇华吉
机构
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室
延边大学农学院动物医学系
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第10期1714-1722,共9页
基金
国家高技术研究发展计划(“863”计划)项目(No.2006AA10A204)资助~~
文摘
为了获得新型双价"自杀性"DNA疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP5基因克隆于此前构建的表达猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2基因的甲病毒复制子载体疫苗pSFV1CS-E2中。为了增强免疫效果,在密码子优化的GP5基因中插入了泛DR表位(PADRE),在CSFV E2基因后融合伪狂犬病病毒(PrV)UL49基因,获得了6种重组质粒。间接免疫荧光试验显示,PRRSV GP5和CSFV E2基因在瞬时转染的293T细胞中得到同时表达。将6种重组质粒和空载体pSFV1CS分别免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测血清抗体水平,通过基于CSFE/WST-8的淋巴细胞增殖试验和细胞因子ELISA评价疫苗诱导的细胞免疫。结果显示,除pSFV1CS组外,从各疫苗组小鼠血清中均可检测到低水平的针对GP5和E2蛋白的抗体;各疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后均能诱导特异性的淋巴细胞增殖;部分疫苗组小鼠脾细胞经CSFV和PRRSV刺激后可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4;引入UL49的疫苗组细胞免疫应答显著高于其它疫苗组。结果表明,这些共表达GP5和E2蛋白的自杀性DNA疫苗可以诱导体液免疫和细胞免疫,PrV UL49可以增强其细胞免疫应答。
关键词
“自杀性”DNA疫苗
猪繁殖与呼吸综合征病毒
猪瘟病毒
泛
dr
表位
VP22转导蛋白
共表达
Keywords
suicidal DNA vaccine, porcine reproductive and respiratory syn
dr
ome virus （PRRSV）, classical swine fever virus （CSFV）, pan-
dr
epitope, VP22 transduction protein, co-expression
分类号
S852.5 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
共表达PRRSVGP5蛋白和CSFV E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答
孙建富
赵和平
李娜
孙元
夏照和
周艳君
王煜
祁巧芬
鲁承
仇华吉
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
4
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