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泛素连接酶LRSAM1对人神经胶质母细胞瘤细胞生物学行为的影响及其可能机制
被引量:
1
1
作者
梁博
王新军
+3 位作者
王建业
周少龙
杨卓
刘荣俊
《中华实用诊断与治疗杂志》
2021年第5期456-460,共5页
目的探讨泛素连接酶LRSAM1在CD166降解中的作用及其对人神经胶质母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法人神经胶质母细胞瘤U-87 MG细胞,采用免疫共沉淀法检测LRSAM1与CD166是否存在结合;将对数生长期U-87 MG细胞分为pcDNA3.1-LRSAM...
目的探讨泛素连接酶LRSAM1在CD166降解中的作用及其对人神经胶质母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法人神经胶质母细胞瘤U-87 MG细胞,采用免疫共沉淀法检测LRSAM1与CD166是否存在结合;将对数生长期U-87 MG细胞分为pcDNA3.1-LRSAM1组、pcDNA3.1-NC组和空白对照组,pcDNA3.1-LRSAM1组和pcDNA3.1-NC组细胞分别转染pcDNA3.1-LRSAM1质粒载体和pcDNA3.1空质粒载体,空白对照组细胞正常培养,采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞LRSAM1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测LRSAM1蛋白相对表达量,采用免疫荧光染色法检测LRSAM1与CD166表达情况,采用细胞克隆形成实验检测细胞集落形成数目,采用Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率,采用细胞划痕试验检测细胞划痕愈合率,采用Transwell小室实验检测侵袭细胞数。结果 U-87 MG细胞中LRSAM1与CD166存在结合。pcDNA3.1-LRSAM1组细胞LRSAM1 mRNA和蛋白相对表达量(3.26±0.28、0.72±0.06)均高于空白对照组(1.00±0.03、0.18±0.01)和pcDNA3.1-NC组(0.99±0.02、0.19±0.02)(P<0.05),转染成功。U-87 MG细胞LRSAM1与CD166共定位,pcDNA3.1-LRSAM1组LRSAM1荧光染色强度增加,CD166荧光染色强度减弱;转染后pcDNA3.1-LRSAM1组细胞集落形成数目[(69.21±7.54)个]、侵袭细胞数[(33.71±4.17)个]均少于空白对照组[(142.38±14.61)、(68.87±9.42)个]和pcDNA3.1-NC组[(152.40±15.92)、(75.54±9.06)个](P<0.05),细胞凋亡率[(17.41±2.03)%]高于空白对照组[(8.07±0.79)%]和pcDNA3.1-NC组[(8.45±0.88)%](P<0.05),细胞划痕愈合率[(30.16±4.10)%]低于空白对照组[(58.22±5.82)%]和pcDNA3.1-NC组[(62.09±7.13)%](P<0.05);空白对照组与pcDNA3.1-NC组各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达LRSAM1可抑制人神经胶质母细胞瘤U-87 MG细胞增殖、侵袭与迁移,促进细胞凋亡,其机制可能与LRSAM1结合CD166有关。
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关键词
神经胶质母细胞瘤
U-87
MG细胞
泛素
连接酶
lrsam
1
CD
1
66
凋亡
侵袭
迁移
原文传递
题名
泛素连接酶LRSAM1对人神经胶质母细胞瘤细胞生物学行为的影响及其可能机制
被引量:
1
1
作者
梁博
王新军
王建业
周少龙
杨卓
刘荣俊
机构
郑州大学第五附属医院神经外科
出处
《中华实用诊断与治疗杂志》
2021年第5期456-460,共5页
基金
国家自然科学基金(81972361)。
文摘
目的探讨泛素连接酶LRSAM1在CD166降解中的作用及其对人神经胶质母细胞瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法人神经胶质母细胞瘤U-87 MG细胞,采用免疫共沉淀法检测LRSAM1与CD166是否存在结合;将对数生长期U-87 MG细胞分为pcDNA3.1-LRSAM1组、pcDNA3.1-NC组和空白对照组,pcDNA3.1-LRSAM1组和pcDNA3.1-NC组细胞分别转染pcDNA3.1-LRSAM1质粒载体和pcDNA3.1空质粒载体,空白对照组细胞正常培养,采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞LRSAM1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测LRSAM1蛋白相对表达量,采用免疫荧光染色法检测LRSAM1与CD166表达情况,采用细胞克隆形成实验检测细胞集落形成数目,采用Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡率,采用细胞划痕试验检测细胞划痕愈合率,采用Transwell小室实验检测侵袭细胞数。结果 U-87 MG细胞中LRSAM1与CD166存在结合。pcDNA3.1-LRSAM1组细胞LRSAM1 mRNA和蛋白相对表达量(3.26±0.28、0.72±0.06)均高于空白对照组(1.00±0.03、0.18±0.01)和pcDNA3.1-NC组(0.99±0.02、0.19±0.02)(P<0.05),转染成功。U-87 MG细胞LRSAM1与CD166共定位,pcDNA3.1-LRSAM1组LRSAM1荧光染色强度增加,CD166荧光染色强度减弱;转染后pcDNA3.1-LRSAM1组细胞集落形成数目[(69.21±7.54)个]、侵袭细胞数[(33.71±4.17)个]均少于空白对照组[(142.38±14.61)、(68.87±9.42)个]和pcDNA3.1-NC组[(152.40±15.92)、(75.54±9.06)个](P<0.05),细胞凋亡率[(17.41±2.03)%]高于空白对照组[(8.07±0.79)%]和pcDNA3.1-NC组[(8.45±0.88)%](P<0.05),细胞划痕愈合率[(30.16±4.10)%]低于空白对照组[(58.22±5.82)%]和pcDNA3.1-NC组[(62.09±7.13)%](P<0.05);空白对照组与pcDNA3.1-NC组各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达LRSAM1可抑制人神经胶质母细胞瘤U-87 MG细胞增殖、侵袭与迁移,促进细胞凋亡,其机制可能与LRSAM1结合CD166有关。
关键词
神经胶质母细胞瘤
U-87
MG细胞
泛素
连接酶
lrsam
1
CD
1
66
凋亡
侵袭
迁移
Keywords
glioblastoma
U-87 MG cells
ubiquitin ligase
lrsam
1
CD
1
66
apoptosis
invasion
migration
分类号
R739.4 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
泛素连接酶LRSAM1对人神经胶质母细胞瘤细胞生物学行为的影响及其可能机制
梁博
王新军
王建业
周少龙
杨卓
刘荣俊
《中华实用诊断与治疗杂志》
2021
1
原文传递
已选择
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