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基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片技术同时定量反义寡核苷酸药物原型及其代谢物方法的初步建立 被引量：1
1
作者 刘潜 孙云娟 +1 位作者 付洁 宋海峰 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 2014年第1期118-124,共7页
目的 利用悬浮芯片技术，建立基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片技术对反义寡核苷酸药物原型及其代谢产物同时定量的分析方法。方法 本研究在确证探针与微球偶联的基础上，考察生物基质效应、偶联微球浓度、检测探针浓度、S1核酸酶用... 目的 利用悬浮芯片技术，建立基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片技术对反义寡核苷酸药物原型及其代谢产物同时定量的分析方法。方法 本研究在确证探针与微球偶联的基础上，考察生物基质效应、偶联微球浓度、检测探针浓度、S1核酸酶用量以及荧光显色液浓度等因素对方法定量的影响。最终在同一生物样品中对反义寡核苷酸原型及其代谢产物进行同时定量分析。结果 通过考察生物基质效应，确定稀释10倍的PBS作为条件优化及样品定量分析的生物学基质；微球浓度为150个/μl，检测探针浓度为400 nmol/L，S1核酸酶用量为1 U/孔，荧光显色液浓度为1 μg/ml。在猕猴血浆基质中该方法针对原型与代谢产物序列的定量范围均为7.81～2000 nmol/L。在同时含有低浓度（20 nmol/L）和高浓度（1500 nmol/L）AI-ON1原型（Ai）与AI-ON1缩短代谢产物（Am）的混合血浆样品中，该方法可同时特异性地定量分析Ai与Am。结论 本研究成功建立基于核酸杂交-酶联桥接的悬浮芯片定量分析方法，可在微量生物样品中实现对反义寡核苷酸药物原型及其代谢产物的同时定量分析。 展开更多
关键词 悬浮芯片技术 核酸杂交-酶联桥接系统 反义寡核苷酸药物 药代动力学
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