HPV16 E6蛋白在宫颈癌中的作用研究进展 被引量：11

1

作者 安振 万艳平 《微生物学免疫学进展》 2015年第3期42-46,共5页

高危型人乳头状瘤病毒16型(HPV16)与50%以上的宫颈癌密切相关,其E6癌蛋白作为病毒生命周期的主要蛋白之一,在诱导肿瘤发生与发展进程中起重要作用,且与病毒复制、宿主细胞周期调控、细胞凋亡、细胞增殖、细胞恶性表型转化有关。E6蛋白... 高危型人乳头状瘤病毒16型(HPV16)与50%以上的宫颈癌密切相关,其E6癌蛋白作为病毒生命周期的主要蛋白之一,在诱导肿瘤发生与发展进程中起重要作用,且与病毒复制、宿主细胞周期调控、细胞凋亡、细胞增殖、细胞恶性表型转化有关。E6蛋白主要作用包括:通过结合E6相关蛋白降解P53抑制细胞凋亡;增强端粒酶活性使宿主细胞永生化;与Daxx启动子区结合,抑制启动子转录活性,降低Daxx蛋白表达,阻遏细胞凋亡;与多种细胞因子相互作用后,经多种途径改变细胞微环境,使之有利于肿瘤细胞逃避宿主固有免疫应答。因此,在宫颈癌的发生和发展中,HPV16 E6蛋白通过多种作用机制发挥重要作用。 展开更多

关键词 HPV16 E6蛋白 P53 死亡结构域相关蛋白 端粒酶 宫颈癌

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基于TP53突变型胃癌患者DAXX表达特征的预后模型及其对临床结局的预测价值

2

作者 黄京京 毛亮亮 +2 位作者 林康明 陈琛斌 赵志光 《浙江医学》 CAS 2024年第12期1252-1257,I0005,I0006,共8页

目的分析TP53突变型胃癌(GC)患者死亡结构域相关蛋白(DAXX)表达特征并构建预后模型,评价该模型对GC患者预后的预测价值。方法收集癌症基因组图谱数据库中TP53野生型和突变型GC患者的DNA变异特征;收集2014年1月至2016年12月温州医科大学... 目的分析TP53突变型胃癌(GC)患者死亡结构域相关蛋白(DAXX)表达特征并构建预后模型,评价该模型对GC患者预后的预测价值。方法收集癌症基因组图谱数据库中TP53野生型和突变型GC患者的DNA变异特征;收集2014年1月至2016年12月温州医科大学附属第一医院手术切除的GC标本,并通过免疫组化检测p53蛋白表达状态和DAXX的亚细胞定位。绘制生存曲线分析不同DAXX表达状态TP53突变型GC患者的生存差异。采用Cox比例风险回归模型评估TP53突变型GC患者DAXX细胞核表达水平及不同临床病理特征对患者预后的预测效能,建立可视化临床预后模型。结果GC患者的TP53突变主要集中于p53 DNA结合区域,且与肌联蛋白基因、低密度脂蛋白受体相关蛋白1B基因和丝聚蛋白基因的突变水平有关。与TP53野生型GC患者相比,TP53突变型GC患者DAXX的mRNA表达显著升高(P<0.05)。免疫组化分析结果显示,与TP53野生型GC患者相比,TP53突变型GC患者DAXX细胞质表达显著下降,细胞核表达显著升高,核质比显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.01)。生存分析结果显示,在TP53突变型GC患者中,DAXX高表达,尤其是DAXX细胞核高表达提示预后良好。单因素和多因素Cox回归分析结果显示,年龄>67岁、肿瘤分期Ⅲ期、DAXX细胞核低表达是影响TP53突变型GC患者预后的独立危险因素(均P<0.10)。基于这3个指标建立的预后模型能准确预测TP53突变型GC患者的预后;模型一致性指数为0.740,显示出良好的预测效能。结论DAXX细胞核表达联合年龄、分期等临床病理特征,可较好地预测TP53突变型GC患者的预后。 展开更多

关键词 TP53突变 死亡结构域相关蛋白 胃癌 亚细胞定位 预后

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死亡结构域相关蛋白的核-质定位对乳腺癌MCF-7细胞功能的影响

3

作者 王佳 马旭辉 +2 位作者 高世磊 张新峰 刘怀民 《医学研究杂志》 2024年第8期79-84,共6页

目的研究死亡结构域相关蛋白(death domain-associated protein,DAXX)在乳腺癌细胞MCF-7中的表达及核-质定位,并探讨这两者对MCF-7细胞功能的影响。方法通过构建LV-DAXX-RNAi-GFP干扰与LV-DAXX-GFP过表达慢病毒质粒,转染MCF-7细胞,敲低... 目的研究死亡结构域相关蛋白(death domain-associated protein,DAXX)在乳腺癌细胞MCF-7中的表达及核-质定位,并探讨这两者对MCF-7细胞功能的影响。方法通过构建LV-DAXX-RNAi-GFP干扰与LV-DAXX-GFP过表达慢病毒质粒,转染MCF-7细胞,敲低和过表达DAXX。采用核-质分离法与免疫荧光法验证DAXX在MCF-7细胞中的表达与核-质定位,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,MTT法检测细胞增殖情况。结果核-质分离法与免疫荧光法均证实DAXX主要定位在MCF-7细胞核,转染LV-DAXX-GFP慢病毒质粒主要上调了MCF-7细胞质内DAXX的表达,而转染LV-DAXX-RNAi-GFP慢病毒质粒则主要下调了DAXX在MCF-7细胞核内的表达;流式细胞术证实下调DAXX的核内表达可以使MCF-7细胞凋亡率上升,细胞增殖受抑,并将细胞阻滞在S期,而上调DAXX的细胞质内表达对MCF-7的细胞凋亡、细胞周期和细胞增殖均无显著影响。结论DAXX在乳腺癌MCF-7细胞中主要定位在细胞核,DAXX表达于细胞核或者细胞质可能对MCF-7细胞功能有着相反的作用。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 乳腺癌 核-质定位

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Daxx和HPV16 E6在宫颈病变中的表达及其意义 被引量：6

4

作者 周蕾 张慧杰 +2 位作者 黄成琳 庞晓奡 张淑兰 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第37期3050-3053,共4页

目的 探讨Daxx与人乳头瘤病毒（HPV） 16 E6在宫颈病变中的表达情况及其意义.方法 对2010年9月至2013年11月就诊于中国医科大学附属盛京医院妇产科门诊活检或手术切除宫颈组织标本[其中宫颈癌63例,宫颈上皮不典型增生（CIN）Ⅲ44例,Ⅰ～... 目的 探讨Daxx与人乳头瘤病毒（HPV） 16 E6在宫颈病变中的表达情况及其意义.方法 对2010年9月至2013年11月就诊于中国医科大学附属盛京医院妇产科门诊活检或手术切除宫颈组织标本[其中宫颈癌63例,宫颈上皮不典型增生（CIN）Ⅲ44例,Ⅰ～Ⅱ45例,正常宫颈标本42例],采用免疫组化SABC法,检测Daxx及HPV16 F6的表达情况.结果 （1）在慢性宫颈炎、CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ和宫颈癌中Daxx的阳性表达率分别为28.57％（12/42）,40.00％（18/45）,65.91％（29/44）,66.67％ （42/63）,HPV16 E6为15.38％（6/39）,36.17％（17/47）,46.30％（25/54）,100.00％（24/24）;二者在宫颈高度病变组表达高于低级别组（P＜0.05）.（2） HPV16 F6高表达组的Daxx表达率高于HPV16 E6低表达组（P＜0.05）.（3） Daxx的表达与宫颈癌的病理分级、临床分期、淋巴结转移情况及患者年龄无关（P＞0.05）.（4） Daxx与HPV16 E6的阳性表达呈正相关（r=0.695,P＜0.05）.结论 Daxx和HPV16 E6随着宫颈病变级别的升高表达增加,两者可能存在某种协同作用,可能对宫颈病变发展起促进作用. 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 HPV16 E6 宫颈病变 免疫组织化学 HUMAN PAPILLOMAVIRUS 16 E6

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死亡结构域相关蛋白在肿瘤中的研究进展

5

作者 谈静 易伟成 +1 位作者 刘正霞 田宜平 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1069-1073,共5页

死亡结构域相关蛋白(DAXX)作为细胞表面受体Fas(TNFRSF6)的一种新型结合蛋白,参与机体多种生理、病理反应。目前,多项研究表明DAXX在多种肿瘤中表达异常,且通过不同途径参与肿瘤的发生发展。本综述旨在归纳总结DAXX在肿瘤中的研究进展。

关键词 病理反应 细胞表面受体 死亡结构域相关蛋白 结合蛋白 肿瘤的发生发展 表达异常 SF6 多种肿瘤

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SUMO化对DAXX亚细胞定位与功能的影响 被引量：3

6

作者 李玲 文娟 +1 位作者 庹勤慧 廖端芳 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期89-95,共7页

死亡结构域相关蛋白(death domain-associated protein,DAXX)是一个多功能的核蛋白,广泛分布于核仁、核质、染色质、早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NBs)和胞浆等亚细胞区域,对细胞的转录调控、凋亡及细胞周期等生物学活动发挥重要作用。... 死亡结构域相关蛋白(death domain-associated protein,DAXX)是一个多功能的核蛋白,广泛分布于核仁、核质、染色质、早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NBs)和胞浆等亚细胞区域,对细胞的转录调控、凋亡及细胞周期等生物学活动发挥重要作用。SUMO化修饰(small ubiquitin-like modification)是一种重要的、高度保守的翻译后生物学修饰,大量文献显示SUMO化修饰对DAXX的亚细胞定位及功能的调节具有重要意义。本文对此方面的研究进展做一综述。 展开更多

关键词 小泛素相关修饰蛋白 死亡结构域相关蛋白 亚细胞定位 小泛素化

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死亡结构域相关蛋白的研究进展 被引量：3

7

作者 胡坤 杨荣礼 董瑞国 《徐州医学院学报》 CAS 2015年第5期343-346,共4页

死亡结构域相关蛋白（death domain-associated protein，DAXX）是一种多功能的核蛋白，可定位于核质、核仁、胞质、早幼粒细胞白血病蛋白核体和异染色质。DAXX能与Fas死亡结构域结合，激活c-Jun氨基端激酶通路诱导的细胞凋亡。DAXX也... 死亡结构域相关蛋白（death domain-associated protein，DAXX）是一种多功能的核蛋白，可定位于核质、核仁、胞质、早幼粒细胞白血病蛋白核体和异染色质。DAXX能与Fas死亡结构域结合，激活c-Jun氨基端激酶通路诱导的细胞凋亡。DAXX也具有抗凋亡作用。DAXX不仅在凋亡通路中扮演非常重要的角色，同样也参与到多种疾病如白血病、肿瘤的调控等，在其中发挥重要的作用。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 细胞凋亡 亚细胞定位

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雌激素神经元保护作用的相关机制 被引量：2

8

作者 钟明 沈丽霞 《神经药理学报》 2015年第2期54-64,共11页

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,主要表现为β-淀粉样蛋白(beta amyloid protein,Aβ)的沉积和神经纤维的缠结,而且女性的发病率明显高于男性。目前认为AD的发生和发展与雌激素的减少密切相关,然而... 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,主要表现为β-淀粉样蛋白(beta amyloid protein,Aβ)的沉积和神经纤维的缠结,而且女性的发病率明显高于男性。目前认为AD的发生和发展与雌激素的减少密切相关,然而,雌激素的神经保护作用机制尚不明确。研究发现雌激素可与其受体结合,调节硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx-1)和凋亡信号调节激酶-1(apoptosis signal regulating kinase-1,Ask-1)的活性,抑制死亡结构域相关蛋白(death domain associate protein,Daxx)向细胞质转移,阻断Ask-1/JNK信号转导途径从而发挥抗氧化应激和凋亡;激活MAPK/ERK信号途径,促进淀粉前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)的非淀粉源途径,阻止Aβ的形成;此外,研究还发现被活化的雌激素受体与小窝蛋白相互作用,激活代谢型谷氨酸受体(metabotropic glutamate receptors,m Glu Rs),促进环磷腺苷效应元件结合蛋白(c AMP-response element binding protein,CREB)磷酸化;介导第二信使对抗谷氨酸的神经兴奋毒性而发挥神经保护作用。该文将对雌激素发挥神经保护作用的具体机制进行总结分析,为AD的预防和治疗提供一定的理论基础。 展开更多

关键词 雌激素 雌激素受体 阿尔茨海默病 死亡结构域相关蛋白 小窝蛋白

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Daxx抑制K562细胞向巨核细胞分化 被引量：2

9

作者 刘胜兵 潘魏巍 +4 位作者 沈忠飞 徐营 郭燕君 王志坚 黄倩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1004-1010,共7页

目的:观察过表达死亡结构域相关蛋白(Daxx)对K562细胞活力和向巨核细胞分化的影响。方法:建立稳定过表达Daxx的K562细胞,荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR和Western blot检测Daxx的过表达效果,CCK-8法检测过表达后细胞活力的变化;佛波酯... 目的:观察过表达死亡结构域相关蛋白(Daxx)对K562细胞活力和向巨核细胞分化的影响。方法:建立稳定过表达Daxx的K562细胞,荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR和Western blot检测Daxx的过表达效果,CCK-8法检测过表达后细胞活力的变化;佛波酯(PMA)诱导K562细胞向巨核细胞系分化,Western blot检测在K562细胞向巨核细胞分化过程中Daxx和p-ERK的表达变化,流式细胞术检测CD41和CD61的表达变化;PMA处理过表达Daxx的K562细胞,NBT还原实验检测细胞分化情况,流式细胞术检测过表达Daxx后CD41和CD61的表达变化,Western blot检测p-ERK的蛋白水平。结果:建立了稳定的过表达Daxx的K562细胞,过表达Daxx抑制K562细胞的活力。PMA诱导K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达水平增高,同时p-ERK的蛋白水平升高,Daxx表达水平下降。过表达Daxx可以抑制K562细胞向巨核细胞分化,CD41和CD61表达降低,同时p-ERK的蛋白水平降低。结论:过表达Daxx可以抑制K562细胞生长及向巨核细胞分化,同时抑制ERK的磷酸化。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 K562细胞 巨核细胞分化 佛波酯

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DAXX翻译后修饰的研究进展 被引量：1

10

作者 张燕 李天平 庹勤慧 《临床与病理杂志》 2014年第6期808-812,共5页

Fas死亡结构域相关蛋白(Fas death domain-associated protein)DAXX是一种高度保守的核蛋白,广泛分布于核质、核仁、胞浆、异染色质和早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NBs)等亚细胞区域,在细胞凋亡和转录调控中发挥重要作用。DAXX功能的... Fas死亡结构域相关蛋白(Fas death domain-associated protein)DAXX是一种高度保守的核蛋白,广泛分布于核质、核仁、胞浆、异染色质和早幼粒细胞白血病蛋白核体(PML-NBs)等亚细胞区域,在细胞凋亡和转录调控中发挥重要作用。DAXX功能的调控涉及一系列的翻译后修饰,包括泛素化修饰、类泛素样蛋白修饰、磷酸化修饰,通过修饰,可引起DAXX在各亚细胞区域间的转位,也可引起DAXX参与的生理功能的改变。本文对DAXX此方面的研究进展做一综述。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 泛素化修饰 类泛素样蛋白修饰 磷酸化修饰

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死亡结构域相关蛋白及其在宫颈病变中的研究进展 被引量：1

11

作者 周蕾 张淑兰 《国际妇产科学杂志》 CAS 2015年第1期91-95,共5页

宫颈癌对妇女健康构成严重威胁,人乳头瘤病毒感染与宫颈病变及宫颈癌的发生密切相关。关于宫颈癌发生发展的机制仍在研究中。近年研究发现一种多功能核蛋白,即死亡结构域相关蛋白(death domain associated protein,Daxx),其与细胞内蛋... 宫颈癌对妇女健康构成严重威胁,人乳头瘤病毒感染与宫颈病变及宫颈癌的发生密切相关。关于宫颈癌发生发展的机制仍在研究中。近年研究发现一种多功能核蛋白,即死亡结构域相关蛋白(death domain associated protein,Daxx),其与细胞内蛋白或病毒蛋白相互作用,参与调节细胞凋亡、转录调控、抗病毒等细胞活动,在不同途径中发挥不同的生理或病理作用。通过对Daxx功能及其作用机制的研究有助于进一步阐明宫颈癌发生发展的机制,有助于发现新的预防和治疗方法。综述Daxx的一般特性和研究现况及其在宫颈病变的研究进展。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 宫颈疾病 乳头状瘤病毒科 细胞凋亡 转录因子

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Caski细胞内Daxx与HPV16 E2蛋白的结合作用

12

作者 刘越 唐双阳 +4 位作者 刘安元 蔡恒玲 安振 刘志敏 万艳平 《微生物学免疫学进展》 2015年第2期4-6,共3页

目的研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白在Caski细胞内与Daxx的相互作用,探讨它们在HPV16所致宫颈癌发生发展中的作用。方法利用间接免疫荧光染色技术观察HPV16 E2和Daxx在Caski细胞中的分布或共定位;通过免疫共沉淀试验和免疫印迹分析H... 目的研究人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白在Caski细胞内与Daxx的相互作用,探讨它们在HPV16所致宫颈癌发生发展中的作用。方法利用间接免疫荧光染色技术观察HPV16 E2和Daxx在Caski细胞中的分布或共定位;通过免疫共沉淀试验和免疫印迹分析HPV16 E2与Daxx在Caski细胞内的相互作用。结果在Caski细胞内,Daxx和HPV16 E2主要分布于胞浆,少数分布于胞核,且两种信号在细胞浆内有一定的共存;抗E2抗体能沉淀Daxx,反之抗Daxx抗体同样能够沉淀HPV16 E2。结论 HPV16 E2与Daxx在Caski细胞存在直接的相互作用。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 CASKI细胞 E2蛋白 死亡结构域相关蛋白 结合作用

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人死亡结构域相关蛋白干扰载体的构建与鉴定

13

作者 余斓 唐双阳 +3 位作者 申海艳 伍虹蓉 朱翠明 万艳平 《生物技术》 CAS 2018年第4期341-344,371,共5页

[目的]构建人死亡结构域相关蛋白(hDaxx)的干扰载体,为研究hDaxx在HPV致宫颈癌发生与发展过程中的作用提供实验基础。[方法]以hDaxx全基因序列为模板,设计hDaxx RNA干扰引物并扩增干扰片段,将其连接到pGPU6/GFP/Neo真核表达载体,构建pGP... [目的]构建人死亡结构域相关蛋白(hDaxx)的干扰载体,为研究hDaxx在HPV致宫颈癌发生与发展过程中的作用提供实验基础。[方法]以hDaxx全基因序列为模板,设计hDaxx RNA干扰引物并扩增干扰片段,将其连接到pGPU6/GFP/Neo真核表达载体,构建pGPU6/GFP/Neo-SiDaxx干扰载体,转染至HeLa细胞,利用荧光显微镜观察转染效率以及通过RT-PCR、Western Blot检测siRNA对HeLa细胞中hDaxx表达的影响。[结果]在转染了pGPU6/GFP/Neo-Si Daxx载体的HeLa细胞中,其hDaxx mRNA和蛋白的表达水平与空载体对照组比较明显降低。[结论]成功构建了hDaxx的干扰载体pGPU6/GFP/Neo-Si Daxx,该干扰载体能抑制HeLa细胞中hDaxx mRNA基因和蛋白的表达。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 干扰 表达 抑制

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非小细胞肺癌中DAXX表达及临床意义

14

作者 王燕 田薇 +2 位作者 张曙 靳钦 刘颖 《交通医学》 2018年第4期316-319,共4页

目的:探讨非小细胞肺癌组织中DAXX蛋白表达及其与临床病理参数和患者预后的关系。方法:采用组织芯片结合免疫组织化学方法,检测135例非小细胞肺癌患者癌组织及其癌旁组织中DAXX蛋白的表达情况,结合患者的临床病理参数以及相关随访资料... 目的:探讨非小细胞肺癌组织中DAXX蛋白表达及其与临床病理参数和患者预后的关系。方法:采用组织芯片结合免疫组织化学方法,检测135例非小细胞肺癌患者癌组织及其癌旁组织中DAXX蛋白的表达情况,结合患者的临床病理参数以及相关随访资料进行统计学分析。结果:DAXX蛋白在非小细胞肺癌癌组织高表达108例(80.0%),癌旁组织高表达30例(22.2%),差异具有统计学意义(P<0.05),其表达水平与患者的组织病理学分级、TNM分期、原发肿瘤、淋巴结的转移、远处转移以及胸膜侵犯显著相关(P均<0.05),Kaplan-Meier统计分析显示DAXX高表达组患者生存时间明显短于低表达组(P<0.05),COX比例风险回归模型分析显示DAXX表达程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移为患者独立的预后因素。结论:DAXX蛋白表达与非小细胞肺癌的发生发展有关,其高表达提示患者预后不良。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 死亡结构域相关蛋白 免疫组化 预后

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DAXX在胃癌中的表达定位及其小泛素化修饰对胃癌恶性表型的影响

15

作者 陈琛斌 黄群佳 +4 位作者 谢旺凯 徐剑峰 沈贤 薛向阳 赵志光 《温州医科大学学报》 CAS 2020年第10期775-781,共7页

目的:研究死亡结构域相关蛋白(DAXX)在胃癌中的表达与定位,并探讨小泛素化修饰(SUMO)的DAXX对胃癌细胞恶性表型的影响。方法:生物信息学分析肿瘤基因图谱(TCGA)计划中DAXX在胃癌中的表达与预后;RT-qPCR检测各胃癌细胞系中DAXX的mRNA水... 目的:研究死亡结构域相关蛋白(DAXX)在胃癌中的表达与定位,并探讨小泛素化修饰(SUMO)的DAXX对胃癌细胞恶性表型的影响。方法:生物信息学分析肿瘤基因图谱(TCGA)计划中DAXX在胃癌中的表达与预后;RT-qPCR检测各胃癌细胞系中DAXX的mRNA水平。收集2017年1月至6月温州医科大学附属第二医院育英儿童医院胃癌术后患者20对癌和癌旁组织,免疫组化检测DAXX的表达。CCK-8和划痕实验分别检测DAXX对细胞增殖和迁移的作用。Western blot检测DAXX的核-浆蛋白分布及其对SUMO-2/3的影响。结果:生物信息学分析显示,DAXX在胃癌中的表达水平高于癌旁组织,但其表达高低对患者生存预后无影响(P=0.52);免疫组化结果显示胃癌组织DAXX的阳性率高于癌旁,且在细胞核中高表达;RT-qPCR证实胃癌细胞系中DAXX的mRNA表达量升高。CCK-8和划痕实验提示DAXX明显抑制细胞增殖(P<0.05)并促进细胞迁移(P<0.01)。Western blot显示DAXX核-浆蛋白分布差异,且存在SUMO-2/3修饰。结论:DAXX在胃癌组织中高表达,且主要定位于细胞核。DAXX可能通过与SUMO-2/3结合,抑制胃癌增殖和促进转移。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 胃癌 小泛素化修饰 亚细胞定位

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死亡结构域相关蛋白和E2启动子结合因子在儿童急性白血病中的表达及其临床意义

16

作者 张宝玺 王素明 +3 位作者 吴晓莉 赵晓庆 张爱辉 封雪枫 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2011年第5期217-220,共4页

目的探讨死亡结构域相关蛋白(Daxx)和E2启动子结合因子-1(E2F1)在急性白血病(AL)患儿骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin peroxidase,SP)法,分别检测40例AL患儿和20例... 目的探讨死亡结构域相关蛋白(Daxx)和E2启动子结合因子-1(E2F1)在急性白血病(AL)患儿骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin peroxidase,SP)法,分别检测40例AL患儿和20例非恶性血液病儿童Daxx和E2F1的表达情况。结果 (1)AL组患儿骨髓细胞Daxx和E2F1阳性表达率分别为40%和57.5%,均显著高于对照组的10%(P<0.05)和20%(P<0.01);Daxx表达水平在急性髓细胞白血病组(58.8%)明显高于急性淋巴细胞白血病组(26.1%,P<0.05);E2F1在两组患儿中的阳性表达率差异无显著性(P>0.05)。(2)Daxx表达阴性者的完全缓解率高于阳性者(P<0.05),但E2F1表达阳性者与阴性者的完全缓解率相比差异无显著性(P>0.05)。(3)AL患儿Daxx与E2F1的表达水平有相关关系(P<0.05)。结论 Daxx和E2F1在儿童急性白血病中高水平表达,在儿童急性白血病的发生发展过程中可能存在某种协同作用,可能与儿童AL的疗效及预后相关。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 E2启动子结合因子-1 儿童 急性白血病 免疫组织化学

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Daxx在斑马鱼胚胎发育中的作用及其机制研究

17

作者 张涛 袁浩 +3 位作者 刘肸 刘晓慧 周隽 朱军 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1458-1464,共7页

目的明确死亡结构域相关蛋白(Daxx)在斑马鱼胚胎发育过程中的时-空表达谱,并研究其作用与机制。方法利用原位杂交技术检测Daxx的表达谱;利用吗啉反义寡核苷酸介导的基因敲减技术敲低Daxx的表达,观测斑马鱼胚胎发育情况,并用pH3和TUNEL... 目的明确死亡结构域相关蛋白(Daxx)在斑马鱼胚胎发育过程中的时-空表达谱,并研究其作用与机制。方法利用原位杂交技术检测Daxx的表达谱;利用吗啉反义寡核苷酸介导的基因敲减技术敲低Daxx的表达,观测斑马鱼胚胎发育情况,并用pH3和TUNEL染色检测Daxx敲低后细胞增殖及凋亡的改变;通过Real-Time PCR实验研究Daxx影响细胞凋亡和胚胎发育的分子机制。结果敲低Daxx后斑马鱼胚胎细胞凋亡和畸形率显著增加,这一表型能被p53蛋白共敲低所恢复;在分子机制上,Daxx敲低可不同程度特异性激活bax、mdm2、p21和cyclin G1等p53下游多个基因的表达,Daxx富含酸性氨基酸的功能区介导了上述过程。结论 Daxx利用其自身结构域与p53作用,并特异调控其下游关键基因的表达,参与调节斑马鱼胚胎细胞凋亡和形态发育。 展开更多

关键词 死亡结构域相关蛋白 P53 基因敲减 斑马鱼 细胞凋亡 胚胎发育

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凋亡蛋白Daxx与TRAF3相互作用的筛选及相互作用位点的鉴定

18

作者 张翠莉 成海恩 王应雄 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第9期826-830,共5页

目的:利用酵母双杂交技术在成人肝文库中筛选能与死亡结构域相关蛋白(Daxx)相互作用的蛋白,并用哺乳动物细胞中进行了免疫共沉淀验证,以进一步了解Daxx的功能.方法:利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增Daxx全长ORF,构建pDBLeu-Daxx载体.转化M... 目的:利用酵母双杂交技术在成人肝文库中筛选能与死亡结构域相关蛋白(Daxx)相互作用的蛋白,并用哺乳动物细胞中进行了免疫共沉淀验证,以进一步了解Daxx的功能.方法:利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增Daxx全长ORF,构建pDBLeu-Daxx载体.转化MaV203,检测细胞毒性和自激活作用,确定His基础表达的3AT浓度.依次转化成人肝cDNA文库.在营养缺陷型培养基上挑取三阳性克隆.进行回转实验和免疫共沉淀验证,并利用β-gal分析进行了相互作用结构域的鉴定.结果:筛库转化效率达到5.8×106个克隆.筛选到了一株能与Daxx相互作用的阳性克隆,DNA序列分析和同源检索表明该阳性克隆为肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3).通过回转及co-IP证实了TRAF3能与Daxx相互作用,β-gal分析发现TRAF3通过TRAFDomain与Daxx相互作用.结论:TRAF3通过TRAFDomain与Daxx相互作用,可能参与了Daxx的调控和功能,为进一步了解Daxx作用的分子机制奠定了基础. 展开更多

关键词 凋亡 死亡结构域相关蛋白 TRAF3 酵母双杂交

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香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡与FADD mRNA表达的影响 被引量：3

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作者 李斐 张岳 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期3899-3900,共2页

目的研究香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡及其相关基因表达的影响。方法线栓法制备脑缺血再灌注大鼠损伤模型,缺血2 h后再灌注3、6、12、24 h,采用TUNEL检测(原位末端转移酶标记技术)检测细胞凋亡,提取脑组织RNA检测Fas死亡结构... 目的研究香丹注射液对脑缺血再灌注大鼠细胞凋亡及其相关基因表达的影响。方法线栓法制备脑缺血再灌注大鼠损伤模型,缺血2 h后再灌注3、6、12、24 h,采用TUNEL检测(原位末端转移酶标记技术)检测细胞凋亡,提取脑组织RNA检测Fas死亡结构域相关蛋白(FADD)mRNA的表达变化。结果治疗组大鼠缺血再灌注后FADD mRNA表达水平较模型组均降低(P<0.05),第24小时与假手术组比较无统计学意义(P>0.05);治疗组大鼠凋亡细胞凋亡率较模型组明显降低(P<0.01)。结论香丹注射液能降低脑缺血后脑组织中FADD mRNA蛋白的表达,减轻细胞凋亡。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注 香丹注射液 细胞凋亡 Fas死亡结构域相关蛋白mRNA

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siRNA沉默Fas死亡结构域相关蛋白基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移行为的影响研究 被引量：2

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作者 田瑞华 郑良楷 +3 位作者 何泽生 黄宗涌 杨毅斌 张爱格 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第5期1168-1171,共4页

目的探讨siRNA沉默Fas死亡结构域相关蛋白(DAXX)基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移行为的影响,为临床诊断提供参考依据。方法培养MCF-7细胞,观察组对细胞进行siRNA-DAXX转染,空白组不对细胞进行任何处理,对照组对细胞进行siRNA-NC转染,(1... 目的探讨siRNA沉默Fas死亡结构域相关蛋白(DAXX)基因对乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移行为的影响,为临床诊断提供参考依据。方法培养MCF-7细胞,观察组对细胞进行siRNA-DAXX转染,空白组不对细胞进行任何处理,对照组对细胞进行siRNA-NC转染,(1)使用RT-PCR和Western Blot法分别检测三组DAXX mRNA和蛋白表达水平,(2)使用MTT法检测三组细胞增殖能力,(3)使用Transwell小室实验检测三组细胞迁移能力。结果 (1)观察组DAXX表达水平与空白组及对照组对比差异有统计学意义(P<0. 05),siRNA能够显著抑制DAXX基因表达和蛋白合成,(2)Western blot显示DAXX基因被沉默后,观察组细胞增殖率仅为空白组或对照组的62. 93%,(3)RT-PCR显示DAXX基因被沉默后,观察组细胞增殖率仅为空白组或对照组的77. 24%;(4)Transwell小室实验结果显示,与空白组及对照组相比,观察组细胞穿过小室的几率显著降低,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论 siRNA沉默DAXX基因表达后,乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力和迁移能力显著减低,DAXX是一种肿瘤促进基因。 展开更多

关键词 SIRNA Fas死亡结构域相关蛋白 乳腺癌 细胞增殖 细胞迁移

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