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基于Nrf2/ARE信号通路探讨少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠血管内皮损伤的保护作用及机制
被引量：
8
1
作者
李凤金
牛雯颖
+2 位作者
刘欣欣
肖洪彬
王伟明
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期31-37,共7页
目的:通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法:将50只SPF级大鼠随机分为少...
目的:通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法:将50只SPF级大鼠随机分为少腹逐瘀汤高、中、低剂量组(4.8,2.4,1.2 g·kg^(-1)),模型组和空白组,每组10只。采用冰水浴联合皮下注射盐酸肾上腺素的方法建立寒凝血瘀证大鼠模型。造模的同时开始灌胃给药,连续给药28 d后,采用全自动血液流变仪检测血液流变学指标;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),血管性血友病因子(vWF)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察胸主动脉血管损伤情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胸主动脉血管组织Nrf2,血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠全血黏度及血浆黏度均明显升高(P<0.05,P<0.01),vWF,ICAM-1,VCAM-1含量显著升高(P<0.01),NO,SOD,GSH-Px含量显著降低(P<0.01),ET-1的含量显著升高(P<0.01),胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA表达显著升高(P<0.01),细胞核内的Nrf2蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞浆中Nrf2的蛋白表达水平明显降低(P<0.05),HO-1的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,少腹逐瘀汤高、中剂量组全血黏度(高、中切),血浆黏度均明显降低(P<0.05);vWF,ICAM-1,VCAM-1,ET-1含量明显降低(P<0.05,P<0.01);NO,SOD,GSH-Px含量明显升高(P<0.05,P<0.01);胸主动脉血管内皮细胞增生、肿胀、脱落,内弹力膜断裂、平滑肌排列紊乱等病理变化有所改善;Nrf2,HO-1蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。结论:少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血�
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关键词
少腹逐瘀汤
内皮细胞损伤
核
转录
因子
e
2
相关
因子
2(
nrf
2)/
抗氧化
反应
元件
(AR
e
)
寒凝血瘀证
原文传递
基于Nrf2/ARE信号通路探讨当归-川芎含药血清对H_(2)O_(2)致PC12细胞氧化损伤的保护作用
被引量：
9
2
作者
尹曼雪
林玉婕
+3 位作者
黄文治
刘四军
周晓兰
吴庆光
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第16期67-74,共8页
目的:研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法:采用H_(2)O_(2)体外诱导P...
目的:研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法:采用H_(2)O_(2)体外诱导PC12细胞氧化损伤,并以终体积分数为15%的ASRCRS低、中、高剂量组进行干预。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;荧光倒置显微镜观察细胞形态;试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力及活性氧(ROS)分布水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子E2相关因子2(Nrf2),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),血红素加氧酶-1(HO-1),SOD1蛋白的表达水平。结果:选择300μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)刺激24 h作为氧化损伤造模的条件。与正常组比较,H_(2)O_(2)模型组细胞形态异常,细胞存活率显著降低(P<0.01);LDH,MDA含量升高(P<0.01),SOD活力降低,ROS在细胞内分布增加;Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01),Keap1蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。与模型组比较,ASRCRS不同剂量组均能改善细胞形态,提高细胞存活率,抑制细胞凋亡;显著提高SOD酶活力(P<0.01),抑制LDH的释放(P<0.01)和ROS的生成,降低MDA含量(P<0.01);明显上调Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),显著下调Keap1蛋白表达水平(P<0.01)。结论:当归-川芎含药血清可能是通过上调Nrf2的蛋白表达,激活Nrf2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路,增强细胞抗氧化损伤能力,抑制细胞凋亡,从而发挥保护H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞的作用。
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关键词
当归
川芎
含药血清
氧化
损伤
核
转录
因子
e
2
相关
因子
2(
nrf
2)/
抗氧化
反应
元件
(AR
e
)信号通路
原文传递
题名
基于Nrf2/ARE信号通路探讨少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠血管内皮损伤的保护作用及机制
被引量：
8
1
作者
李凤金
牛雯颖
刘欣欣
肖洪彬
王伟明
机构
黑龙江省中医药科学院中药研究所
黑龙江中医药大学基础医学院
出处
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期31-37,共7页
基金
国家自然科学基金项目(81703981)。
文摘
目的:通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法:将50只SPF级大鼠随机分为少腹逐瘀汤高、中、低剂量组(4.8,2.4,1.2 g·kg^(-1)),模型组和空白组,每组10只。采用冰水浴联合皮下注射盐酸肾上腺素的方法建立寒凝血瘀证大鼠模型。造模的同时开始灌胃给药,连续给药28 d后,采用全自动血液流变仪检测血液流变学指标;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),血管性血友病因子(vWF)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察胸主动脉血管损伤情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胸主动脉血管组织Nrf2,血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠全血黏度及血浆黏度均明显升高(P<0.05,P<0.01),vWF,ICAM-1,VCAM-1含量显著升高(P<0.01),NO,SOD,GSH-Px含量显著降低(P<0.01),ET-1的含量显著升高(P<0.01),胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA表达显著升高(P<0.01),细胞核内的Nrf2蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞浆中Nrf2的蛋白表达水平明显降低(P<0.05),HO-1的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,少腹逐瘀汤高、中剂量组全血黏度(高、中切),血浆黏度均明显降低(P<0.05);vWF,ICAM-1,VCAM-1,ET-1含量明显降低(P<0.05,P<0.01);NO,SOD,GSH-Px含量明显升高(P<0.05,P<0.01);胸主动脉血管内皮细胞增生、肿胀、脱落,内弹力膜断裂、平滑肌排列紊乱等病理变化有所改善;Nrf2,HO-1蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。结论:少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血�
关键词
少腹逐瘀汤
内皮细胞损伤
核
转录
因子
e
2
相关
因子
2(
nrf
2)/
抗氧化
反应
元件
(AR
e
)
寒凝血瘀证
Keywords
Shaofu Zhuyutang
e
ndoth
e
lial c
e
lls injury
nucl
e
ar factor
e
rythroid-
2
-r
e
lat
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2
(
nrf
2
)/antioxidant r
e
spons
e
e
l
e
m
e
nt(AR
e
)
cold coagulation and blood stasis syndrom
e
分类号
R2-0 [医药卫生—中医学]
R289 [医药卫生—方剂学]
原文传递
题名
基于Nrf2/ARE信号通路探讨当归-川芎含药血清对H_(2)O_(2)致PC12细胞氧化损伤的保护作用
被引量：
9
2
作者
尹曼雪
林玉婕
黄文治
刘四军
周晓兰
吴庆光
机构
广州中医药大学中药学院
广州中医药大学第二临床医学院
广东省中医院大学城医院
出处
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第16期67-74,共8页
基金
国家自然科学基金项目(81673619)。
文摘
目的:研究当归-川芎含药血清(Angelicae Sinensis Radix-Chuanxiong Rhizoma medicated serum,ASRCRS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)氧化损伤的保护作用及其分子机制。方法:采用H_(2)O_(2)体外诱导PC12细胞氧化损伤,并以终体积分数为15%的ASRCRS低、中、高剂量组进行干预。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;荧光倒置显微镜观察细胞形态;试剂盒检测细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH),丙二醛(MDA)含量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力及活性氧(ROS)分布水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核转录因子E2相关因子2(Nrf2),Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),血红素加氧酶-1(HO-1),SOD1蛋白的表达水平。结果:选择300μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)刺激24 h作为氧化损伤造模的条件。与正常组比较,H_(2)O_(2)模型组细胞形态异常,细胞存活率显著降低(P<0.01);LDH,MDA含量升高(P<0.01),SOD活力降低,ROS在细胞内分布增加;Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平均明显下调(P<0.05,P<0.01),Keap1蛋白表达水平明显上调(P<0.01)。与模型组比较,ASRCRS不同剂量组均能改善细胞形态,提高细胞存活率,抑制细胞凋亡;显著提高SOD酶活力(P<0.01),抑制LDH的释放(P<0.01)和ROS的生成,降低MDA含量(P<0.01);明显上调Nrf2,HO-1,SOD1蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),显著下调Keap1蛋白表达水平(P<0.01)。结论:当归-川芎含药血清可能是通过上调Nrf2的蛋白表达,激活Nrf2/抗氧化反应元件(ARE)信号通路,增强细胞抗氧化损伤能力,抑制细胞凋亡,从而发挥保护H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞的作用。
关键词
当归
川芎
含药血清
氧化
损伤
核
转录
因子
e
2
相关
因子
2(
nrf
2)/
抗氧化
反应
元件
(AR
e
)信号通路
Keywords
Ang
e
lica
e
Sin
e
nsis Radix
Chuanxiong Rhizoma
m
e
dicat
e
d s
e
rum
oxidativ
e
damag
e
nucl
e
ar factor
e
2
-r
e
lat
e
d factor
2
(
nrf
2
)/antioxidant r
e
spons
e
e
l
e
m
e
nt(AR
e
)signaling pathway
分类号
R2-0 [医药卫生—中医学]
R22
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于Nrf2/ARE信号通路探讨少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠血管内皮损伤的保护作用及机制
李凤金
牛雯颖
刘欣欣
肖洪彬
王伟明
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
8
原文传递
2
基于Nrf2/ARE信号通路探讨当归-川芎含药血清对H_(2)O_(2)致PC12细胞氧化损伤的保护作用
尹曼雪
林玉婕
黄文治
刘四军
周晓兰
吴庆光
《中国实验方剂学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
9
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