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介导乙酰胆碱诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性
被引量:
6
1
作者
王莉莉
张锦超
+3 位作者
丁建花
俞炜源
汪海
肖文彬
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期110-119,共10页
目的 针对血管内皮细胞上是否存在M受体的疑点 ,从基因水平和信号转导机理上探讨介导乙酰胆碱 (ACh)诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性。方法 以新鲜分离和传代培养的牛主动脉内皮细胞为实验材料 ,比较两种内皮细胞M1~M5受体mRN...
目的 针对血管内皮细胞上是否存在M受体的疑点 ,从基因水平和信号转导机理上探讨介导乙酰胆碱 (ACh)诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性。方法 以新鲜分离和传代培养的牛主动脉内皮细胞为实验材料 ,比较两种内皮细胞M1~M5受体mRNA的分布状况、ACh诱发细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)、环腺苷酸 (cAMP)含量变化。①设计高选择性、特异性寡核苷酸探针 ,采用点杂交方法对内皮细胞M1~M5受体mRNA进行分析 ,并通过反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、DNA序列测定及同源性分析确证点杂交的实验结果 ;②以Fluo 3和Fura 2为荧光探针 ,用共聚焦和荧光光度仪测定内皮细胞 [Ca2 + ]i 变化 ;③内皮细胞cAMP含量采用12 5I放射免疫分析方法测定。结果 在新鲜分离的牛主动脉内皮细胞存在M1~M4 受体mRNA ,内皮细胞经传代培养后仅检测到M4 受体mRNA ;1和 10μmol·L- 1ACh能够引起原代培养内皮细胞 [Ca2 + ]i增加 ,最大增加量为 12和 19nmol·L- 1;ACh激活原代培养内皮细胞的钙离子信号 ,表现为单次或连续2次的钙振荡 ,具有异时性和快速耐受的特点 ;此外 ,随ACh浓度增加 ,原代培养内皮细胞cAMP含量均呈微弱增加趋势 ;ACh不引起传代培养内皮细胞[Ca2 + ]i 浓度的改变 ,但能浓度依赖地降低cAMP含量。结论 新鲜分?
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关键词
内皮细胞
乙酰胆
碱
毒蕈碱
性
受体
细胞内钙
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职称材料
兔回肠毒蕈碱性受体的溶脱
2
作者
曹云鹏
李智
+2 位作者
张荣强
丛华
张克义
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第3期233-234,共2页
兔回肠毒蕈碱性受体的溶脱1曹云鹏2李智张荣强丛华张克义(中国医科大学基础医学院药理学教研室,沈阳110001)理想的受体研究方法是将受体从膜上溶脱下来并加以纯化制得纯品,分析其氨基酸序列,了解其三维结构.通过受体实验...
兔回肠毒蕈碱性受体的溶脱1曹云鹏2李智张荣强丛华张克义(中国医科大学基础医学院药理学教研室,沈阳110001)理想的受体研究方法是将受体从膜上溶脱下来并加以纯化制得纯品,分析其氨基酸序列,了解其三维结构.通过受体实验可分析药物对受体的作用及强度,进一...
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关键词
回肠
毒蕈碱
性
受体
受体
溶脱
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职称材料
题名
介导乙酰胆碱诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性
被引量:
6
1
作者
王莉莉
张锦超
丁建花
俞炜源
汪海
肖文彬
机构
军事医学科学院毒物药物研究所
军事医学科学院生物工程研究所
南京医科大学生理学与药理学系
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第2期110-119,共10页
文摘
目的 针对血管内皮细胞上是否存在M受体的疑点 ,从基因水平和信号转导机理上探讨介导乙酰胆碱 (ACh)诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性。方法 以新鲜分离和传代培养的牛主动脉内皮细胞为实验材料 ,比较两种内皮细胞M1~M5受体mRNA的分布状况、ACh诱发细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)、环腺苷酸 (cAMP)含量变化。①设计高选择性、特异性寡核苷酸探针 ,采用点杂交方法对内皮细胞M1~M5受体mRNA进行分析 ,并通过反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)、DNA序列测定及同源性分析确证点杂交的实验结果 ;②以Fluo 3和Fura 2为荧光探针 ,用共聚焦和荧光光度仪测定内皮细胞 [Ca2 + ]i 变化 ;③内皮细胞cAMP含量采用12 5I放射免疫分析方法测定。结果 在新鲜分离的牛主动脉内皮细胞存在M1~M4 受体mRNA ,内皮细胞经传代培养后仅检测到M4 受体mRNA ;1和 10μmol·L- 1ACh能够引起原代培养内皮细胞 [Ca2 + ]i增加 ,最大增加量为 12和 19nmol·L- 1;ACh激活原代培养内皮细胞的钙离子信号 ,表现为单次或连续2次的钙振荡 ,具有异时性和快速耐受的特点 ;此外 ,随ACh浓度增加 ,原代培养内皮细胞cAMP含量均呈微弱增加趋势 ;ACh不引起传代培养内皮细胞[Ca2 + ]i 浓度的改变 ,但能浓度依赖地降低cAMP含量。结论 新鲜分?
关键词
内皮细胞
乙酰胆
碱
毒蕈碱
性
受体
细胞内钙
Keywords
endothelium
acetylcholine
receptors, muscarinic
calcium, cytosolic
分类号
R966 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
兔回肠毒蕈碱性受体的溶脱
2
作者
曹云鹏
李智
张荣强
丛华
张克义
机构
中国医科大学基础医学院药理学教研室
出处
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998年第3期233-234,共2页
基金
国家自然科学基金
文摘
兔回肠毒蕈碱性受体的溶脱1曹云鹏2李智张荣强丛华张克义(中国医科大学基础医学院药理学教研室,沈阳110001)理想的受体研究方法是将受体从膜上溶脱下来并加以纯化制得纯品,分析其氨基酸序列,了解其三维结构.通过受体实验可分析药物对受体的作用及强度,进一...
关键词
回肠
毒蕈碱
性
受体
受体
溶脱
Keywords
receptors, muscarinic
solubilization
radioligand assay
digitonin
3[(3cholamidopropyl)dimethylammonio]1propanesulfonate
ileum
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
介导乙酰胆碱诱发内皮依赖性血管舒张反应受体的特性
王莉莉
张锦超
丁建花
俞炜源
汪海
肖文彬
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
6
下载PDF
职称材料
2
兔回肠毒蕈碱性受体的溶脱
曹云鹏
李智
张荣强
丛华
张克义
《中国药理学与毒理学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1998
0
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职称材料
已选择
0
条
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引证文献
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