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病程相关蛋白10在植物防御反应中的作用 被引量:14
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作者 温韵洁 何红卫 +2 位作者 黄群声 梁山 宾金华 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期585-592,共8页
文章对近几年来与病程相关蛋白10(PR-10)有关的基因的基本特征、在植物中的表达模式、核酸酶活性和抗菌活性PR-10在植物防御系统中的作用研究进展作了介绍。
关键词 病程相关蛋白10 表达模式 核酸酶活性 抗菌活性
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小麦返白系叶片核酸含量及核酸酶活性研究 被引量:8
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作者 杨莉 郭蔼光 汪沛洪 《西北农业学报》 CAS CSCD 2001年第2期32-35,共4页
测定了小麦返白系和对照矮变 1号的全卷叶、半卷叶和初展叶中核酸含量及核酸酶活性在返白过程的变化。结果表明 ,在返白过程中返白系各叶龄叶片 DNA和 RNA含量均不程度地降低 ,复绿时又迅速增高 ,其 DNA水解酶 ( DNase)和 RNA水解酶 ( R... 测定了小麦返白系和对照矮变 1号的全卷叶、半卷叶和初展叶中核酸含量及核酸酶活性在返白过程的变化。结果表明 ,在返白过程中返白系各叶龄叶片 DNA和 RNA含量均不程度地降低 ,复绿时又迅速增高 ,其 DNA水解酶 ( DNase)和 RNA水解酶 ( RNase)活性变化趋势与之相反 ,且叶片愈幼嫩变化幅度愈显著 ;分析显示 ,核酸含量的降低与核酸水解酶活性的升高有关 。 展开更多
关键词 小麦返白系 核酸酶活性 叶片白化
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小麦原生质体高效转化体系的建立 被引量:9
3
作者 刘鑫 魏学宁 +1 位作者 张学文 张增艳 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期117-124,共8页
植物原生质体广泛应用于植物基因功能研究中,包括瞬时基因表达、亚细胞定位、蛋白互作和蛋白活性分析等。当前,小麦基因的亚细胞定位和功能分析,大多利用模式植物拟南芥等异源的原生质体,易于造成研究结果的不准确。为避免这种情况,小... 植物原生质体广泛应用于植物基因功能研究中,包括瞬时基因表达、亚细胞定位、蛋白互作和蛋白活性分析等。当前,小麦基因的亚细胞定位和功能分析,大多利用模式植物拟南芥等异源的原生质体,易于造成研究结果的不准确。为避免这种情况,小麦原生质体制备及高效转化体系的建立与应用是必需的。在PEG介导的小麦原生质体转化过程中,原生质体分泌的核酸酶大量降解质粒DNA,转化效率的提高因此受到阻碍。为了建立小麦原生质体的高效转化体系,本文测试了抑制胞外核酸酶活性的因素和提高质粒DNA浓度等多个条件对转化效率的影响。结果表明,转化过程中加入双倍用量的质粒DNA进行转化,且始终保持低温环境(1℃)用以抑制核酸酶酶活性,可以使小麦原生质体的转化效率提高至85%。本文还将该系统成功地应用于2个小麦抗病相关蛋白的亚细胞定位研究,证明了该系统的高效性和实用性。该研究对未来相关研究有一定参考价值。 展开更多
关键词 小麦原生质体 核酸酶活性 原生质体转化效率 抗病相关基因 亚细胞定位
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蚯蚓体腔液抗病毒活性及其机制的研究 被引量:6
4
作者 刘志贞 康慧芳 +4 位作者 樊慧杰 李方 杨利军 牛勃 杨琦 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第6期1132-1134,共3页
[目的]以赤子爱胜蚓为原料,研究其体腔液的抗病毒活性及可能的机制,为新型抗病毒药物的开发提供思路。[方法]用分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法测定蚯蚓体腔液蛋白酶活性和核酸酶活性;用鸡胚培养检测其抗流感病毒的活性,乙型肝炎病毒表面... [目的]以赤子爱胜蚓为原料,研究其体腔液的抗病毒活性及可能的机制,为新型抗病毒药物的开发提供思路。[方法]用分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法测定蚯蚓体腔液蛋白酶活性和核酸酶活性;用鸡胚培养检测其抗流感病毒的活性,乙型肝炎病毒表面抗原及e抗原诊断试剂盒检测其对乙型肝炎病毒表面抗原及e抗原的破坏作用。[结果]蚯蚓体腔液具有蛋白酶活性、核酸酶活性和抗病毒活性;各种不同浓度的蚯蚓体腔液对流感病毒的增殖都有显著的抑制作用,且可以抑制乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原表达,呈浓度依赖关系。[结论]蚯蚓体腔液具有抗病毒活性,其可能机制是蛋白酶、核酸酶及各种活性成分单独和/或协同作用的结果。 展开更多
关键词 赤子爱胜蚓 蚯蚓体腔液 抗病毒活性 核酸酶活性 蛋白活性
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蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10纯化及生物学功能研究 被引量:7
5
作者 任晋宏 薛慧清 +5 位作者 刘晔 魏砚明 Divid Adelson 陈薛静 周静红 于建东 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期3662-3667,共6页
蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein 10,AmPR-10)在蒙古黄芪遭遇环境压力和病原体侵袭时大量表达,该研究旨在探讨AmPR-10的生物学功能。蒙古黄芪干燥根经机械粉碎后缓冲液浸提得到蒙古黄芪总... 蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein 10,AmPR-10)在蒙古黄芪遭遇环境压力和病原体侵袭时大量表达,该研究旨在探讨AmPR-10的生物学功能。蒙古黄芪干燥根经机械粉碎后缓冲液浸提得到蒙古黄芪总蛋白粗提液,总蛋白粗提液经阴离子交换色谱和凝胶过滤色谱纯化后得到电泳纯AmPR-10。以不同RNA为底物,通过检测260 nm吸光度分析核酸酶活性,结果显示AmPR-10对Yeast tRNA,Yeast RNA,Poly(A)和Poly(C)均表现核酸酶活性,且其最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为78,EDTA对其活性无影响,Mg^2+对其活性具有激活作用,Co^2+,Ca^2+和Zn^2+对其活性具有抑制作。AmPR-10与已知核酸酶无序列同源性,可能是一种新的核酸酶。采用Lineweaver-Burk双倒数作图法分析AmPR-10木瓜蛋白酶抑制活性,结果显示AmPR-10是木瓜蛋白酶的非竞争性抑制剂。AmPR-10可能通过抑制半胱氨酸酶活性在蒙古黄芪对抗环境压力和抵御病原体侵袭的过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 蒙古黄芪病程相关蛋白 核酸酶活性 木瓜蛋白抑制剂
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人、猪和鸡源SAMHD1蛋白的酶活性研究 被引量:4
6
作者 贺双意 孔佳 +2 位作者 王媚媚 米立志 秦晓红 《天津大学学报(自然科学与工程技术版)》 EI CSCD 北大核心 2018年第1期9-17,共9页
SAMHD1蛋白是一种天然免疫限制因子,利用其d NTP水解酶活性或核酸酶活性抑制病毒的复制,具有广谱抗病毒功能.利用生物信息学分析该蛋白家族序列保守性,并借助HPLC层析色谱分析与酶活性测定和酶标仪方法,对人源、猪源和鸡源三物种SAMHD1... SAMHD1蛋白是一种天然免疫限制因子,利用其d NTP水解酶活性或核酸酶活性抑制病毒的复制,具有广谱抗病毒功能.利用生物信息学分析该蛋白家族序列保守性,并借助HPLC层析色谱分析与酶活性测定和酶标仪方法,对人源、猪源和鸡源三物种SAMHD1蛋白的酶活性进行了比较.比对发现SAMHD1蛋白在活性空腔、变构位点及磷酸化位点等处序列上具有高度的保守性;而且发现猪源和鸡源SAMHD1蛋白同样具有d NTP水解酶和核酸酶活性;3种蛋白中,人源SAMHD1蛋白d NTP水解酶活性最高,猪源蛋白核酸酶活性最低.这一结果为研究SAMHD1蛋白家族的结构功能关系及为畜牧业优良品种的开发提供启示. 展开更多
关键词 SAMHD1 物种 蛋白表达与纯化 三磷酸水解活性 核酸酶活性
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新型冠状病毒非结构蛋白14的表达及酶活性分析
7
作者 陈双 徐婧雯 +3 位作者 丁开云 刘建生 彭小忠 刘红旗 《基础医学与临床》 2023年第1期51-58,共8页
目的获得纯度较高和有酶活性的新型冠状(新冠)病毒(SARS-CoV-2)非结构蛋白14(Nsp14)。方法根据大肠埃希氏菌(E.coli)的密码子偏好性,分析新冠病毒原始株基因nsp14的稀有密码子,并对其进行优化。将nsp14克隆至4个不同的表达载体并进行表... 目的获得纯度较高和有酶活性的新型冠状(新冠)病毒(SARS-CoV-2)非结构蛋白14(Nsp14)。方法根据大肠埃希氏菌(E.coli)的密码子偏好性,分析新冠病毒原始株基因nsp14的稀有密码子,并对其进行优化。将nsp14克隆至4个不同的表达载体并进行表达;通过对表达量和可溶性的比较分析,选择一个表达效果最好的重组表达质粒并优化表达条件;目的蛋白经谷胱甘肽亲和柱纯化后,用半胱氨酸家族蛋白酶(3C)切除融合标签,再分别利用谷胱甘肽亲和柱和分子筛柱纯化蛋白质。最后通过尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳对其活性进行鉴定。结果Nsp14的基因在大肠杆菌中表达存在较多的稀有密码子,其中部分稀有密码子呈现近距离分布和串联分布。pGEX6P1-GST-OPTI-Nsp14重组质粒在大肠杆菌中表达的可溶性效果最好,其最佳表达温度为30℃。经纯化后获得了较纯的不含标签的Nsp14,该蛋白具有核酸酶活性。结论本研究成功地表达和纯化出具有核酸酶活性的新冠病毒Nsp14,为进一步推进对新冠病毒Nsp14的结构和功能研究奠定了基础,为筛选靶向Nsp14的抗病毒治疗药物提供了有利的条件。 展开更多
关键词 新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 非结构蛋白14(Nsp14) 原核表达 蛋白质纯化 核酸酶活性
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同源蛋白序列比对探讨AmPR-10核酸酶活性机理 被引量:4
8
作者 王珏 胡丽丽 +2 位作者 李桂兰 吴娜 张育敏 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期48-52,共5页
蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)对黄芪生长发育及抗病机制有重要意义。研究检测出以大肠杆菌为宿主外源表达的AmPR-10具有核酸酶活性。将AmPR-10与其同源的7个已证明具有核酸... 蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)对黄芪生长发育及抗病机制有重要意义。研究检测出以大肠杆菌为宿主外源表达的AmPR-10具有核酸酶活性。将AmPR-10与其同源的7个已证明具有核酸酶活性的蛋白进行氨基酸序列比对,发现AmPR-10基因有4个高保守区段,分别是:14~24位、44~55位、64~70位及83~88位。其中第一段保守区与C-末端的α螺旋在空间上形成较强的疏水区以稳定蛋白空腔的结构,利于AmPR-10在抵御侵害时功能的发挥;另由分子对接和氨基酸单点突变发现第4段保守区的83位Tyr是AmPR-10具有核酸酶活性的关键位点,其突变会影响目标蛋白与底物结合的稳定性,而非保守区域140位Gly可作为基因进化的参考位点,当突变为Asn、Val及Trp时,AmPR-10与底物的结合自由能下降。以上结果对深入理解及优化AmPR-10的核酸酶活性具有理论指导意义。 展开更多
关键词 蒙古黄芪病程相关蛋白 同源蛋白 分子对接 核酸酶活性
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爪蟾卵提取物中凋亡特异核酸酶抑制物的鉴定 被引量:2
9
作者 卢智刚 杨巍 +3 位作者 曹圻 陶伟 胡建成 翟中和 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第11期926-930,共5页
细胞色素c加至非洲爪蟾(Xenopus laevis)卵提取物S-150中,能诱导外源细胞核发生凋亡.诱导过程中,爪蟾凋亡特异核酸酶XAD被激活,在核小体间切割染色质,形成DNA梯(ladder).实验表明,正常卵提... 细胞色素c加至非洲爪蟾(Xenopus laevis)卵提取物S-150中,能诱导外源细胞核发生凋亡.诱导过程中,爪蟾凋亡特异核酸酶XAD被激活,在核小体间切割染色质,形成DNA梯(ladder).实验表明,正常卵提取物中大量存在凋亡特异核酸酶XAD抑制因子IXAD,抑制XAD的核酸酶活性;IXAD分子量约40ku,正常状态下以二聚体形式或与XAD形成复合体存在;凋亡过程中IXAD被降解,导致XAD被释放激活.Western检测和交叉抑制实验显示IXAD与DFF45在结构与功能上可能同源.实验结果进一步证明凋亡途径在进化上的保守性. 展开更多
关键词 非洲爪蟾 细胞凋亡 IXAD DNA梯 核酸酶抑制物 核酸酶活性 卵提取物
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易错PCR定向进化技术提高蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10核酸酶活性的研究 被引量:1
10
作者 王珏 吴娜 +2 位作者 张育敏 闫海洋 胡丽丽 《化学与生物工程》 CAS 2022年第2期23-27,51,共6页
以分子伴侣skp修饰的蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)全基因为模板,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,以酵母tRNA为底物建立高通量筛选方法,获得了核酸酶活性提高的AmPR-1... 以分子伴侣skp修饰的蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)全基因为模板,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,以酵母tRNA为底物建立高通量筛选方法,获得了核酸酶活性提高的AmPR-10突变体。经一轮定向进化后,突变体A4的核酸酶活性比野生型提高45%;测序结果显示,突变体A4基因序列在465位增加了1个碱基A,进而由移码突变引起了多肽序列的提前终止,使得突变体A4 C末端缺失了3个氨基酸;从空间上看,AmPR-10基因的突变减小了其C末端α螺旋对空腔的遮蔽作用,有利于目的蛋白与配体或底物的结合。该研究结果对AmPR-10核酸酶活性机制的探讨具有重要意义,为抗病抗逆黄芪植株的培育奠定了理论基础。 展开更多
关键词 易错PCR 定向进化 AmPR-10 核酸酶活性
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Coordination chemistry mimics of nuclease-activity in the hydrolytic cleavage of phosphodiester bond 被引量:1
11
作者 GAOFei YINCaixia YANGPin 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第16期1667-1680,共14页
In vivo, there occurs the synthesis and degrada-tion of the nucleic acids, involving the formation and cleav-age of phosphodiester bond. The cleavage modes of phos-phodiester bond can be divided into two types, oxidat... In vivo, there occurs the synthesis and degrada-tion of the nucleic acids, involving the formation and cleav-age of phosphodiester bond. The cleavage modes of phos-phodiester bond can be divided into two types, oxidative and hydrolytic, only the hydrolytic products are sticky and con-nectable, allowing to be religated by ligases. In recent years, great progresses have been made in chemical mimics in the hydrolytic cleavage of phosphodiester bond. Among the found metal complexes with the activity of nucleic acid cleavage, there are mononuclear and dinuclear metal com-plexes, the adopted metal ions including transitional and lanthanide metal ions. However, the reaction rates are still several orders less than those of the natural enzymes. It should be a prosperous and expedient direction to mimic the hydrolytic cleavage of phosphodiester bond by taking the advantages of dinuclear metal complexes. 展开更多
关键词 磷酸二酯键 协调化学模拟 DNA假说 金属络合物 DNA开裂机理 核酸酶活性
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分枝结构特异性内切酶-1(FEN1)突变体N266D表达纯化及功能分析 被引量:1
12
作者 邱秀芹 史崔颖 +4 位作者 孙洪芳 王晓晓 杜佳慧 郭志刚 刘松柏 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期34-37,48,共5页
人源分枝结构特异性内切酶-1(Flap endonuclease 1,FEN1)作为DNA复制及DNA修复过程中重要的参与者,在维护基因组稳定和完整性方面具有不可替代的作用。尽管FEN1在很多肿瘤细胞中的表达都发生异常,但FEN1基因体细胞突变或遗传突变事件在... 人源分枝结构特异性内切酶-1(Flap endonuclease 1,FEN1)作为DNA复制及DNA修复过程中重要的参与者,在维护基因组稳定和完整性方面具有不可替代的作用。尽管FEN1在很多肿瘤细胞中的表达都发生异常,但FEN1基因体细胞突变或遗传突变事件在人体细胞中却很少发生,发表的文献报道较少。前期在白血病患者骨髓细胞中发现了FEN1基因的一种N266D杂合突变体,基于此,成功构建了FEN1-N266D在原核及真核中的表达重组质粒,纯化了原核FEN1-WT、FEN1-N266D蛋白;通过TAMRA标记的DNA底物,检测了FEN、GEN和EXO的3种酶活性,结果发现N266D突变体的FEN、GEN及EXO活性基本不变;RTCA方法检测发现N266D蛋白过表达使细胞增殖能力受到抑制。通过以上对FEN1突变体N266D蛋白的核酸酶活性及对细胞增殖能力影响的分析,为进一步探讨FEN1突变体N266D在肿瘤发生进展中的潜在功能奠定了基础。 展开更多
关键词 FEN1 基因突变体 核酸酶活性 细胞增殖
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钩端螺旋体毒性蛋白VapC核酸酶活性及其对宿主细胞毒性作用的研究 被引量:1
13
作者 辛晓阳 林旭瑷 +1 位作者 李立伟 严杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期166-171,共6页
目的了解钩端螺旋体毒素一抗毒素系统中毒性蛋白VapC的功能及其对宿主细胞的毒性作用。方法以致病性问号钩体黄疸出血群赖型赖株基因组DNA为模板,采用PCR扩增全长vapB、vapC、vapBC基因并构建其原核表达系统。采用SDS—PAGE检测目的重... 目的了解钩端螺旋体毒素一抗毒素系统中毒性蛋白VapC的功能及其对宿主细胞的毒性作用。方法以致病性问号钩体黄疸出血群赖型赖株基因组DNA为模板,采用PCR扩增全长vapB、vapC、vapBC基因并构建其原核表达系统。采用SDS—PAGE检测目的重组蛋白rYapB和rVapC表达情况,Ni-NTA亲和层析柱提纯rVapB和rVapC。检测rVapB和rVapC有无水解问号钩体赖株及THP.1细胞DNA或RNA活性。分别采用实时荧光定量PCR和Westernblot试验,检测问号钩体赖株感染THP.1细胞前后vapB和vapC基因转录及表达水平的变化。构建vapB和vapC基因真核表达载体并转染细胞,采用CCK-8试剂检测VapB和VapC蛋白对细胞活性的影响。结果所克隆的vapB和vapC基因核苷酸及氨基酸序列与文献报道完全相同。所构建的原核表达系统能分别表达rVapB和rVapC。rVapC可水解RNA,但不水解DNA。问号钩体赖株感染THP-1细胞后,vapB和vapC基因转录及表达水平均显著上调,部分毒性蛋白VapC外分泌。转染vapC基因的人肾小管上皮细胞HEK293大量死亡。结论问号钩体赖株VapC蛋白为RNA酶,可在感染宿主细胞过程中外分泌并对细胞有明显毒性。 展开更多
关键词 致病性钩端螺旋体 毒素-抗毒素系统 毒性蛋白 核酸酶活性 细胞毒性
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肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性测定
14
作者 田文静 廖成水 +2 位作者 李琦 毛福超 程相朝 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期5-10,共6页
为研究肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,同时利用琼脂糖凝胶电泳法探究温度、pH、金属离子对核酸酶活性的影响。结果显示,肠炎沙门菌胞外分... 为研究肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,同时利用琼脂糖凝胶电泳法探究温度、pH、金属离子对核酸酶活性的影响。结果显示,肠炎沙门菌胞外分泌蛋白表现出降解λDNA的核酸酶活性,且最适温度和pH分别是37℃和9.0,在低温和酸性条件的反应环境时核酸酶的活性较弱,胞外核酸酶对60℃以上的耐受性较差。不同浓度的Na^(+)和K^(+)对胞外分泌蛋白的核酸酶活性没有影响;当Ca^(2+)浓度超过0.01 mmol/L对胞外核酸酶活性有抑制作用;Zn^(2+)、Mn^(2+)和Ni^(2+)在低浓度时(0.01~1 mmol/L)以及Mg^(2+)、Cu^(2+)、Ba^(2+)、Fe^(3+)和Co^(2+)在高浓度时(5~10 mmol/L)均能促进胞外分泌蛋白的核酸酶活性。本试验证实了肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,为今后进一步探索胞外分泌蛋白在肠炎沙门菌和宿主互作中的作用提供了科学依据。 展开更多
关键词 胞外蛋白 肠炎沙门菌 核酸酶活性
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核酸酶活性与甜菜杂种优势及产质量关系研究
15
作者 张家骅 林树森 邵金旺 《中国甜菜》 1995年第2期13-17,共5页
通过对3个典型杂交组合的核改酶活性与杂种优势及产质量关系分析结果表明,甜菜6叶期杂种1代核酸酶(RNase)活性在各组合内呈负优势,均低于双亲平均值,与双亲问差异达显著水平,与根产量和产糖量呈显著负相关,因而该期的核... 通过对3个典型杂交组合的核改酶活性与杂种优势及产质量关系分析结果表明,甜菜6叶期杂种1代核酸酶(RNase)活性在各组合内呈负优势,均低于双亲平均值,与双亲问差异达显著水平,与根产量和产糖量呈显著负相关,因而该期的核糖核酸酶活性可作为入选优势杂种参考生理指标。 展开更多
关键词 甜菜 杂种优势 核酸酶活性
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螺旋藻胞外和胞内核酸酶活性研究 被引量:6
16
作者 王高歌 杨官品 +2 位作者 茅云翔 张宝红 张学成 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第6期883-888,共6页
通过分析比较 2个螺旋藻物种 7个品系胞外和胞内核酸酶活性 ,确定了抑制胞外和胞内核酸酶活性的方法。用液体培养基清洗两次可消除胞外核酸酶活性 ,添加 EDTA(2 m mol L-1)可显著地抑制胞内核酸酶活性。高温 (6 5℃ )
关键词 螺旋藻 胞外核酸酶活性 胞内核酸酶活性 EDTA
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K型小麦雄性不育系育性敏感时期核糖核酸酶活性及可溶性蛋白质含量的变化 被引量:6
17
作者 龚宏伟 马翎健 +3 位作者 何蓓如 范春燕 武涵 李薇 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期31-34,共4页
为了探讨核糖核酸酯及可溶性蛋白质与小麦育性的关系,以1B/1R类和非1B/1R类K型小麦雄性不育系及保持系为材料,对花粉发育过程中倒二叶和花药中核糖核酸酶活性、可溶性蛋白质含量进行了研究。结果表明,不育系花药中核糖核酸酶活性在二核... 为了探讨核糖核酸酯及可溶性蛋白质与小麦育性的关系,以1B/1R类和非1B/1R类K型小麦雄性不育系及保持系为材料,对花粉发育过程中倒二叶和花药中核糖核酸酶活性、可溶性蛋白质含量进行了研究。结果表明,不育系花药中核糖核酸酶活性在二核期之前显著高于保持系,呈上升趋势,二核期以后急剧下降,不育系花药中可溶性蛋白质含量在二核期显著下降,明显低于保持系。不育系叶片中的核糖核酸酶活性与相应的保持系差异显著,不育系和保持系叶片中可溶性蛋白质含量在整个生育期变化没有花药中可溶性蛋白质含量变化明显。两类不育系间核糖核酸酶活性和蛋白质含量差异显著。由此说明,不育系雄蕊的核糖核酸酶活性异常升高致使可溶性蛋白质含量显著下降,导致细胞生理代谢紊乱,可能是花粉败育的重要原因,而不育系花粉败育的关键时期可能是二核期。 展开更多
关键词 小麦 雄性不育系 核糖核酸酶活性 可溶性蛋白质含量
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抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究 被引量:7
18
作者 柯珍恋 徐虹 章军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期34-37,共4页
螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物 ,通过多种方法处理螺旋藻细胞 ,然后检测其胞内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用 ,结果表明 ,2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg2 +螺... 螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。以供体质粒pEUTISI为酶消化底物 ,通过多种方法处理螺旋藻细胞 ,然后检测其胞内核酸酶粗提液对pEUTISI的降解作用 ,结果表明 ,2mmol/L以上的EDTA处理16h或无Mg2 +螺旋藻培养基培养72h以上 ,都可使处于对数生长期的螺旋藻胞内核酸酶活性显著降低 ;低于28℃(如24℃)培养也可降低螺旋藻的胞内核酸酶活性。根据实验结果 ,建议在螺旋藻转化前72h开始低温、无Mg2 +培养 ,转化前16h提高培养基中EDTA的浓度至2mmol/L,就能获得胞内核酸酶活性极低的受体藻 ,有利于外源基因的转化。 展开更多
关键词 抑制 螺旋藻 胞内核酸酶活性 低温培养 EDTA处理 无Mg^2+培养 基因转化
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黄芪中一种新的PR-10蛋白的纯化和性质 被引量:6
19
作者 齐笑玮 闫巧娟 +1 位作者 江正强 邓伟 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期15-18,共4页
为了进一步研究蒙古黄芪(Astragalus mongholicusBunge)中的蛋白质及其功能,通过金属离子螯合层析、离子交换层析和凝胶过滤得到一种新蛋白(AmPR-10),并对其部分性质进行了研究。AmPR-10在SDS-PAGE上的分子质量为17.2 ku,凝胶过滤层析... 为了进一步研究蒙古黄芪(Astragalus mongholicusBunge)中的蛋白质及其功能,通过金属离子螯合层析、离子交换层析和凝胶过滤得到一种新蛋白(AmPR-10),并对其部分性质进行了研究。AmPR-10在SDS-PAGE上的分子质量为17.2 ku,凝胶过滤层析测得分子质量为32.6 ku,说明其为同源二聚体。糖蛋白染色显示为糖蛋白,总糖含量为13.7%,离子交换色谱法分析其中含有73%阿拉伯糖、15%葡萄糖、微量的果糖和一种未知糖;N-端序列分析结果显示其与病程相关蛋白家族PR-10中黄羽扇豆L1PR-10.1C同源性高达80%。同时,AmPR-10具有核糖核酸酶活性,纯AmPR-10的核糖核酸酶比活性为74.11 U/mg,这点与一些PR-10蛋白类似。 展开更多
关键词 蒙古黄芪 病程相关蛋白PR-10 纯化 核糖核酸酶活性
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苹果梨树花芽分化期核糖核酸酶(RNase)活性变化的研究 被引量:2
20
作者 张建华 李秉真 孙庆林 《内蒙古农牧学院学报》 1999年第1期114-116,共3页
本文分析了苹果梨树短、长枝叶片在花芽分化期核糖核酸酶活性的变化规律。结果表明:核糖核酸酶活性在花芽分化前期逐渐增高并达到最大值,生理分化期逐渐下降,进入形态分化期后开始上升,到花原基大量分化时出现一个峰值。指出核糖核... 本文分析了苹果梨树短、长枝叶片在花芽分化期核糖核酸酶活性的变化规律。结果表明:核糖核酸酶活性在花芽分化前期逐渐增高并达到最大值,生理分化期逐渐下降,进入形态分化期后开始上升,到花原基大量分化时出现一个峰值。指出核糖核酸酶活性在花芽分化期起了一定的促进作用。为进一步探讨遗传物质对果树花芽分化的作用及二者的关系研究提供参考数据。 展开更多
关键词 苹果梨树 核糖核酸酶活性 花芽分化 RNASE
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