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核酸薄膜导流杂交技术快速检测结核分支杆菌rpoB基因片段及突变 被引量:1
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作者 甘辛 刘波 +5 位作者 陈玲 刘梅 王建华 李娜娜 张建勇 张泓 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期164-167,共4页
目的探讨用低密度核苷酸薄膜导流杂交技术快速检测结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的可行性。方法根据MTB rpoB基因设计12个野生型及常见突变型寡核苷酸特异探针,制作低密度核苷酸薄膜微阵列,通过导流杂交技术与薄膜杂交... 目的探讨用低密度核苷酸薄膜导流杂交技术快速检测结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的可行性。方法根据MTB rpoB基因设计12个野生型及常见突变型寡核苷酸特异探针,制作低密度核苷酸薄膜微阵列,通过导流杂交技术与薄膜杂交鉴定,并与DNA测序法对比。结果 81株MTB的耐药性试验及DNA测序结果显示,27株耐利福平MTB株中20株(74.1%)存在突变。以DNA测序结果为标准,31株标本(20株耐利福平MTB突变株,11株利福平敏感MTB野生株)低密度核苷酸薄膜导流杂交的敏感性为85%(17/20),特异性为100%(11/11),阳性预测值为100%(17/17),阴性预测值为78.6%(11/14);与DNA测序法的符合率为90.3%(28/31)。结论用低密度核苷酸薄膜导流杂交能快速、简便检测MTB,并可提示其是否对利福平耐药,指导临床合理用药。 展开更多
关键词 核酸薄膜 结核分支杆菌 利福平 RPOB基因 突变
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核酸薄膜技术快速检测结核分枝杆菌katG突变的研究
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作者 宗兆婧 刘梅 +5 位作者 陈杨 王建华 李娜娜 张建勇 张泓 陈玲 《中国实验诊断学》 2012年第10期1809-1812,共4页
目的研制一种新的核苷酸薄膜,通过导流杂交技术检测结核分枝杆菌katG基因突变类型,以快速判断结核分枝杆菌对异烟肼的耐受性,寻找一种快速简便检测耐异烟肼结核病的方法。方法根据结核分枝杆菌katG基因序列设计1个野生型及2个常见突变... 目的研制一种新的核苷酸薄膜,通过导流杂交技术检测结核分枝杆菌katG基因突变类型,以快速判断结核分枝杆菌对异烟肼的耐受性,寻找一种快速简便检测耐异烟肼结核病的方法。方法根据结核分枝杆菌katG基因序列设计1个野生型及2个常见突变型寡核苷酸特异探针,探针5’末端连接亚甲基(-CH2)。同时设计1个人类基因组探针以及1个生物素探针。制作低密度核苷酸薄膜微阵距列,通过导流杂交技术进行杂交,将杂交结果与DNA测序法对照。结果核酸测序显示,突变位点分别出现在包括315位点在内的7个位点,315位点突变占75.0%(18/24),最常见突变形式为AGC315ACC所致Ser315Thr氨基酸改变。杂交结果与测序结果符合率为93.9%(31/33),与DNA测序相比,其阳性预测值、阴性预测值、敏感度、特异度分别为90.0%、100%、100%、86.7%。结论核酸薄膜导流杂交技术能快速、简便、高效地检测临床标本中有无结核分枝杆菌,并可提示结核分枝杆菌有无异烟肼耐药性,指导临床用药。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 KATG基因 异烟肼 核酸薄膜 导流杂交
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