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HCMV UL97 mRNA序列特异性M1GS的构建及其体外切割活性研究(英文) 被引量：1
1
作者 张文军 李弘剑 +4 位作者 李月琴 何华坤 唐冬生 张欣 周天鸿 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1205-1212,共8页
HCMVUL97基因编码一种蛋白激酶,该酶参与调控病毒DNA的复制和衣壳的形成,且序列异常保守,可作为抗HCMV治疗的重要靶位。基于HCMVUL97mRNAT3位点附近的序列,设计一段与该位点互补的引导序列(GuideSequence,GS),并将其与大肠杆菌核酶P催... HCMVUL97基因编码一种蛋白激酶,该酶参与调控病毒DNA的复制和衣壳的形成,且序列异常保守,可作为抗HCMV治疗的重要靶位。基于HCMVUL97mRNAT3位点附近的序列,设计一段与该位点互补的引导序列(GuideSequence,GS),并将其与大肠杆菌核酶P催化亚基(M1RNA)的3′末端共价连接,构建了一种序列特异性的M1GS(M1-T3)。体外实验证实,所构建的M1-T3可与UL97mRNA的T3位点特异性结合并产生有效的切割作用。进一步研究M1-T3的结构与其对底物片段靶向切割活性的关系,结果发现在M1RNA与GS之间增加一段88核苷酸桥连序列的M1-T3(即M1-T3*),其靶向切割活性大大增强。此外,去除M1-T33′末端的CCA序列,其靶向切割活性将基本丧失。上述结果表明,这段桥连序列和3′末端的CCA序列是M1-T3重要的结构元件。这不仅有助于阐明M1GS与其底物的相互作用机制,同时也为进一步评价M1-T3在体内对UL97基因表达及病毒复制的抑制活性奠定了基础。 展开更多
关键词 核酶p(rnase p) M1GS 人巨细胞病毒 UL97
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