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基于FPN1探讨桦褐孔菌醇提物抗结肠癌的作用机制
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作者 王蔚 陈文娜 +5 位作者 王奡 王丹 丛培玮 张越时 郭胜男 张佳佳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第13期3224-3229,共6页
目的基于铁离子转运蛋白中膜铁转运蛋白(FPN)1研究桦褐孔菌(IO)醇提物抗结肠癌的作用机制。方法CCK-8法检测IO醇提物抗肿瘤活性,比色法检测Fe^(2+)浓度;应用数据库、免疫组化和Western印迹分析FPN1和二价金属转运蛋白(DMT)1在结肠癌中... 目的基于铁离子转运蛋白中膜铁转运蛋白(FPN)1研究桦褐孔菌(IO)醇提物抗结肠癌的作用机制。方法CCK-8法检测IO醇提物抗肿瘤活性,比色法检测Fe^(2+)浓度;应用数据库、免疫组化和Western印迹分析FPN1和二价金属转运蛋白(DMT)1在结肠癌中的分布情况;实时荧光-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测IO醇提物干预后FPN1和DMT1 mRNA及蛋白表达情况;过表达和沉默ht29结肠癌细胞的FPN1,IO醇提物干预后免疫荧光和Western印迹检测FPN1蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)分析活性氧(ROS)等因子水平。结果IO醇提物可降低结肠癌细胞活性,改变结肠癌细胞Fe^(2+)浓度;数据库挖掘、免疫组化和Western印迹检测出在结肠癌组织FPN1蛋白明显低表达,DMT1蛋白明显高表达(P<0.05)。IO醇提物作用后,FPN1 mRNA和蛋白表达较阴性对照组明显降低(P<0.05),而DMT1 mRNA及蛋白用药前后差异不显著(P>0.05)。过表达及沉默FPN1,加入IO醇提物后,细胞增殖能力明显下降(P<0.05),细胞内FPN1蛋白表达明显降低,铁调素(Hepcidin)、ROS浓度明显提高(P<0.05)。结论IO醇提物可有效抑制结肠癌细胞增殖,对FPN1有靶向性,可能成为治疗结肠癌的新药。 展开更多
关键词 膜铁转运蛋白(FPN)1 (io) 铁离子 结肠癌
原文传递
桦褐孔菌醇提物对胃癌侵袭迁移的影响及分子机制探讨 被引量:2
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作者 王蔚 乔羽 +3 位作者 周忠光 杨婧 刘旭 仲丽丽 《中国医学装备》 2020年第9期206-212,共7页
目的:研究桦褐孔菌(IO)醇提物(IO醇提物)对胃癌细胞BGC-823侵袭转移的影响,以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/AKT)通路在其中发挥的作用。方法:药物干预后用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测高剂量组、中剂量组、低剂量组和阴性对照组细胞的增殖情... 目的:研究桦褐孔菌(IO)醇提物(IO醇提物)对胃癌细胞BGC-823侵袭转移的影响,以及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/AKT)通路在其中发挥的作用。方法:药物干预后用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测高剂量组、中剂量组、低剂量组和阴性对照组细胞的增殖情况,划痕实验比较各组细胞的迁移能力,通过细胞迁移(Transwell)实验比较胃癌细胞BGC-823的侵袭能力,采用流式细胞术检测细胞的凋亡及细胞周期情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹方法(Westernblot)检测PI3K/AKT通路相关基因、蛋白的表达。观察关键蛋白、基因与IO醇提物抗胃癌的关系。结果:MTT法显示IO醇提物对人胃癌细胞系BGC-823细胞具有抑制作用,高剂量组抑制率为(88.67±2.82)%;流式细胞术观察细胞表明IO醇提物对胃癌BGC-823细胞的凋亡和细胞周期可产生影响,大量胃癌细胞停留于G0/G1期;细胞划痕和Transwell小室表明其对胃癌BGC-823细胞的迁移和侵袭具有抑制作用,细胞迁移和侵袭能力随IO醇提物浓度增高而减弱,侵袭力高剂量组为(40±2.2)%,阴性对照组为(80±3.5)%,其差异有统计学意义(F=166.164,P<0.05);RT-PCR显示抑癌基因PTEN增加,胃癌发生发展相关的mTORmRNA减少,高剂量组分别为(0.91±0.06)bp和(1.65±0.08)bp,阴性对照组分别为(0.64±0.08)bp和(2.38±0.13)bp,其差异有统计学意义(F=18.859,F=55.021;P<0.05);Westernblot法可见PI3K和p-AKT蛋白减少,高剂量组分别为(1.96±0.05)KD和(1.68±0.32)KD,而阴性对照组分别为(6.06±0.35)KD和(6.35±0.73)KD,IO醇提物与阴性对照组PI3K比较差异有统计学意义(F=799.507,F=59.018;P<0.05)。结论:IO醇提物对胃癌BGC-823细胞的迁移侵袭能力具有抑制作用,其发生机制可能与IO醇提物对PI3K/AKT通路有关。 展开更多
关键词 胃癌 (io) 侵袭 迁移 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/AKT)
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