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毒热平注射液抗甲型流感病毒的作用研究 被引量：9
1
作者 张艳丽 顾立刚 +1 位作者 范新生 李澎涛 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期684-687,共4页
目的观察毒热平注射液体内、外抗病毒作用。方法采用结晶紫染色法观察毒热平注射液不同加药方式对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的体外抑制作用及其时效关系;观察毒热平注射液对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用。结果毒热平注射液能明显... 目的观察毒热平注射液体内、外抗病毒作用。方法采用结晶紫染色法观察毒热平注射液不同加药方式对流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的体外抑制作用及其时效关系;观察毒热平注射液对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用。结果毒热平注射液能明显阻止病毒吸附于细胞,并抑制细胞内病毒的复制增殖,在浓度≥0.18 g/L时有直接杀病毒作用。抗病毒效率在48 h达高峰,且随时间延长在浓度≥0.27 g/L时基本不变,而在低浓度时有下降趋势。毒热平注射液对小鼠流感病毒性肺炎有抑制作用。结论毒热平注射液具有明显的体外和体内抗流感病毒作用。 展开更多
关键词 毒热平注射液 流感病毒 抗病毒 体内 体外
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毒热平注射液对甲型流感病毒H3N2体外感染细胞中TLR7信号通路的影响 被引量：5
2
作者 牛旭艳 张春晶 顾立刚 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期194-197,共4页
目的:观察甲型流感病毒H3N2感染人胚肾上皮细胞(HEK-293T)细胞及人肺腺癌上皮细胞(A549)细胞后,对NF-κB转录活性以及TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA的影响,探讨H3N2对体外感染细胞中TLR7信号通路的影响及清热解毒中药毒热平注射液的... 目的:观察甲型流感病毒H3N2感染人胚肾上皮细胞(HEK-293T)细胞及人肺腺癌上皮细胞(A549)细胞后,对NF-κB转录活性以及TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA的影响,探讨H3N2对体外感染细胞中TLR7信号通路的影响及清热解毒中药毒热平注射液的干预作用。方法:采用MTT法体外检测各组药物对293T、A549细胞增殖的影响;H3N2感染293T细胞后,利用双荧光素酶报告系统,以利巴韦林、清开灵注射液为药物对照,检测毒热平注射液各浓度组细胞中NF-κB相对荧光素酶活性;H3N2感染A549细胞后,RT-PCR方法检测各组细胞中TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA水平。结果:MTT结果显示,毒热平、利巴韦林、清开灵注射液各浓度不影响细胞正常增殖(P>0.05)。报告基因结果显示,与细胞对照组相比,H3N2感染组细胞NF-κB转录活性显著增高(P<0.01);与H3N2感染组相比,利巴韦林0.5μg/mL,清开灵1/128稀释组,毒热平1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL组均可不同程度下调NF-κB的转录活性(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H3N2病毒组的TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA表达明显增高(P<0.01);与H3N2感染组相比,一定浓度的药物组TLR7、TNF-α、IL-8、IFN-βmRNA表达量明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:流感病毒H3N2攻击细胞可以显著上调TLR7受体的表达和核因子NF-κB转录活性,并引起下游相关靶基因的表达增多。毒热平注射液可以下调H3N2引起的TLR7信号通路的激活,抑制NF-κB的转录活性,减少下游炎性因子TNF-α、IL-8、IFN-β的表达。关键词:H3N2;毒热平注射液;NF-κB;双荧光素酶报告系统;TLR7; 展开更多
关键词 H3N2 毒热平注射液 NF—κB 双荧光素酶报告系统 TLR7 信号转导
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毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织MMP-9及TIMP-1含量的影响 被引量：5
3
作者 祁广见 顾立刚 +2 位作者 彭桂英 殷胜骏 范新生 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1510-1513,共4页
目的观察毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响。方法 66只ICR小鼠随机分为正常组、... 目的观察毒热平注射液对流感病毒性肺炎小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响。方法 66只ICR小鼠随机分为正常组、模型组、毒热平低剂量组(0.435mg/d)、中剂量组(0.870mg/d)、高剂量组(1.740mg/d)和利巴韦林对照组(对照组,2.500mg/d),每组11只。以经鼻吸入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠流感病毒性肺炎模型。感染后当日开始腹腔注射给药,0.3mL/次,1次/天。5天后处死小鼠,计算肺指数;制作切片,光镜观察肺组织病理形态变化;采用ELISA双抗体夹心法测定肺组织匀浆液中MMP-9及TIMP-1含量。结果与正常组比较,模型组小鼠肺组织出现明显炎性病变,其肺指数、肺组织MMP-9及MMP-9/TIMP-1显著升高(P<0.01),而TIMP-1含量变化不明显(P>0.05);与模型组比较,毒热平低、中剂量组和对照组MMP-9降低(P<0.01),各剂量组和对照组TIMP-1升高(P<0.01),MMP-9/TIMP-1降低(P<0.01)。结论毒热平注射液可通过降低流感病毒性肺炎小鼠肺组织中MMP-9含量,提高TIMP-1含量,调节两者比值,从而减轻肺组织炎性损伤。 展开更多
关键词 毒热平注射液 流感病毒 基质金属蛋白酶-2 9 基质金属蛋白酶抑制物
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毒热平注射液对FM1流感病毒感染小鼠的抗病毒作用研究 被引量：3
4
作者 曾郁敏 贾翎 +2 位作者 邱泽计 吴珺 顾立刚 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期394-397,401,I0001,共6页
目的观察毒热平注射液对FM1流感病毒致小鼠感染的抗病毒作用。方法采用FM1流感病毒感染小鼠作为模型,测定其对感染小鼠死亡保护率及平均生活日的影响;测定其对感染小鼠体重及肺指数的影响;通过对肺脏标本进行HE染色,光镜观察感染小鼠肺... 目的观察毒热平注射液对FM1流感病毒致小鼠感染的抗病毒作用。方法采用FM1流感病毒感染小鼠作为模型,测定其对感染小鼠死亡保护率及平均生活日的影响;测定其对感染小鼠体重及肺指数的影响;通过对肺脏标本进行HE染色,光镜观察感染小鼠肺部不同的病理改变;测定其对感染小鼠肺脏匀浆中的病毒滴度的影响,观察其直接杀伤病毒的能力。结果在观察的时间内,毒热平注射液中剂量组与模型组比较,可显著延长其存活率(P<0.05);与模型组相比,毒热平可显著延长动物平均生存时间,中剂量组(P<0.05),大剂量组(P<0.05);显著降低小鼠的肺指数,大剂量组(P<0.01),中剂量组(P<0.001);毒热平中、小剂量组体重较模型组有显著性差异(P<0.05);对肺脏进行大体及光镜下观察,均可发现模型组病变最为严重,毒热平不同剂量组对病毒感染小鼠的肺脏病变均有不同程度的改善作用;毒热平注射液中剂量组可明显降低肺匀浆中病毒滴度,与模型组比较(P<0.05)。结论毒热平注射液在体内可有效抑制病毒增殖,减轻受试动物肺部病变,降低肺指数,提高存活率,从而发挥抗病毒治疗的作用,为其临床应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 毒热平注射液 抗病毒 实验研究 小鼠
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毒热平注射液对流感病毒FM1感染小鼠免疫功能的影响 被引量：3
5
作者 景姗 顾立刚 +1 位作者 周芸 李澎涛 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2009年第6期37-39,共3页
目的研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)基因转录水平、CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法以ICR小鼠(SPF级)作为研究对象。实验分为7组:毒热平注射液大、... 目的研究毒热平注射液对流感病毒FM1感染性肺炎小鼠肺指数、白细胞介素4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)基因转录水平、CD40L蛋白表达水平的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法以ICR小鼠(SPF级)作为研究对象。实验分为7组:毒热平注射液大、中、小剂量组及双黄连组、利巴韦林组、FM1感染模型组、正常组。流感病毒FM1感染小鼠造模连续7d后摘取肺组织,计算肺指数,采用RT-PCR法测定肺组织中INF-γmRNA、IL-4mRNA基因转录水平,采用Westernblot法检测肺组织中CD40L蛋白表达水平。结果FM1感染模型组的肺指数明显高于正常组(P<0.001),利巴韦林组、双黄连组及毒热平注射液大、中、小剂量组与FM1感染模型组比较,肺指数均明显降低(P<0.001或P<0.01),其中以毒热平中剂量组最好。毒热平注射液能降低FM1感染小鼠肺组织中IL-4mRNA基因转录(P<0.001),且与浓度成反向关系,但毒热平注射液组的IL-4mRNA基因转录水平明显高于利巴韦林组(P<0.001);毒热平注射液能增强FM1感染小鼠肺组织中IFN-γmRNA基因转录(P<0.001),且与浓度呈正向相关性,毒热平注射液大、中剂量组与利巴韦林组比较无统计学意义(P>0.05)。毒热平注射液能抑制FM1感染小鼠肺组织中CD40L蛋白表达(P<0.001),抑制效果与浓度呈正相关性,但毒热平注射液中、小剂量组CD40L蛋白表达水平显著高于正常组与利巴韦林组(P<0.05)。结论毒热平注射液体内能降低流感病毒FM1感染小鼠的肺指数,增强肺组织IFN-γmRNA基因转录,抑制IL-4mRNA基因转录,抑制流感病毒FM1感染小鼠肺组织CD40L蛋白的表达。 展开更多
关键词 毒热平注射液 流感病毒FM1 白细胞介素4 干扰素-Γ CD40L 小鼠
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毒热平注射液体外对小鼠T细胞功能及杀伤FM1感染靶细胞功能的影响 被引量：2
6
作者 景姗 顾立刚 +1 位作者 周芸 李澎涛 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期729-732,共4页
目的观察毒热平注射液体外对小鼠T细胞功能及杀伤流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染靶细胞的影响。方法用MTT法及双抗体夹心ELISA法检测毒热平注射液低、中、高(2.1、8.5、17.0μg/mL)剂量对正常小鼠、感染流感病毒亚甲型鼠肺适应株(F... 目的观察毒热平注射液体外对小鼠T细胞功能及杀伤流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)感染靶细胞的影响。方法用MTT法及双抗体夹心ELISA法检测毒热平注射液低、中、高(2.1、8.5、17.0μg/mL)剂量对正常小鼠、感染流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1)的脾细胞数目、产生干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、及T细胞杀伤FM1感染巨噬细胞Ana-1功能的影响。结果毒热平注射液体外能抑制刀豆蛋白A(Con A)诱导的正常小鼠脾细胞的增殖,抑制Th2型细胞因子IL-10的产生,促进Th1型细胞因子IFN-γ的产生;能保护FM1感染的小鼠脾细胞,并抑制其产生Th2型细胞因子IL-10,而使Th1型细胞因子IFN-γ水平保持在一定的范围内;还能直接增强T细胞对FM1感染的靶细胞(Ana-1)的杀伤能力(P<0.05,P<0.01)。结论毒热平注射液体外作用于小鼠T细胞,可增强有利于抗FM1感染的免疫应答。 展开更多
关键词 毒热平注射液 流感病毒亚甲型鼠肺适应株(FM1) T细胞 体外实验
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毒热平注射液对巨噬细胞TIR信号通路的影响 被引量：1
7
作者 张艳丽 王宁萍 +1 位作者 顾立刚 李澎涛 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期741-744,共4页
目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞TIR(Toll/IL-1 receptors)信号传导通路的影响。方法:用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10,1 mg.L-1含药维持... 目的:研究毒热平注射液对流感病毒感染的小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1细胞TIR(Toll/IL-1 receptors)信号传导通路的影响。方法:用100 TCID50流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠腹腔巨噬细胞株Ana-1后换用10,1 mg.L-1含药维持液继续培养,分别于12,24 h弃细胞上清液并收集细胞,提取巨噬细胞RNA,进行实时定量PCR反应(RT-PCR),动态测定毒热平注射液对病毒感染前后巨噬细胞TIR信号传导通路中各信号蛋白:Toll样受体7(TLR7)、髓样分化因子88(MyD88),IL-1受体相关激酶4(IRAK4)、肿瘤坏死因子相关激酶6(TRAF6)和核因子κB(NF-κB)mRNA表达水平的影响。结果:毒热平注射液可剂量依赖性地下调病毒感染巨噬细胞TLR7,MyD88,IRAK4,TRAF6,NF-κB mRNA的表达水平。结论:毒热平注射液能通过调节TIR信号传导通路各信号蛋白的活性发挥抗病毒感染作用。 展开更多
关键词 Ana一1 毒热平注射液 流感病毒 TIR TLR7
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