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Ri质粒人参转化系统的建立及鉴定 被引量：53
1
作者 刘峻 丁家宜 +1 位作者 徐红 王建波 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期95-99,共5页
目的 :建立人参毛状根转化体系。方法 :利用含有Ri质粒的发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes感染人参Panaxginseng进行毛状根诱导 ,利用PCR技术及TLC分析方法对毛状根进行鉴定。 结果 :首次从人参带叶幼茎处诱导出毛状根 ,用激素和AS(... 目的 :建立人参毛状根转化体系。方法 :利用含有Ri质粒的发根农杆菌Agrobacteriumrhizogenes感染人参Panaxginseng进行毛状根诱导 ,利用PCR技术及TLC分析方法对毛状根进行鉴定。 结果 :首次从人参带叶幼茎处诱导出毛状根 ,用激素和AS(乙酰丁香酮 )处理可提高转化率并缩短转化时间。毛状根在无激素B5培养基上生长并失去向地性 ,月增长倍数可达 5 0倍 (鲜重 )。PCR分析证实农杆菌Ri质粒含有rolC序列 (5 6 4bp)的T DNA已整合到人参转化株的染色体组中 ,TLC分析证明T DNA特异的表达产物冠瘿碱在转化细胞中合成。人参毛状根中人参总皂苷含量为 2 .486 % (干重 ) ,而人参原药材总皂苷含量为 1.40 3% (干重 )。结论 :人参毛状根生长迅速 ,皂苷含量高于原药材 ,该体系的建立为利用生物技术工业化生产人参活性成分奠定了基础。 展开更多
关键词 RI质粒 人参 毛状根转化系统 鉴定 聚合酶链反应
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