期刊导航
期刊开放获取
cqvip
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9基因的扩增及表达
被引量：
4
1
作者
于永生
王晓阳
+2 位作者
朴庆林
罗晓彤
金海国
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第6期64-67,共4页
本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin typeⅡintermediate filament 9,KIFⅡ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP...
本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin typeⅡintermediate filament 9,KIFⅡ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP6-1基因启动子,然后与RT-PCR扩增得到的KIFⅡ-9 cDNA序列连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,将重组表达载体以脂质体介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得转基因细胞克隆,结果显示,外源KAP6-1启动子序列和KIFⅡ-9 cDNA整合到细胞基因组中,为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊提供了条件。
展开更多
关键词
辽宁绒山羊
毛
角蛋白
ⅱ
型
中间丝
基因
毛
囊特异性表达载体
转
基因
体细胞
下载PDF
职称材料
转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究
被引量：
1
2
作者
潘晓燕
于永生
+5 位作者
刘晓辉
王正朝
王晓阳
朴庆林
张立春
金海国
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期2067-2075,共9页
【目的】利用体细胞核移植技术制备转毛角蛋白Ⅱ型中间丝K2.9基因的高绒质绒山羊胚胎,为绒山羊优良品种的培育提供一种全新的技术材料。【方法】以含有Neor基因标记的K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛...
【目的】利用体细胞核移植技术制备转毛角蛋白Ⅱ型中间丝K2.9基因的高绒质绒山羊胚胎,为绒山羊优良品种的培育提供一种全新的技术材料。【方法】以含有Neor基因标记的K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得转K2.9基因细胞,将获得的转基因阳性细胞与体外成熟的绒山羊卵母细胞进行核移植,并对生产的重构胚进行了体外培养。本文分别进行了激活方法、供体细胞和卵母细胞来源的筛选,且对获得的囊胚进行了PCR鉴定。【结果】(1)Iono+6-D对成年羊卵母细胞的孤雌激活效果好于A23187+6-D,显著提高了胚胎的卵裂率。(2)羔羊孤雌胚的卵裂率显著低于成年羊,但囊胚率差异不显著。(3)来自2只绒山羊胎儿的转基因成纤维细胞对核移植胚的发育没有显著影响,但2号羊的转基因细胞显著提高了融合率。(4)以羔羊卵进行核移植,显著降低了核移植胚的发育率。(5)对获得的囊胚进行PCR鉴定,成功扩增到目的基因。【结论】将K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染的绒山羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞,核移植到成年羊卵母细胞中,以Iono+6-D进行激活,首次成功、高效地获得携带K2.9基因的绒山羊囊胚。
展开更多
关键词
绒山羊
毛
角蛋白
ⅱ
型
中间丝
基因
胎儿成纤维细胞
转
基因
体细胞核移植
下载PDF
职称材料
题名
绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9基因的扩增及表达
被引量：
4
1
作者
于永生
王晓阳
朴庆林
罗晓彤
金海国
机构
吉林省农业科学院畜牧科学分院
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011年第6期64-67,共4页
基金
转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08008-002)
文摘
本试验旨在构建绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9(keratin typeⅡintermediate filament 9,KIFⅡ-9)基因cDNA的毛囊特异性表达载体,转染辽宁绒山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定表达外源基因并可用于核移植的转基因细胞克隆。通过PCR扩增得到的KAP6-1基因启动子,然后与RT-PCR扩增得到的KIFⅡ-9 cDNA序列连接构成皮肤特异性表达载体pcDNA3.1-KK,将重组表达载体以脂质体介导转染胎儿成纤维细胞,通过G418筛选获得转基因细胞克隆,结果显示,外源KAP6-1启动子序列和KIFⅡ-9 cDNA整合到细胞基因组中,为下一步通过核移植方法获得转基因绒山羊提供了条件。
关键词
辽宁绒山羊
毛
角蛋白
ⅱ
型
中间丝
基因
毛
囊特异性表达载体
转
基因
体细胞
Keywords
Liaoning Cashmere goat
keratin type
ⅱ
intermediate filament gene
follicle-specific expression vector
transgenic somatic cell
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究
被引量：
1
2
作者
潘晓燕
于永生
刘晓辉
王正朝
王晓阳
朴庆林
张立春
金海国
机构
吉林省农业科学院畜牧科学分院
吉林医药学院组织学与胚胎学教研室
弗吉尼亚联邦大学医学院
出处
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期2067-2075,共9页
基金
国家转基因重大专项(2008ZX08008-002)
文摘
【目的】利用体细胞核移植技术制备转毛角蛋白Ⅱ型中间丝K2.9基因的高绒质绒山羊胚胎,为绒山羊优良品种的培育提供一种全新的技术材料。【方法】以含有Neor基因标记的K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染绒山羊胎儿成纤维细胞,经G418筛选获得转K2.9基因细胞,将获得的转基因阳性细胞与体外成熟的绒山羊卵母细胞进行核移植,并对生产的重构胚进行了体外培养。本文分别进行了激活方法、供体细胞和卵母细胞来源的筛选,且对获得的囊胚进行了PCR鉴定。【结果】(1)Iono+6-D对成年羊卵母细胞的孤雌激活效果好于A23187+6-D,显著提高了胚胎的卵裂率。(2)羔羊孤雌胚的卵裂率显著低于成年羊,但囊胚率差异不显著。(3)来自2只绒山羊胎儿的转基因成纤维细胞对核移植胚的发育没有显著影响,但2号羊的转基因细胞显著提高了融合率。(4)以羔羊卵进行核移植,显著降低了核移植胚的发育率。(5)对获得的囊胚进行PCR鉴定,成功扩增到目的基因。【结论】将K2.9毛囊特异表达载体pcDNA3.1-K转染的绒山羊胎儿成纤维细胞作为供体细胞,核移植到成年羊卵母细胞中,以Iono+6-D进行激活,首次成功、高效地获得携带K2.9基因的绒山羊囊胚。
关键词
绒山羊
毛
角蛋白
ⅱ
型
中间丝
基因
胎儿成纤维细胞
转
基因
体细胞核移植
Keywords
Cashmere goat
hair keratin intermediate filament type II
fetal fibroblast cells
transgene
somatic cell nuclear transfer
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绵羊毛角蛋白Ⅱ型中间丝9基因的扩增及表达
于永生
王晓阳
朴庆林
罗晓彤
金海国
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2011
4
下载PDF
职称材料
2
转K2.9基因绒山羊体细胞核移植技术体系的优化研究
潘晓燕
于永生
刘晓辉
王正朝
王晓阳
朴庆林
张立春
金海国
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
