移植物局部引流淋巴结对异体复合组织皮瓣移植后存活时间的影响

1

作者 马戈甲 裴蛟淼 +1 位作者 李杨 韩岩 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第5期499-502,512,共5页

目的:探讨移植物局部引流淋巴结在异体复合组织移植中是否参与了早期的排斥反应,干预淋巴结后能否延长皮瓣存活时间。方法:BN大鼠作为供体、Lewis大鼠作为受体,进行腹部游离皮瓣异体移植。将大鼠随机分为三组,A组:正常移植;B组:术中去... 目的:探讨移植物局部引流淋巴结在异体复合组织移植中是否参与了早期的排斥反应,干预淋巴结后能否延长皮瓣存活时间。方法:BN大鼠作为供体、Lewis大鼠作为受体,进行腹部游离皮瓣异体移植。将大鼠随机分为三组,A组:正常移植;B组:术中去除受体移植区域引流淋巴结;C组:将皮瓣卷成皮管,利用硅胶管隔离移植物和受体之间的皮肤接触,仅保留血管相通。观察三组皮瓣存活状态,术后不同时间点对各组皮瓣HE染色和血清白细胞介素-2(IL-2)水平检测。结果:B、C组皮瓣存活时间相对于A组均延长(均P<0.05)。A组3 d皮瓣出现水肿和出血点,B、C组在7 d以后才出现不同程度的水肿和出血点。A组相较于其他各组,IL-2表达水平明显升高,在排斥终点(术后第7天)达到最大;B、C组在术后第7天IL-2表达水平分别为(145.15±4.2)ng/L和(96.28±4.62)ng/L,A组与B、C组比较有统计学差异(均P<0.05)。结论:移植物局部引流淋巴结在免疫排斥早期起着关键的作用,移除移植物局部引流淋巴结可以延长皮瓣存活时间。如果早期能够干预引流淋巴结,就有可能减少效应T细胞的产生,从而减轻移植物的排斥反应。 展开更多

关键词 同种异体复合组织移植 引流淋巴结 次级淋巴组织 淋巴系统 皮瓣排斥反应 抗原提呈细胞

下载PDF 职称材料

次级淋巴趋化因子SLC的克隆及其在原核系统中的表达 被引量：2

2

作者 王东宁 李明峰 +2 位作者 曾而良 张惟杰 吴祥甫 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期392-395,共4页

以中国人的淋巴组织为材料抽提总RNA ,用RT PCR的方法扩增了次级淋巴组织趋化因子 (Secondarylym phoid tissuechemokine,SLC)的成熟肽基因。序列分析表明 ,我们克隆的SLC基因与文献报道的仅有一个核苷酸的差异 ,且并不影响氨基酸的编... 以中国人的淋巴组织为材料抽提总RNA ,用RT PCR的方法扩增了次级淋巴组织趋化因子 (Secondarylym phoid tissuechemokine,SLC)的成熟肽基因。序列分析表明 ,我们克隆的SLC基因与文献报道的仅有一个核苷酸的差异 ,且并不影响氨基酸的编码。将SLC的cDNA插入含T7启动子的表达载体pET 2 8a(+)中构建重组质粒pET SLC ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)筛选表达菌株。表达菌株经 1mmol LIPTG诱导表达 3～ 5h后 ,超声破菌 ,离心后将上清进行SDS PAGE ,可以看到在 18kD左右处有明显的表达条带。用Ni2 + 亲和层析柱纯化表达产物 ,纯度达到 90 %以上。 展开更多

关键词 次级淋巴组织 趋化因子 克隆 基因表达 趋化作用

下载PDF 职称材料

次级淋巴组织趋化因子基因转染对小鼠黑色素瘤细胞生物学特性的影响 被引量：6

3

作者 马飞 孙文欣 +5 位作者 张叔人 刘蓉枝 付明 梁肖 张雪艳 林晨 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期362-365,共4页

目的研究次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因转染对小鼠恶性黑色素瘤细胞生物学特性的影响。方法采用脂质体法将小鼠SLC基因转染至小鼠恶性黑色素瘤细胞中,并通过G418筛选出转基因细胞克隆。体外检测SLC基因转染恶性黑色素瘤细胞的增殖,并... 目的研究次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因转染对小鼠恶性黑色素瘤细胞生物学特性的影响。方法采用脂质体法将小鼠SLC基因转染至小鼠恶性黑色素瘤细胞中,并通过G418筛选出转基因细胞克隆。体外检测SLC基因转染恶性黑色素瘤细胞的增殖,并通过趋化小室法检测细胞培养基上清液中SLC的趋化活性。检测野生型和基因转染的恶性黑色素瘤细胞在体内的致瘤性,并病理检测肿瘤组织中免疫细胞的浸润。结果SLC基因转染的恶性黑色素瘤细胞和野生型恶性黑色素瘤细胞在体外的增殖没有明显差别。分泌于细胞培养基上清液中的SLC表现出了趋化活性。SLC基因转染并没有降低细胞的致瘤性,但是移植瘤的生长明显慢于野生型恶性黑色素瘤细胞移植瘤的生长,并且病理证实SLC基因转染的肿瘤细胞移植瘤内呈现明显的淋巴细胞浸润。结论SLC基因转染在小鼠黑色素瘤能诱导抗肿瘤免疫,有可能被应用于恶性肿瘤的免疫治疗。 展开更多

关键词 次级淋巴组织趋化因子 基因转移 肿瘤疫苗 趋化性

下载PDF 职称材料

白藜芦醇下调CCR7表达对肺癌细胞转移活性的影响 被引量：5

4

作者 陈郭玲 周爽 +3 位作者 陶惠红 刘仁鹏 程婷婷 杨耀琴 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2014年第4期29-34,共6页

目的探讨白藜芦醇对CCR7表达的作用及其对肺癌细胞A549、95D转移活性的影响。方法 A549、95D肺癌细胞经不同剂量的白藜芦醇处理后,通过流式细胞术、荧光细胞化学技术、Western印迹法等观察CCR7的蛋白表达水平的变化;MTT法测定白藜芦醇... 目的探讨白藜芦醇对CCR7表达的作用及其对肺癌细胞A549、95D转移活性的影响。方法 A549、95D肺癌细胞经不同剂量的白藜芦醇处理后,通过流式细胞术、荧光细胞化学技术、Western印迹法等观察CCR7的蛋白表达水平的变化;MTT法测定白藜芦醇对细胞毒性作用;划痕实验、Transwell小室测定细胞的迁移能力改变。结果 A549、95D细胞有不同水平CCR7表达,白藜芦醇处理后,两种肺癌细胞CCR7表达降低,以A549更为显著,呈时间、剂量依赖性;白藜芦醇作用24 h后划痕实验、Transwell小室结果表明白藜芦醇具有抑制细胞的水平迁移能力,也抑制次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)对肺癌细胞的趋化作用。结论白藜芦醇下调CCR7的表达,可能参与抑制肿瘤细胞转移的过程。 展开更多

关键词 白藜芦醇 肺肿瘤 CCR7 次级淋巴组织趋化因子 转移

下载PDF 职称材料

次级淋巴组织趋化因子和甲胎蛋白共修饰的树突状细胞诱导特异性抗肝癌免疫作用的研究 被引量：4

5

作者 侯静 李明峰 +3 位作者 熊伟民 何新颖 邸立军 任军 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期502-507,共6页

背景与目的:树突状细胞(dendritic cell,DC)是迄今发现的抗原呈递功能最强的专职抗原呈递细胞,近年来以DC为基础的肿瘤基因免疫治疗研究倍受瞩目。病毒载体介导的基因转移以其高效和良好的靶向性已被广泛应用于肿瘤基因治疗。本实验拟... 背景与目的:树突状细胞(dendritic cell,DC)是迄今发现的抗原呈递功能最强的专职抗原呈递细胞,近年来以DC为基础的肿瘤基因免疫治疗研究倍受瞩目。病毒载体介导的基因转移以其高效和良好的靶向性已被广泛应用于肿瘤基因治疗。本实验拟制备携带人AFP和SLC基因的慢病毒表达载体,并于体外感染CD34+造血干细胞来源的DC,诱导DC产生特异性抗肝癌细胞免疫作用,观察其对肝癌细胞株的杀伤作用。方法:采用化疗和集落刺激因子动员的肝癌患者外周血造血干细胞,血细胞分离机采集CD34+造血干细胞,IL-4、GM-CSF联合TNF-α刺激CD34+细胞分化为DC。并检测经Lenti-AFP/Lenti-SLC转染致敏后的DC对CTL增殖的影响,并检测其对人肝癌细胞HepG2的作用。结果:经细胞因子刺激诱导培养的DC具有典型的分枝状突起,高表达CD1a、CD11c、CD80和CD86。MTT法检测Lenti-AFP/Lenti-SLC抗原冲击的DC能明显诱导CTL增殖。此CTL对表达AFP的肝癌细胞株HepG2的杀伤率显著性高于未转染DC组和无DC组(P<0.05和P<0.01),效靶比为50:1时杀伤效应达到最高峰(P<0.01)。结论:Lenti-AFP/Lenti-SLC抗原转染的DC在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对AFP阳性肝癌细胞株具有特异性杀伤效应,该方法为肝癌免疫治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 次级淋巴组织趋化因子 甲胎蛋白 树突状细胞 细胞毒性T淋巴细胞 肝癌

下载PDF 职称材料

Ⅰ期非小细胞肺癌SLC及其受体CCR7的表达与淋巴结微转移关系 被引量：4

6

作者 裴艳志 聂美楠 +5 位作者 姜腾蛟 王晓强 李春磊 路通 朱晓峰 邹志田 《黑龙江医药科学》 2020年第6期1-3,共3页

目的:探讨Ⅰ期非小细胞肺癌次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体肿瘤表面自分泌趋化因子受体7(CCR7)的表达与淋巴结微转移关系。方法:选取我院胸外科2010-01-01~2015-01-01共60例行肺癌根治的Ⅰ期非小细胞肺癌患者标本,患者术前及术后均... 目的:探讨Ⅰ期非小细胞肺癌次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体肿瘤表面自分泌趋化因子受体7(CCR7)的表达与淋巴结微转移关系。方法:选取我院胸外科2010-01-01~2015-01-01共60例行肺癌根治的Ⅰ期非小细胞肺癌患者标本,患者术前及术后均未行放疗及化疗治疗,作为病例组。同时收集10例肺良性病变患者正常肺组织(对照组1)及20例肺良性病变患者淋巴结组织(对照组2)作为对照。应用免疫组织化学SP法检测各组织中SLC及CCR7的表达;并采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测SLC mRNA及CCR7mRNA在各组织中的表达情况,相关分析SLC及其受体CCR7与Ⅰ期非小细胞肺癌淋巴结微转移的关系。结果:病例组与两组对照组的SLC、CCR7的表达阳性率,具有统计学意义(P<0.05);病例组的SLC mRNA及CCR7 mRNA明显高于两组对照组,具有统计学意义(P<0.05);相关分析认为SLC及其受体CCR7的表达与淋巴结微转移有关(P<0.05);但是与SLC及其受体CCR7的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关(P>0.05)。结论:Ⅰ期非小细胞肺癌SLC及其受体CCR7的表达为高表达,这种表达与淋巴结微转移有关。 展开更多

关键词 Ⅰ期非小细胞肺癌 次级淋巴组织趋化因子 肿瘤表面自分泌趋化因子受体7 淋巴结微转移 相关性

下载PDF 职称材料

次级淋巴组织趋化因子浓度梯度抑制肿瘤细胞免疫逃逸 被引量：2

7

作者 吴砂 袁晓梅 +1 位作者 朱慧芬 沈关心 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第8期846-848,共3页

目的探讨人次级淋巴组织趋化因子(SLC)浓度梯度对肿瘤细胞免疫逃逸的影响。方法根据SLC浓度梯度,实验分6组;流式细胞术检测肿瘤细胞HLA-Ⅰ类分子的表达、肿瘤细胞凋亡,Western blot检测肿瘤细胞胞内BCL-2表达,ELISA检测肿瘤细胞培养上... 目的探讨人次级淋巴组织趋化因子(SLC)浓度梯度对肿瘤细胞免疫逃逸的影响。方法根据SLC浓度梯度,实验分6组;流式细胞术检测肿瘤细胞HLA-Ⅰ类分子的表达、肿瘤细胞凋亡,Western blot检测肿瘤细胞胞内BCL-2表达,ELISA检测肿瘤细胞培养上清中生长转化因子β(TGF-β)水平。结果在一定浓度范围内,随SLC浓度增加,肿瘤细胞的HLA-Ⅰ类分子表达增高,肿瘤细胞凋亡增多;BCL-2表达增高,而肿瘤细胞TGF-β分泌水平降低。结论SLC具有抑制肿瘤细胞免疫逃逸的作用。 展开更多

关键词 次级淋巴组织趋化因子 肿瘤细胞 免疫逃逸

下载PDF 职称材料

次级淋巴组织趋化因子及其受体CCR7在胰腺癌中的表达及临床意义 被引量：3

8

作者 赵斌 赵文华 +5 位作者 王长亮 张波 周武元 张红雨 仲伟霞 李胜 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期205-209,213,共6页

目的研究胰腺癌中次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体CCR7的表达情况,探讨其与胰腺癌临床病理关系。方法应用免疫组化、RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测30例胰腺癌组织、癌旁组织、正常胰腺组织和胰周淋巴结组织中SLC和CCR7的表达情况... 目的研究胰腺癌中次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体CCR7的表达情况,探讨其与胰腺癌临床病理关系。方法应用免疫组化、RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测30例胰腺癌组织、癌旁组织、正常胰腺组织和胰周淋巴结组织中SLC和CCR7的表达情况。结果SLC蛋白在胰腺癌组织中呈低表达状态、在癌旁组织和胰周淋巴结均呈中等表达状态、在正常胰腺组织中高表达,阳性率分别为16.7%(5/30)、43.3%(13/30)、46.6%(14/30)和76.7%(23/30)。RT-PCR和实时荧光定量PCR也证实SLCmRNA表达与SLC蛋白相同。CCR7蛋白在胰腺癌组织、癌旁组织和胰周淋巴结均呈高表达状态、在正常胰腺组织中呈低表达状态,阳性率分别为76.7%(23/30)、66.7%(23/30)、70.0%(/30)和30.0%;同时还发现CCR7蛋白在胰腺静脉平滑肌和淋巴结外脂肪组织也有阳性表达情况。RT-PCR和实时荧光定量PCR结果也证实CCR7mRNA表达与CCR7蛋白相同。结论SLC在胰腺癌进展和淋巴结转移过程中起双重作用,既发挥抗肿瘤作用,又通过趋化CCR7表达阳性的肿瘤细胞促进胰腺癌的淋巴结转移。CCR7与胰腺癌淋巴结转移和TNM分期密切相关,并可能参与胰腺癌的淋巴管生成和淋巴结转移的调控。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 次级淋巴组织趋化因子 CCR7

下载PDF 职称材料

胰腺癌组织SLC及其受体CCR7与VEGF-C表达及相关性研究 被引量：4

9

作者 赵斌 赵文华 +4 位作者 张波 周武元 于文胜 张红雨 李胜 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2008年第17期1289-1293,共5页

目的:探讨次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体CCR7与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在胰腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法:应用免疫组化、RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测30例胰腺癌组织、癌旁组织、正常胰腺组织和胰周淋巴结... 目的:探讨次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体CCR7与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在胰腺癌组织中的表达及其与临床病理的关系。方法:应用免疫组化、RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测30例胰腺癌组织、癌旁组织、正常胰腺组织和胰周淋巴结组织中SLC、CCR7和VEGF-C的表达情况。结果:SLC蛋白在胰腺癌组织中呈低表达状态,在正常胰腺组织、癌旁组织和胰周淋巴结均呈中等表达状态,与胰腺癌组织中的表达相比较差异均有统计学意义,P<0.01。RT-PCR和实时荧光定量PCR结果也证实CCR7在胰腺癌组织、癌旁组织以及胰周淋巴结均呈高表达状态,而在正常胰腺组织呈低表达状态,P<0.01。经Spearman秩相关检验,胰腺癌组织中CCR7与VEGF-C蛋白的表达具有显著的相关性,P=0.038。结论:SLC的表达与胰腺癌淋巴结转移和TNM分期密切相关,并可能参与胰腺癌的淋巴管生成和淋巴结转移的调控。CCR7与VEGF-C的阳性表达可能对胰腺癌的发展起共同促进作用。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 次级淋巴组织趋化因子 CCR7 血管内皮生长因子-C

下载PDF 职称材料

不同浓度的次级淋巴组织趋化因子对外周血单个核细胞生物学功能的影响 被引量：4

10

作者 吴砂 邢薇 +3 位作者 袁晓梅 雷萍 朱慧芬 沈关心 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期469-470,共2页

目的探讨人次级淋巴组织趋化因子(SLC)浓度梯度对外周血单个核细胞(PBMC)生物学功能的影响。方法根据SLC浓度,实验分为6组,通过趋化实验检测PBMC的趋化,并通过流式细胞术检测PBMC凋亡及增殖能力,ELISA检测PBMC培养上清中IL-10和IFN-γ... 目的探讨人次级淋巴组织趋化因子(SLC)浓度梯度对外周血单个核细胞(PBMC)生物学功能的影响。方法根据SLC浓度,实验分为6组,通过趋化实验检测PBMC的趋化,并通过流式细胞术检测PBMC凋亡及增殖能力,ELISA检测PBMC培养上清中IL-10和IFN-γ的表达。结果一定浓度范围内,SLC可增强PBMC的迁移、抗凋亡、增殖及IFN-γ表达能力。降低IL-10的表达水平,证明上述作用具有浓度依赖性。结论SLC可通过促进PBMC迁移,增强其增殖,诱导Th1类细胞分化,提高了机体的免疫应答。 展开更多

关键词 次级淋巴组织趋化因子 浓度梯度 PBMC

下载PDF 职称材料

次级淋巴组织趋化因子及其受体CCR7在肿瘤侵袭和淋巴转移中的研究进展 被引量：3

11

作者 赵文华 李胜 衣龙海 《国际外科学杂志》 2007年第5期349-354,共6页

次级淋巴组织趋化因子（SLC）是近年发现的一种新的趋化因子,高表达于次级淋巴组织,能趋化并活化T淋巴细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞等免疫效应细胞,在机体淋巴细胞的迁移归巢、抗肿瘤、抗感染过程中具有重要作用。CCR7是SLC的高亲和... 次级淋巴组织趋化因子（SLC）是近年发现的一种新的趋化因子,高表达于次级淋巴组织,能趋化并活化T淋巴细胞、树突状细胞和自然杀伤细胞等免疫效应细胞,在机体淋巴细胞的迁移归巢、抗肿瘤、抗感染过程中具有重要作用。CCR7是SLC的高亲和力受体,近年来研究发现,CCR7和SLC的表达与肿瘤的淋巴转移密切相关。现综述SLC及其受体CCR7的生物学特性和主要功能,并重点阐述SLC和CCR7在肿瘤侵袭和淋巴转移中的研究现状。 展开更多

关键词 次级淋巴组织趋化因子 CCR7 淋巴转移 淋巴管形成

原文传递

次级淋巴组织趋化因子在溃疡性结肠炎发病中的作用 被引量：3

12

作者 葛步军 陈锡美 +1 位作者 杨长青 吴剑 《中华胃肠外科杂志》 CAS 2008年第6期561-564,共4页

目的探讨次级淋巴组织趋化因子（SLC）对实验性溃疡性结肠炎（UC）大鼠结肠病变的影响。方法60只SD大鼠随机分为对照组、UC模型组（模型组）及SLC抗体干预治疗UC模型组（干预组），观察、比较不同组别结肠黏膜炎性和淋巴细胞归巢状况以... 目的探讨次级淋巴组织趋化因子（SLC）对实验性溃疡性结肠炎（UC）大鼠结肠病变的影响。方法60只SD大鼠随机分为对照组、UC模型组（模型组）及SLC抗体干预治疗UC模型组（干预组），观察、比较不同组别结肠黏膜炎性和淋巴细胞归巢状况以及结肠组织细胞因子（IL-2和IL-6）的变化。逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）半定量法检测结肠组织中的SLC表达。结果3组大鼠的结肠黏膜炎性反应评分和结肠组织细胞因子含量差异有统计学意义（P〈0．05和P〈0．01）。模型组和干预组的结肠黏膜下存在淋巴细胞异常归巢现象：模型组和干预组SLC mRNA的表达量比对照组明显升高（0．846±0．047和0．768±0．135比0．312±0．112．P〈0．01）．但模型组与干预组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论SLC与实验性溃疡性结肠炎大鼠的结肠黏膜炎性反应密切相关。阻断SLC是减轻结肠黏膜炎性反应的有效途径之一。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 次级淋巴组织趋化因子 淋巴细胞归巢 逆转录聚合酶链反应

原文传递

人次级淋巴组织趋化因子的基因克隆及原核表达 被引量：2

13

作者 董忠军 赵跃然 +3 位作者 游力 高春义 魏海明 田志刚 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1099-1102,共4页

目的 :获得人次级淋巴组织趋化因子 (SL C)基因 ,并通过大肠杆菌实现人 SL C的非融合表达。 方法 :提取淋巴结组织总 RNA,RT- PCR法扩增人 SL C成熟肽基因 ,克隆到 p MD18- T载体中 ,DNA测序。用限制性内切酶切下目的基因 ,与相应酶切... 目的 :获得人次级淋巴组织趋化因子 (SL C)基因 ,并通过大肠杆菌实现人 SL C的非融合表达。 方法 :提取淋巴结组织总 RNA,RT- PCR法扩增人 SL C成熟肽基因 ,克隆到 p MD18- T载体中 ,DNA测序。用限制性内切酶切下目的基因 ,与相应酶切的表达载体 p BV 2 2 0连接、筛选、鉴定。 4 2℃热诱导表达目的蛋白 ,SDS- PAGE和 Western印迹法鉴定重组蛋白 ,分子筛初步纯化目的蛋白。 结果 :表达蛋白占菌体 15 %以上 ,免疫印迹证实为特异性蛋白 ,分子筛纯化后纯度达 90 %以上。 结论 :成功获得人 SL 展开更多

关键词 次级淋巴组织趋化因子 基因克隆 原核表达 大肠杆菌 基因表达

下载PDF 职称材料

SLC基因修饰树突状细胞及不同免疫方式抗肿瘤作用探讨 被引量：3

14

作者 梁春敏 钟翠平 +5 位作者 郑宁 刘彬彬 孙瑞霞 吴欣 刘银坤 叶胜龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期721-726,共6页

目的:应用次级淋巴组织趋化因子(SLC)成熟肽基因/重组腺相关病毒(rAAVSLC)转染树突状细胞(DC),探讨一种基因修饰DC的新方法及其抗肿瘤的生物学活性。方法:体外构建rAAVSLC,按MOI为10、50、100与腺病毒(Ad2)协同转染小鼠骨髓来源成熟和... 目的:应用次级淋巴组织趋化因子(SLC)成熟肽基因/重组腺相关病毒(rAAVSLC)转染树突状细胞(DC),探讨一种基因修饰DC的新方法及其抗肿瘤的生物学活性。方法:体外构建rAAVSLC,按MOI为10、50、100与腺病毒(Ad2)协同转染小鼠骨髓来源成熟和未成熟DC,GFP作为成功转染的示踪蛋白。RTPCR在mRNA水平、ELISA在蛋白水平检测SLC表达,Transwell检测转染DC的培养上清对T细胞的趋化作用。瘤苗的在体效应通过C57BL/6J小鼠肿瘤模型验证。皮下接种Hepal6肿瘤细胞后成瘤小鼠分成3组:①生理盐水对照组,瘤内或足垫注射NS;②单纯DC对照组,瘤内或足垫注射未修饰DC;③SLC基因修饰DC组,瘤内或足垫注射SLC基因修饰的DC。每隔7天注射1次,观察各组小鼠肿瘤的生长情况。4周后分离瘤体,用荧光免疫组化检测瘤体内CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润情况。结果:rAAVSLC在MOI为100时能成功转染DC,未成熟DC的转染效率显著高于成熟DC,并产生对T细胞有明显趋化生物学活性的SLC。动物实验表明,瘤内注射SLC修饰后DC,肿瘤大小与对照组有明显差异,免疫组化显示瘤体内有较多的CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润。足垫注射SLC修饰的DC与对照组相比,抗肿瘤作用无显著差异。结论:rAAVSLC在Ad2的辅助下能有效转染未成熟DC并能表达具有趋化生物学活性的SLC。SLC基因修饰的树突状细胞瘤内注射以其对CD4+T细胞、CD8+T细胞的吸引作用而发挥了明显的抗肿瘤作用,同时也进一步证实用树突状细胞进行肿瘤生物免疫治疗时,不同免疫方式对疗效有明显影响。 展开更多

关键词 重组腺相关病毒 骨髓来源树突状细胞 次级淋巴组织趋化因子

下载PDF 职称材料

CCL21/19-CCR7在肿瘤增殖、转移中的作用研究进展 被引量：2

15

作者 孔凡华 王鹏 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第34期111-112,共2页

关键词 次级淋巴组织趋化因子 趋化因子受体 淋巴结转移 树突状细胞

下载PDF 职称材料

次级淋巴组织趋化因子在溃疡性结肠炎中的表达及其意义 被引量：2

16

作者 高东锋 周国雄 +2 位作者 曹维 陈海琴 张海峰 《胃肠病学》 2015年第5期297-299,共3页

背景:次级淋巴组织趋化因子(SLC)参与淋巴归巢和抗肿瘤免疫应答,对肠道淋巴细胞有趋化作用。多项动物实验表明SLC参与了溃疡性结肠炎(UC)的发生、发展。目的:探讨SLC在UC患者中的表达及其意义。方法:纳入2010年12月-2012年12月南通大学... 背景:次级淋巴组织趋化因子(SLC)参与淋巴归巢和抗肿瘤免疫应答,对肠道淋巴细胞有趋化作用。多项动物实验表明SLC参与了溃疡性结肠炎(UC)的发生、发展。目的:探讨SLC在UC患者中的表达及其意义。方法:纳入2010年12月-2012年12月南通大学附属医院40例活动期UC患者,以20名健康志愿者作为正常对照,采用免疫组化法检测结肠组织SLC表达,并分析其与UC病情程度的关系。结果:UC组SLC均阳性表达,正常对照组呈阴性或弱阳性表达,UC组SLC表达显著高于正常对照组,差异有统计学意义(4.16±0.78对0.52±0.11,P<0.05)。UC病变程度越重,SLC表达阳性率越高。结论:SLC参与了UC的发生和发展,其可能在UC局部结肠组织破坏和病理变化中起重要作用。 展开更多

关键词 结肠炎 溃疡性 次级淋巴组织趋化因子 免疫组织化学

下载PDF 职称材料

溃疡性结肠炎患者结肠黏膜中SLC的表达变化 被引量：2

17

作者 季淦 张霞 +2 位作者 周国雄 张海峰 严正平 《南通大学学报（医学版）》 2016年第6期536-539,共4页

目的:研究溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者口服美沙拉嗪肠溶片治疗前后结肠黏膜组织中次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)的表达变化。方法:用免疫组化法检测40例UC活动期患者口服美沙拉嗪肠溶片... 目的:研究溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者口服美沙拉嗪肠溶片治疗前后结肠黏膜组织中次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)的表达变化。方法:用免疫组化法检测40例UC活动期患者口服美沙拉嗪肠溶片治疗前后及20例正常志愿者的乙状结肠黏膜中SLC的表达。结果:SLC在正常组中微弱表达或不表达,在UC中表达上调。美沙拉嗪治疗前组与正常组相比差异有统计学意义(P<0.01)。美沙拉嗪治疗后组与治疗前组相比SLC表达下调(P<0.01)。UC患者病变范围越小、病情越轻,美沙拉嗪治疗后SLC表达下调越明显(P<0.05)。结论:SLC参与了UC的结肠黏膜组织损伤,与病变程度、病情转归有相关性。美沙拉嗪肠溶片可明显下调SLC的表达。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 次级淋巴组织趋化因子 美沙拉嗪肠溶片

下载PDF 职称材料

雷公藤内酯醇抑制次级淋巴组织趋化因子表达对小鼠实验性结肠炎的影响 被引量：2

18

作者 张霞 周国雄 +2 位作者 张海峰 陈海琴 曹维 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第20期2893-2899,共7页

目的:研究实验性结肠炎小鼠中次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)的表达,了解不同浓度雷公藤内酯醇(triptolide,TL)抑制SLC表达对小鼠结肠炎的影响.方法:40只♀Balb/c小鼠随机分为5组:正常组、葡聚糖硫酸钠... 目的:研究实验性结肠炎小鼠中次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)的表达,了解不同浓度雷公藤内酯醇(triptolide,TL)抑制SLC表达对小鼠结肠炎的影响.方法:40只♀Balb/c小鼠随机分为5组:正常组、葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulphate,DSS)模型组、丙二醇治疗组、TL治疗组1、TL治疗组2.正常组小鼠饮用蒸馏水,其余小鼠饮用5%DSS溶液7 d,诱导建立实验性结肠炎模型以模拟人类溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC).治疗组从造模第3天开始,丙二醇治疗组给予2%丙二醇0.2 mL腹腔注射(ip),TL治疗组分别给予溶于2%丙二醇的TL 0.6 mg/kg、TL 0.8 mg/kg,qd,ip 5 d.第8天处死小鼠后检测结肠长度、结肠大体形态评分、结肠组织学病理评分,应用免疫组织化学、实时荧光定量PCR检测小鼠结肠组织中SLC表达.结果:SLC在小鼠正常组中微弱表达,在小鼠UC中表达上调,正常组与DSS组、丙二醇治疗组相比差异有统计学意义(P<0.01);丙二醇治疗组小鼠与DSS组相比,SLC表达无明显差异(P>0.05);TL治疗组小鼠症状减轻,SLC表达下调,与DSS组、丙二醇治疗组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论:SLC表达参与了UC的发生和发展,TL对小鼠实验性结肠炎的治疗效应与抑制SLC的表达有相关性. 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 次级淋巴组织趋化因子 雷公藤内酯醇

下载PDF 职称材料

人次级淋巴组织趋化因子腺病毒载体的构建和鉴定 被引量：2

19

作者 薛刚 程莹 +3 位作者 曹永宽 刘然义 田伏洲 黄文林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期2338-2340,共3页

目的构建携带人次级淋巴组织趋化因子的重组腺病毒载体(Ad-6Ckine),并观察其在真核细胞中的表达,为进一步的肿瘤基因治疗研究奠定基础。方法 RT-PCR法从人淋巴结中扩增出人次级淋巴组织趋化因子cDNA,利用AdMax腺病毒包装系统在细胞内同... 目的构建携带人次级淋巴组织趋化因子的重组腺病毒载体(Ad-6Ckine),并观察其在真核细胞中的表达,为进一步的肿瘤基因治疗研究奠定基础。方法 RT-PCR法从人淋巴结中扩增出人次级淋巴组织趋化因子cDNA,利用AdMax腺病毒包装系统在细胞内同源重组出Ad-6Ckine,然后用Ad-6Ckine感染真核细胞,观察6Ckine蛋白在真核细胞中的表达。结果成功构建了重组Ad-6Ckine,PCR法鉴定无野生型腺病毒的污染,构建的Ad-6Ckine所携带的6Ckine基因能在真核细胞中得到表达。结论 AdMax腺病毒包装系统是一种简便高效的重组腺病毒构建方法,构建的重组Ad-6Ckine可用于肿瘤基因治疗的体内外研究。 展开更多

关键词 肿瘤 次级淋巴组织趋化因子 基因治疗 腺病毒载体

下载PDF 职称材料

携带人6Ckine/IFNγ融合基因腺病毒载体的构建和鉴定 被引量：1

20

作者 薛刚 程莹 +3 位作者 曹永宽 刘然义 田伏洲 黄文林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期261-264,共4页

目的构建携带人次级淋巴组织趋化因子(6Ckine)和γ-干扰素(IFNγ)融合基因的重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,并在真核细胞中表达。方法RT-PCR法分别从人淋巴结和外周血单个核细胞中扩增人6Ckine cDNA和IFNγ cDNA,分两步先后将6Ckine c... 目的构建携带人次级淋巴组织趋化因子(6Ckine)和γ-干扰素(IFNγ)融合基因的重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,并在真核细胞中表达。方法RT-PCR法分别从人淋巴结和外周血单个核细胞中扩增人6Ckine cDNA和IFNγ cDNA,分两步先后将6Ckine cDNA和IFNγ cDNA连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,二者之间以XbaⅠ酶切位点相连,应用AdMax腺病毒包装系统在HEK293细胞内同源重组,构建重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,经扩增和纯化后感染真核细胞HepG2,并检测6Ckine/IFNγ融合蛋白的表达。结果所构建的重组腺病毒Ad-6Ckine/IFNγ经扩增和纯化后,滴度为1.26×1010IFU/ml。PCR法鉴定无野生型腺病毒的污染,所携带的6Ckine/IFNγ融合基因能在真核细胞中得到表达,表达形式为分泌型。结论已成功构建重组腺病毒载体Ad-6Ckine/IFNγ,并在真核细胞中表达,为进一步研究肿瘤的基因和免疫治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 次级淋巴组织趋化因子 Γ-干扰素 融合基因 腺病毒载体

下载PDF 职称材料