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维拉帕米对脊髓损伤小鼠的神经保护作用
1
作者 郏振杰 徐传华 丁棚辉 《江苏医药》 CAS 2022年第10期977-981,F0002,共6页
目的探讨维拉帕米对脊髓损伤小鼠的神经保护作用及潜在机制。方法将72只C57BL/6小鼠随机均分为三组,每组24只。VP组和NaCl组采用改良Allen’s方法制备脊髓损伤模型;VP组术后予尾静脉注射维拉帕米2 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药... 目的探讨维拉帕米对脊髓损伤小鼠的神经保护作用及潜在机制。方法将72只C57BL/6小鼠随机均分为三组,每组24只。VP组和NaCl组采用改良Allen’s方法制备脊髓损伤模型;VP组术后予尾静脉注射维拉帕米2 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药7 d。Sham组与NaCl组予注射等量生理盐水,连续注射7 d。采用Basso-Mouse量表(BMS)评估小鼠后肢运动功能恢复情况,HE染色及免疫荧光染色观察脊髓损伤后组织结构的改变,Western blot、实时荧光定量PCR和ELISA检测小鼠炎症和凋亡相关蛋白或mRNA的表达。结果脊髓损伤后小鼠运动功能减弱,VP组小鼠术后第7和14天的BMS评分高于NaCl组(P<0.05或P<0.01)。HE染色结果显示,VP组较NaCl组脊髓组织的坏死面积减少,组织结构改善。免疫荧光染色结果显示,VP组微管相关蛋白2表达高于NaCl组(P<0.05)。与NaCl组相比,VP组小鼠血清炎症标记物TNF-α、IL-1β水平和脊髓组织凋亡标记物Caspase-3、Bax蛋白和mRNA表达降低(P<0.05),细胞质NF-κB蛋白表达升高,细胞核NF-κB蛋白表达降低(P<0.01)。结论维拉帕米能抑制炎症反应和神经元凋亡,从而改善脊髓损伤后的组织损伤,促进神经功能恢复;其机制可能与抑制NF-κB途径有关。 展开更多
关键词 维拉帕米 脊髓损伤 炎症 凋亡 核因子κb途径
原文传递
促红细胞生成素对新生儿窒息后血清诱导人肾小管上皮细胞损伤信号传导的影响 被引量：1
2
作者 熊涛 董文斌 +1 位作者 王明勇 邓存良 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期425-427,共3页
目的探讨促红细胞生成素(EPO)对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的信号传导机制的影响。方法选择足月重度窒息新生儿50例。男28例,女22例;均未使用免疫抑制剂,无明显感染性疾病,且取得家属知情同意。在窒息后1 d抽... 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的信号传导机制的影响。方法选择足月重度窒息新生儿50例。男28例,女22例;均未使用免疫抑制剂,无明显感染性疾病,且取得家属知情同意。在窒息后1 d抽取其外周静脉血5 mL,2 500 r/min离心10 min分离血清,56℃水浴30 min灭活补体,微孔滤器过滤除菌,采用DMEM/F12培养液配制成200 mL/L的攻击浓度。以HK-2作为攻击对象。攻击前分为空白对照组和EPO预处理组(5×104IU/LEPO的培养基预处理24 h),在攻击后15 min、1 h、2 h分为相应时点的攻击组和EPO预处理后攻击组。通过激光共聚焦显微镜观察间接免疫荧光染色后核因子-κB(NF-κB)核转位。Western blot法检测NF-κB抑制亚基I-κBα水平的变化,将Western blot结果扫描进入计算机,应用Image-Pro Plus图像分析软件对条带进行分析,以条带积分吸光度值代表蛋白表达量。结果攻击前,与空白对照组比较,EPO预处理组NF-κB核转位显著增加,I-κBα显著减少(Pa<0.05);攻击后,各组与空白对照组比较,NF-κB核转位显著增加,I-κBα显著减少(Pa<0.05),以攻击后1 h最明显;各时点EPO预处理后攻击组与血清攻击组比较,NF-κB核转位显著减少,I-κBα显著增加(P<0.05)。结论EPO预处理通过预激活NF-κB而抑制窒息血清,导致后续NF-κB进一步激活。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 窒息后血清 肾小管上皮细胞 核因子-κb途径 婴儿 新生
原文传递
苦参碱经TLR4/NF-κB通路对膀胱癌小鼠免疫机制的调控作用 被引量：7
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作者 瞿小祥 孔东波 +3 位作者 鲁小红 江波涛 邹伟 查文良 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2021年第6期813-819,共7页
目的:探究苦参碱通过Toll样受体4(TLR4)/核因子(NF)-κB通路对膀胱癌小鼠免疫机制的调控作用。方法:通过皮下注射膀胱癌细胞系T24的方法构建膀胱癌小鼠模型。将36只模型小鼠随机分为对照组、苦参碱低剂量组和苦参碱高剂量组(n=12)。苦... 目的:探究苦参碱通过Toll样受体4(TLR4)/核因子(NF)-κB通路对膀胱癌小鼠免疫机制的调控作用。方法:通过皮下注射膀胱癌细胞系T24的方法构建膀胱癌小鼠模型。将36只模型小鼠随机分为对照组、苦参碱低剂量组和苦参碱高剂量组(n=12)。苦参碱腹腔注射干预,剂量分别为5、10 mg·kg^(-1)。测量肿瘤生长情况,采用蛋白质印迹法检测增殖相关蛋白细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达,TUNEL染色检测细胞凋亡。比较各组TLR4/NF-κB通路的转录和翻译水平。采用流式细胞术检测各组CD4^(+)、CD8^(+)细胞百分比,免疫组化染色检测肿瘤组织中CD4^(+)细胞浸润情况。结果:3组小鼠各项指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。苦参碱低剂量组和苦参碱高剂量组的肿瘤体积、质量,Cyclin D1和PCNA蛋白表达水平,TLR4、NF-κB mRNA及蛋白表达水平均显著低于对照组,凋亡指数均显著高于对照组(P<0.05);苦参碱高剂量组的肿瘤体积、质量,Cyclin D1和PCNA蛋白表达水平,TLR4、NF-κB mRNA及蛋白表达水平均显著低于苦参碱低剂量组,凋亡指数显著高于苦参碱低剂量组(P<0.05)。3组小鼠的CD4^(+)细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)和CD4^(+)细胞浸润情况比较差异有统计学意义(P<0.05)。苦参碱低剂量组和苦参碱高剂量组的CD4^(+)细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)、CD4^(+)细胞浸润水平均显著高于对照组(P<0.05);苦参碱高剂量组的CD4^(+)细胞百分比、CD4^(+)/CD8^(+)、CD4^(+)细胞浸润水平均显著高于苦参碱低剂量组(P<0.05)。结论:苦参碱可能通过调控TLR4/NF-κB途径抑制膀胱癌小鼠模型的肿瘤生长和诱导凋亡,并提高CD4^(+)/CD8^(+)水平促进CD4^(+)细胞的浸润。 展开更多
关键词 膀胱癌 苦参碱 Toll样受体4/核因子-κb途径 免疫抑制 T淋巴细胞 小鼠
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