核转运蛋白α-2在肝细胞癌中的表达及临床意义

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作者 刘晓红 李紫荆 +5 位作者 谭程鹏 冯哲 覃志翔 杨海 李自强 李锟 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第10期1848-1852,共5页

目的探讨核转运蛋白α-2(KPNA2)在肝细胞癌中的表达与预后意义及其在肿瘤免疫中的重要作用。方法分别从多平台数据库中下载肝细胞癌数据,通过R语言进行数据整理和筛选,用Wilcoxon-test进行表达差异分析,Kruskal-test和Cox回归模型进行... 目的探讨核转运蛋白α-2(KPNA2)在肝细胞癌中的表达与预后意义及其在肿瘤免疫中的重要作用。方法分别从多平台数据库中下载肝细胞癌数据,通过R语言进行数据整理和筛选,用Wilcoxon-test进行表达差异分析,Kruskal-test和Cox回归模型进行临床差异与预后分析,最后用ssGSEA和Cibersot算法进行免疫细胞浸润与免疫功能相关研究。结果KPNA2在11个肝细胞癌样本组织中的表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01),其高表达与肝细胞癌患者不良预后及肿瘤分期等密切相关[风险比(HR)>1,P<0.05)。KPNA2还可影响肝细胞癌中的抗原提呈与白细胞介素反应等免疫功能(P<0.01),并与包括B细胞,CD4^(+)T细胞等在内的10种免疫细胞的浸润水平明显相关(P<0.05)。结论KPNA2可促进肝细胞癌发生发展,并能作为肝细胞癌的独立预后因子,同时其通过调节免疫细胞浸润可影响肿瘤微环境。 展开更多

关键词 核转运蛋白α-2 肝细胞癌 预后 免疫 生物信息学

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基于血清HE4、PLR、RLX、KPNA2构建晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型的临床研究

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作者 沈晨 王轶 +1 位作者 郑翠 杨军 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第3期295-300,共6页

目的探讨基于血清人附睾蛋白4(HE4)、血小板计数/淋巴细胞计数比值(PLR)、血清松弛素(RLX)、核转运蛋白α2(KPNA2)构建晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型。方法选取2016年1月至2019年1月苏州市立医院(东区)诊治的124例晚期卵巢上皮... 目的探讨基于血清人附睾蛋白4(HE4)、血小板计数/淋巴细胞计数比值(PLR)、血清松弛素(RLX)、核转运蛋白α2(KPNA2)构建晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型。方法选取2016年1月至2019年1月苏州市立医院(东区)诊治的124例晚期卵巢上皮性癌患者作为研究对象,根据晚期卵巢上皮性癌患者是否复发分为复发组和无复发组。HE4水平采用电化学发光免疫分析法检测,根据血常规结果计算PLR,酶联免疫吸附试验检测RLX、KPNA2水平。晚期卵巢上皮性癌患者术后复发的影响因素采用多因素Logistic回归分析,并建立晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型的预测效能,利用Hosmer-Lemeshow检验分析患者晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型的拟合度。结果复发组与无复发组在肿瘤国际妇产科联盟(FIGO)分期及血清糖类抗原125、HE4、PLR、RLX、KPNA2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤FIGO分期Ⅳ期及血清HE4、PLR、RLX、KPNA2升高是晚期卵巢上皮性癌患者术后复发的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型的曲线下面积为0.859,均明显高于HE4、PLR、RLX、KPNA2单一指标检测。通过Hosmer-Lemeshow检验分析,晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型有较好的拟合度(χ^(2)=7.869,P=0.437)。结论基于血清HE4、PLR、RLX、KPNA2及肿瘤FIGO分期构建的晚期卵巢上皮性癌术后复发风险预测模型对于评估患者晚期卵巢上皮性癌术后复发具有较高的预测价值,值得临床关注。 展开更多

关键词 晚期卵巢上皮性癌 人附睾蛋白4 血小板计数/淋巴细胞计数比值 松弛素 核转运蛋白α2

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CircBACH1调节miR-101-3p/KPNA2轴对骨肉瘤细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

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作者 张立喜 杨健 史博 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第22期4254-4261,共8页

目的:探究环状RNA BACH1(circBACH1)靶向微小RNA-101-3p(miR-101-3p)/核转运蛋白α2(KPNA2)轴对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:qRT-PCR法分析OS组织中circBACH1和miR-101-3p表达水平。双荧光素酶检测circBACH1和miR-101-3... 目的:探究环状RNA BACH1(circBACH1)靶向微小RNA-101-3p(miR-101-3p)/核转运蛋白α2(KPNA2)轴对骨肉瘤(OS)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:qRT-PCR法分析OS组织中circBACH1和miR-101-3p表达水平。双荧光素酶检测circBACH1和miR-101-3p及KPNA2和miR-101-3p的靶向关系。在OS细胞MG-63中转染相应质粒记为si-NC组、si-circBACH1组、si-circBACH1+anti-NC组、si-circBACH1+anti-miR-101-3p组、miR-NC组、miR-101-3p mimics组、miR-101-3p mimics+pcDNA组、miR-101-3p mimics+KPNA2组。平板克隆检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭能力。Western blot法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、裂解的胱天蛋白酶-3(C-caspase-3)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达变化。小鼠移植瘤实验验证circBACH1对OS肿瘤生长及miR-101-3p/KPNA2的影响。结果:在OS组织中,circBACH1表达上调,miR-101-3p表达下调(P<0.05)。抑制circBACH1表达,可显著抑制OS细胞增殖与侵袭,诱导凋亡(P<0.05)。抑制miR-101-3p表达可促进OS细胞增殖与侵袭,抑制细胞凋亡(P<0.05)。miR-101-3p过表达可下调KPNA2表达,抑制OS细胞增殖与侵袭,诱导凋亡(P<0.05)。KPNA2过表达可以逆转过表达miR-101-3p对OS细胞增殖与侵袭的抑制作用(P<0.05)。小鼠移植瘤实验结果显示,抑制circBACH1表达,移植瘤体积及质量降低,miR-101-3p表达水平升高,KPNA2表达水平降低(P<0.05)。结论:circBACH1在OS组织中高表达,抑制circBACH1表达,可抑制OS细胞增殖与侵袭,诱导凋亡,其与调节miR-101-3p/KPNA2轴有关。 展开更多

关键词 环状RNA BACH1 微小RNA-101-3p 核转运蛋白karyopherinα2 骨肉瘤 增殖 凋亡 侵袭

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KPNA2与上皮性卵巢癌关系的研究进展 被引量：3

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作者 周赢 韩旭 《医学综述》 2020年第16期3216-3220,共5页

核转运蛋白α2(KPNA2)是核转运蛋白家族的重要成员之一,参与了多种生命活动,与多种肿瘤相关蛋白相互作用,在细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、DNA修复等细胞活动中发挥重要作用。卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤,其中上皮性卵巢癌占大部分... 核转运蛋白α2(KPNA2)是核转运蛋白家族的重要成员之一,参与了多种生命活动,与多种肿瘤相关蛋白相互作用,在细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、DNA修复等细胞活动中发挥重要作用。卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤,其中上皮性卵巢癌占大部分,探究KPNA2与上皮性卵巢癌的关系,可以帮助早期诊断卵巢癌,研究KPNA2在上皮性卵巢癌细胞增殖迁移的机制,预测卵巢癌患者的预后,敲减KPNA2基因,可以提高卵巢癌细胞对顺铂化疗的敏感性,从而有效抑制肿瘤细胞增殖、促进其凋亡,改善患者的预后,延长生存期。 展开更多

关键词 卵巢癌 核转运蛋白α2 诊断 治疗 预后

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核转运蛋白α2在胶质瘤中的表达及对其生物学行为的影响 被引量：3

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作者 李杰 何东 +4 位作者 张睿 杨帆 冯少滨 杨依航 辛涛 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2018年第12期47-54,78,共9页

目的探讨核转运蛋白α2(KPNA2)在胶质瘤中的表达与临床意义以及KPNA2对胶质瘤细胞生物学活性的影响。方法收集脑星形胶质细胞瘤Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级各30例,癌周相对正常脑组织15例,qRT-PCR及免疫组化分析KPNA2的表达;制备KPNA2干扰质粒,并以慢... 目的探讨核转运蛋白α2(KPNA2)在胶质瘤中的表达与临床意义以及KPNA2对胶质瘤细胞生物学活性的影响。方法收集脑星形胶质细胞瘤Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级各30例,癌周相对正常脑组织15例,qRT-PCR及免疫组化分析KPNA2的表达;制备KPNA2干扰质粒,并以慢病毒为载体转染进入胶质瘤细胞系U87、U251,CCK8、Ed U法检测KPNA2敲除后对细胞增殖的影响,Transwell小室法检测KPNA2对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响。结果KPAN2在胶质瘤中表达升高,表达量与胶质瘤WHO分级呈正相关(rs=0.559,P<0.001),与患者预后呈负相关(总生存率:χ~2=21.39,P<0.001;无进展生存率:χ~2=8.057,P=0.004)。KPNA2敲除后胶质瘤细胞系的增殖、迁移和侵袭能力均明显减弱。结论 KPNA2在胶质瘤的发生发展中具有重要作用,可能成为新的临床诊治的标记物和治疗靶点。 展开更多

关键词 核转运蛋白α2 胶质瘤 临床病理特征 预后 细胞增殖

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KPNA2在三阴性乳腺癌中的表达特点及其与患者远期预后的关系 被引量：4

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作者 彭星华 王芳 +2 位作者 史帅 秦晓辉 霍艳兵 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期748-752,共5页

背景与目的:探讨核转运蛋白karyopherin α2(KPNA2)在三阴性乳腺癌患者中的表达特点与患者远期预后的关系。方法:选取2017年1月—2020年2月我院保存的三阴性乳腺癌标本60例以及非三阴性乳腺癌标本59例,同时选取正常乳腺组织50例作为对... 背景与目的:探讨核转运蛋白karyopherin α2(KPNA2)在三阴性乳腺癌患者中的表达特点与患者远期预后的关系。方法:选取2017年1月—2020年2月我院保存的三阴性乳腺癌标本60例以及非三阴性乳腺癌标本59例,同时选取正常乳腺组织50例作为对照。采用免疫组化染色法检测KPNA2表达,随访三阴性乳腺癌预后。结果:三阴性乳腺癌组织KPNA阳性表达率明显高于正常乳腺组织(68.33% vs.22.00%,P<0.05);在三阴性乳腺癌组织中,中低分化、有淋巴结转移组织KPNA2阳性表达率明显高于高分化、无淋巴结转移组织(82.05% vs.42.86%和93.10% vs.45.16%,P<0.05);KPNA2阳性和阴性表达的三阴性乳腺癌患者血清CA125、CEA比较差异无统计学意义(P>0.05);在三阴性乳腺癌患者中,KPNA2阳性表达患者中位生存总时间明显短于KPNA2阴性表达者(23个月 vs.31个月,P<0.05);COX比例风险回归分析结果显示:TNM分期、分化程度、淋巴结转移及KPNA2表达是预后的影响因素(RR=1.863、1.650、1.706和1.508,P<0.05)。结论:三阴性乳腺癌患者KPNA2表达与分化程度、淋巴结转移有一定关系,且与患者预后有关。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤/病理学 核转运蛋白karyopherinα2 三阴性乳腺癌 预后

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KPNA2与膀胱癌关系的研究进展

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作者 闫璋哲 李增军 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第8期1554-1558,共5页

核转运蛋白α2(KPNA2)是核转运蛋白家族的重要成员之一,参与了多种生命活动,与多种肿瘤相关蛋白相互作用,在细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、DNA修复等细胞活动中发挥重要作用。膀胱癌是常见的恶性肿瘤,探究KPNA2与膀胱癌的关系,可... 核转运蛋白α2(KPNA2)是核转运蛋白家族的重要成员之一,参与了多种生命活动,与多种肿瘤相关蛋白相互作用,在细胞周期调控、转录调控、细胞凋亡、DNA修复等细胞活动中发挥重要作用。膀胱癌是常见的恶性肿瘤,探究KPNA2与膀胱癌的关系,可以帮助早期诊断膀胱癌,研究KPNA2在膀胱癌细胞增殖迁移中的机制,预测膀胱癌患者的预后,敲减KPNA2基因,可能可以提高膀胱癌细胞对顺铂化疗的敏感性,从而有效抑制肿瘤细胞增殖、促进其凋亡,改善患者的预后,延长生存期。 展开更多

关键词 膀胱癌 核转运蛋白α2 诊断 治疗 预后

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核转运蛋白α2和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C在肝细胞癌组织中的表达及相关性

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作者 杨云锋 董丽娜 +2 位作者 栗凤霞 张瑜 王俊平 《中国医药》 2023年第4期542-545,共4页

目的研究核转运蛋白α2(KPNA2)和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)在肝细胞癌组织中的表达及相关性。方法回顾性收集山西省人民医院2012年9月至2015年10月手术切除的肝细胞癌石蜡包埋组织标本100例,另选取20例癌旁组织石蜡包埋标本... 目的研究核转运蛋白α2(KPNA2)和细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(CDC25C)在肝细胞癌组织中的表达及相关性。方法回顾性收集山西省人民医院2012年9月至2015年10月手术切除的肝细胞癌石蜡包埋组织标本100例,另选取20例癌旁组织石蜡包埋标本。采用免疫组织化学染色检测肝细胞癌和癌旁组织中KPNA2和CDC25C的表达情况,采用Pearson相关性方法分析KPNA2和CDC25C表达的相关性,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。结果肝细胞癌组织中KPNA2、CDC25C高表达率均高于癌旁组织(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,KPNA2与CDC25C的表达呈正相关(r=0.317,P=0.002)。将患者分为KPNA2高表达组(53例)和低表达组(47例),CDC25C高表达组(65例)和低表达组(35例)。KPNA2高表达组和CDC25C高表达组甲胎蛋白>400μg/L、肿瘤直径>5 cm比例均高于相应的低表达组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,KPNA2高表达组和CDC25C高表达组总生存率均低于相应的低表达组(Log-rankχ^(2)=3.887、10.339,P=0.049、0.001)。结论肝细胞癌组织中KPNA2、CDC25C表达增加,且二者表达呈正相关。KPNA2、CDC25C高表达患者总生存率较低。 展开更多

关键词 肝细胞癌 核转运蛋白α2 细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C

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核转运蛋白α2基因沉默对黑色素瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

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作者 顾家徐 周欣悦 +1 位作者 柯国琳 袁涛 《实用临床医药杂志》 CAS 2023年第4期97-103,共7页

目的 基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库探讨核转运蛋白α2(KPNA2)在黑色素瘤中的表达及KPNA2基因沉默后对黑色素瘤细胞增殖、侵袭的影响。方法 通过TCGA数据库检索黑色素瘤组织中KPNA2 mRNA表达水平及其与患者预后的关系,分析黑色素瘤中K... 目的 基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库探讨核转运蛋白α2(KPNA2)在黑色素瘤中的表达及KPNA2基因沉默后对黑色素瘤细胞增殖、侵袭的影响。方法 通过TCGA数据库检索黑色素瘤组织中KPNA2 mRNA表达水平及其与患者预后的关系,分析黑色素瘤中KPNA2的共表达基因并对基因进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。检测黑色素瘤细胞系中KPNA2表达水平,选择KPNA2高表达细胞系A375,瞬时转染小干扰RNA敲低KPNA2的表达。采用CCK-8法、Transwell实验和蛋白印迹法(Western blot)分析KPNA2基因沉默对黑色素瘤细胞系A375增殖、侵袭能力和磷酸化P53(p-P53)蛋白表达水平的影响。结果 黑色素瘤组织中KPNA2 mRNA相对表达水平为6.439(5.800, 6.958),高于正常组织的4.035(1.726, 3.538),差异有统计学意义(P<0.001)。KPNA2高表达患者中位生存时间为63.9个月,短于KPNA2低表达患者的104.6个月,差异有统计学意义(P=0.011)。GO、KEGG富集分析显示,黑色素瘤中KPNA2共表达基因涉及的信号通路主要包括P53信号通路、细胞循环等,涉及的细胞组分包括细胞间桥等,生物学过程包括细胞循环周期等,分子功能包括DNA复制起点结合等。KPNA2在黑色素瘤细胞系A375、A875和SK-MEL-28中均有表达,且在A375细胞系中表达量更高,故选用A375细胞进行后续研究。CCK-8法检测结果显示,培养72、96 h后,KPNA2基因沉默后的A375细胞增殖能力低于空白对照细胞和空载细胞,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell实验结果显示,KPNA2基因沉默后的A375细胞侵袭能力低于空白对照细胞和空载细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。Western bolt结果显示,KPNA2基因沉默后的A375细胞中p-P53蛋白表达水平高于空白对照细胞和空载细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 KPNA2 mRNA在黑色素瘤中显著高表达,且与患者的不良预后有关。KPNA2基因沉默可促进抑癌基因P53的磷酸化,� 展开更多

关键词 黑色素瘤 核转运蛋白α2 增殖 侵袭 P53信号通路

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泛素特异性蛋白酶1、核转运蛋白α2在子宫内膜异位症患者异位内膜组织中表达及临床意义

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作者 王婷 曹爱娥 +1 位作者 邱春萍 朱根海 《中国优生与遗传杂志》 2022年第7期1140-1144,共5页

目的 探究泛素特异性蛋白酶1(USP1)、核转运蛋白α2(KPNA2)在子宫内膜异位症患者在位、异位内膜组织中表达及临床意义。方法 选取海南妇产科医院2019年2月至2021年10月住院的67例子宫内膜异位症患者为研究对象,取其在位内膜组织和异位... 目的 探究泛素特异性蛋白酶1(USP1)、核转运蛋白α2(KPNA2)在子宫内膜异位症患者在位、异位内膜组织中表达及临床意义。方法 选取海南妇产科医院2019年2月至2021年10月住院的67例子宫内膜异位症患者为研究对象,取其在位内膜组织和异位内膜组织,收集患者剖宫产分娩次数、囊肿直径等临床指标;同期选取行全子宫切除的70例患者的正常子宫内膜组织作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time qPCR)法检测组织USP1mRNA、KPNA2 mRNA表达水平,采用免疫组织化学法检测组织USP1、KPNA2蛋白表达水平;采用Pearson法及Spearman等级相关分析异位内膜组织中USP1 mRNA与KPNA2 mRNA及其蛋白表达的相关性。结果 正常子宫内膜组织、在位内膜组织、异位内膜组织中USP1 mRNA、KPNA2 mRNA表达水平及蛋白阳性率依次升高(P<0.05)。异位内膜组织中USP1 m RNA与KPNA2 m RNA表达呈正相关(r=0.646,P<0.05)。异位内膜组织中USP1与KPNA2蛋白表达呈正相关(r=0.589,P<0.05)。子宫内膜异位症患者异位内膜组织中USP1、KPNA2蛋白表达与年龄、剖宫产分娩次数、痛经无关(P>0.05),与囊肿直径、浸润深度有关(P<0.05)。结论 USP1与KPNA2在子宫内膜异位症患者异位内膜组织中呈高表达,且二者与囊肿直径、浸润深度有密切联系。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 泛素特异性蛋白酶1 核转运蛋白α2 子宫内膜组织

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YBX1和KPNA2在肺鳞癌中的表达及其临床意义

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作者 寇凯鹏 于一 王青霞 《现代医学》 2021年第8期926-931,共6页

目的:探讨Y-盒结合蛋白1(YBX1)和核转运蛋白α2(KPNA2)在肺鳞癌中的表达及其临床意义。方法:选取本院2015年1月至2017年5月收治的137例肺鳞癌患者进行研究,术中收集肺鳞癌组织及相应癌旁组织,采用免疫组化染色法检测肺鳞癌组织、癌旁组... 目的:探讨Y-盒结合蛋白1(YBX1)和核转运蛋白α2(KPNA2)在肺鳞癌中的表达及其临床意义。方法:选取本院2015年1月至2017年5月收治的137例肺鳞癌患者进行研究,术中收集肺鳞癌组织及相应癌旁组织,采用免疫组化染色法检测肺鳞癌组织、癌旁组织中YBX1、KPNA2表达情况,采用乘积极限(K-M)法进行生存分析,Log-rank检验比较显著性;COX回归模型分析影响肺鳞癌患者预后生存状态的因素。结果:与癌旁组织相比,肺鳞癌组织中YBX1、KPNA2阳性表达率较高(P<0.05);肺鳞癌组织中YBX1、KPNA2表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);Spearman相关分析显示,肺鳞癌组织中YBX1与KPNA2表达呈正相关(r=0.508,P<0.05);随访期内肺鳞癌患者死亡率为37.23%,与YBX1、KPNA2阴性表达者相比,YBX1、KPNA2阳性表达者死亡率较高(P<0.05),总生存期较短(P<0.05);多因素COX分析结果显示,YBX1阳性表达、KPNA2阳性表达、肿瘤分期为Ⅲ期、伴淋巴结转移是影响肺鳞癌患者预后生存状况的独立危险因素(P<0.05)。结论:肺鳞癌组织中YBX1、KPNA2阳性表达与患者肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关,YBX1、KPNA2有望用于评估肺鳞癌患者病情演变及预后状况。 展开更多

关键词 肺鳞癌 Y-盒结合蛋白1 核转运蛋白α2 临床病理特征 预后

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NLS-RARα通过与importin α1/β1(KPNA2/KPNB1)结合入核并抑制U937细胞分化 被引量：1

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作者 叶娇 刘北忠 +9 位作者 李健 熊玲 余莉华 但文冉 刘冬冬 姚娟娟 袁桢 钟鹏强 刘俊梅 钟梁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期499-506,共8页

目的探究核定位信号-维甲酸受体α(NLS-RARα)异常的核定位对细胞分化的抑制作用以及其核转运机制。方法过表达带有血凝素(HA)标签的NLS-RARα慢病毒和空载体慢病毒转染HEK293T细胞和U937细胞,设为NLS-RARα过表达组(NR组)和阴性对照组... 目的探究核定位信号-维甲酸受体α(NLS-RARα)异常的核定位对细胞分化的抑制作用以及其核转运机制。方法过表达带有血凝素(HA)标签的NLS-RARα慢病毒和空载体慢病毒转染HEK293T细胞和U937细胞,设为NLS-RARα过表达组(NR组)和阴性对照组(NC组)。提取HEK293T细胞与U937细胞NC组和NR组细胞核和细胞质蛋白,Western blot法检测NLS-RARα的定位。同时采用免疫荧光细胞化学染色检测NLS-RARα的定位情况。1α,25-二羟维生素D3(1,25D3)诱导U937细胞分化,实时定量PCR,Western blot法检测细胞CD11b、CCAAT/增强子结合蛋白β(CEBPβ)在mRNA和蛋白水平,采用质谱和免疫共沉淀技术(CoIP)筛选与NLS-RARα相作用的转运蛋白,并且通过小干扰RNA(siRNA)转染验证其对NLS-RARα的核定位作用。结果NLS-RARα主要位于细胞核中。与对照组相比,过表达NLS-RARα组CD11b和CEBPβ的增加减少,说明NLS-RARα对1,25D3诱导的细胞分化有抑制作用。质谱和CoIP结果发现核转运蛋白α2/输入蛋白α1(KPNA2/importinα1)和核转运蛋白β1/输入蛋白β1(KPNB1/importinβ1)与NLS-RARα有相互作用,敲低KPNA2/KPNB1则抑制NLS-RARα入核。结论NLS-RARα通过结合KPNA2/KPNB1入核,抑制U937细胞分化。 展开更多

关键词 核定位信号 维甲酸受体α(RARα) 细胞分化 核转运蛋白α2/输入蛋白α1(KPNA2/importinα1) 核转运蛋白β1/输入蛋白β1(KPNB1/importinβ1)

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