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日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究 被引量：7
1
作者 董惠芬 彭延 +2 位作者 蒋明森 明珍平 钟沁萍 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期492-494,499,共4页
目的 通过研究日本血吸虫成虫与童虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)含量及β-巯基乙醇对培养细胞AgNORs的影响,探讨AgNORs能否作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的指标以及β-巯基乙醇对培养细胞的促增殖作用。方法 联合法培养... 目的 通过研究日本血吸虫成虫与童虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)含量及β-巯基乙醇对培养细胞AgNORs的影响,探讨AgNORs能否作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的指标以及β-巯基乙醇对培养细胞的促增殖作用。方法 联合法培养虫龄分别为18d和24d的日本血吸虫童虫与成虫,将童虫细胞随机分成对照组和实验组,对照组细胞与成虫细胞使用常规培养基培养,实验组在常规培养基中加入50μmoL/L β-巯基乙醇和1mmoL/L丙酮酸钠。培养第5d,运用胶银法染色,使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数,测定银染颗粒面积与核面积的百分比和平均光密度。结果 日本童虫培养细胞(对照组)的AgNORs颗粒数目、颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均高于成虫培养细胞。统计学分析显示,两者之间的AgNORs颗粒数日,银染颗粒面积与核面积百分比、平均光密度两两比较均有统计学差异(P<0.01或P<0.05);实验组培养细胞与对照组比较,AgNORs颗粒数目明显增多颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均显著升高。统计学分析可知,两组细胞三组参数之间均有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。结论 AgNORs可作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的一个简便、敏感的指标。日本血吸虫童虫培养细胞较成虫培养细胞更具增殖潜能; 展开更多
关键词 日本血吸虫 细胞培养 核仁组织区相关嗜银蛋白 β-巯基乙醇
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雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞最适浓度的筛选 被引量：3
2
作者 李俊琳 蒋明森 +2 位作者 钟沁萍 明珍平 董惠芬 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期482-486,共5页
目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体，无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆，反复冻融3次，离心取上清液，考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌... 目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体，无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆，反复冻融3次，离心取上清液，考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌虫卵黄腺段虫体，冷消化法制备细胞悬液，调整细胞数为1×10^9／L后，将卵黄细胞接种于小盖玻片上，RPMI-1640含20％小牛血清培养，根据加入不同质量浓度雄虫抽提物分为6组（0、10、50、100、150、200mg／L组）。培养第7天，以核仁组织区相关嗜银蛋白（argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins，AgNORs）及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）为评价指标，对卵黄细胞进行AgNORs及LDH染色，Olympus-BH2显微镜观察，输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的灰度值。结果 随着雄虫抽提物质量浓度的增加，培养细胞的AgNORs与LDH着色均逐渐加深，至100mg／L时最深,随后又逐渐变浅。图像分析显示，雄虫抽提物处理的各组细胞AgNORs及LDH均明显高于对照组（q10=14．2189、q50=18．3358、q100=35．6491、q150=13．1849、q200=13．8604，P＜0．01；g10=10．3377、q50=11．7532、q100=23．1883、q150=10．2792、q200=9．3052，P＜0．01）。雄虫抽提物100mg／L组与其他各组比较，AgNORs及LDH明显升高（q100=21．4302、q50=17．3132、q150=22．4642、q200=21．7887，P＜0．01；g10=12．8506、q50=11．4351、q150=12．8896、q200=13．8831，P＜0．01）。结论 雄虫抽提物可显著提高日本血吸虫卵黄细胞的增殖能力与代谢活性，其作用的最适质量浓度为100mg/L。 展开更多
关键词 雄虫抽提物 血吸虫日本 卵黄细胞 核仁组织区相关嗜银蛋白 乳酸脱氢酶
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亚精胺对日本血吸虫成虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的影响 被引量：3
3
作者 陈喜珪 易同寅 +3 位作者 明珍平 钟沁萍 蒋明森 董惠芬 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期50-53,共4页
目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞... 目的以日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(Argyrophilicnucleolarorganizerregionassociatedproteins,AgNORs)为评价指标,探讨亚精胺(Spermidine,Spd)对培养细胞的促增殖作用。方法采用联合法将虫龄为24d的日本血吸虫成虫细胞接种于小盖玻片上,培养于常规培养基中。接种后第3天,随机分为实验组和对照组。将实验组细胞用无血清培养基配制的终浓度为75μmol/L的Spd处理48h,对照组细胞则用不含Spd的无血清培养基处理,时间相同;PBS清洗3次后换用常规培养基继续培养。于第7、14、21、28、35天分别对培养细胞进行AgNORs染色。使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数及平均吸光值,并作统计分析。结果经Spd处理,各实验组培养细胞AgNORs着色明显深于对照组;但随着培养时间的延长,实验组与对照组细胞着色均逐渐变浅。各实验组细胞AgNORs颗粒数目与平均吸光值高于对照组,二者比较差异有统计学意义(u7=50.95、43.78;u14=55.23、43.54;u21=36.65、32.25;u28=31.6、32.95;u35=28.86、9.54;P<0.01)。各实验组AgNORs吸光值两两比较,除第7天与第14天之间差异无统计学意义外(q=0.008058,P>0.05),其余差异都有统计学意义(P<0.01)。结论Spd具有促进日本血吸虫培养细胞增殖的能力,每周用Spd处理培养细胞1次,能更大限度地促进血吸虫培养细胞的生长。 展开更多
关键词 亚精胺 血吸虫 日本 细胞 培养的 核仁组织区相关嗜银蛋白
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急性非淋巴细胞白血病细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究 被引量：2
4
作者 韩益玲 钟璐 +6 位作者 陈芳源 韩洁英 钟华 宣政华 陈小龙 钟济华 欧阳仁荣 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期73-75,101,共4页
目的研究核仁形成区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)对评估急性非淋巴细胞白血病(AML)细胞增殖分化水平的价值。方法用嗜银染色方法检测AML细胞的嗜银颗粒数目和形态,观察Ag-NORs形态与细胞形态学之间的关系,Ag-NORs分数与染色体、荧光分子原位杂... 目的研究核仁形成区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)对评估急性非淋巴细胞白血病(AML)细胞增殖分化水平的价值。方法用嗜银染色方法检测AML细胞的嗜银颗粒数目和形态,观察Ag-NORs形态与细胞形态学之间的关系,Ag-NORs分数与染色体、荧光分子原位杂交(FISH)检查以及AML预后的关系。结果不同Ag-NORs形状特征的细胞比例与细胞形态学的原幼稚细胞比例有显著相关性。Ag-NORs分数比较,染色体和FISH检查异常组高于正常组;治疗前未缓解组高于缓解组;持续缓解1年以上组高于1年内复发组;生存期1年以上组高于1年内死亡组(均P<0.01)。结论用嗜银染色方法检测AML细胞Ag-NORs分数和形态可观察白血病细胞的增殖状况,可作为白血病细胞动力学研究的一项指标,由于操作简便和易于普及,可为白血病的临床诊治提供快捷有效的实验依据。 展开更多
关键词 急性非淋巴细胞白血病 核仁组织区相关嗜银蛋白 嗜银颗粒数目和形态 预后
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条件培养基对日本血吸虫童虫培养细胞LDH及AgNORs的影响 被引量：1
5
作者 罗超 明珍平 +3 位作者 钟沁萍 叶青 蒋明森 董惠芬 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期552-556,I0004,共6页
目的以乳酸脱氢酶(LDH)及核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫童虫培养细胞的影响。方法灌注法获取21d虫龄的日本血吸虫虫体,冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞。将接种... 目的以乳酸脱氢酶(LDH)及核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫童虫培养细胞的影响。方法灌注法获取21d虫龄的日本血吸虫虫体,冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞。将接种于小盖玻片上的血吸虫细胞随机分为对照(0h)组和24、48、72h3个实验组共4组。对照组用常规培养基即RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素(青霉素1×105U/L,链霉素100mg/L)培养,实验组培养基为常规培养基分别与培养24、48、72h的鼻咽癌细胞上清液的条件培养基1∶1的混合液。培养第7天,对培养细胞进行LDH及AgNORs染色;每组随机选取300个LDH染色细胞、50个AgNORs染色细胞输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的吸光度(A)值,并作统计分析。结果日本血吸虫童虫细胞在不同条件培养基作用下,其LDH及AgNORs着色均比对照组深,其中72h组细胞着色最深,其次是48h组,再是24h组,对照组细胞着色最浅,条件培养基培养的各组细胞,LDH含量及AgNORsA值显著大于对照组细胞(q24=8.5287,q48=15.4253,q72=27.6207,P均<0.01;q24=13.5690,q48=18.7288,q72=27.0356,P均<0.01)。72h的条件培养基作用日本血吸虫童虫细胞后,培养细胞的LDH含量及AgNORsA值明显较对照组高(q0/72=27.6207,P<0.01;q0/72=27.0356,P<0.01),亦高于其他组(q24/72=19.0919,q48/72=11.8426,P均<0.01;q24/72=13.5690,q48/72=18.7288,P均<0.01)。结论条件培养基可明显增强日本血吸虫童虫培养细胞LDH的活性及增加AgNORs的含量,且72h的条件培养基对童虫培养细胞的影响最大。 展开更多
关键词 日本血吸虫 条件培养基 童虫细胞 乳酸脱氢酶 核仁组织区相关嗜银蛋白
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条件培养基对日本血吸虫卵黄培养细胞Ag-NORs的影响
6
作者 罗超 陈喜珪 赵桂花 《湖北科技学院学报（医学版）》 2012年第6期461-464,共4页
目的以核仁组织区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫卵黄培养细胞的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,雌雄分离后冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞。将接种于小盖... 目的以核仁组织区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)为评价指标,观察条件培养基对日本血吸虫卵黄培养细胞的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,雌雄分离后冷消化法制备细胞悬液,调细胞为1×106个/ml,联合法接种细胞。将接种于小盖玻片上的血吸虫卵黄细胞随机分为对照组和实验组2组。对照组用常规培养基即RPMI-1640含20%小牛血清附加常量抗生素(青霉素1×105U/L,链霉素100mg/L)培养,实验组培养基为常规培养基与培养的鼻咽癌细胞上清液的条件培养基1∶1的混合液。在培养的第7d、14d、21d、28d、35d时,定时对各组卵黄培养细胞进行Ag-NORs染色,光镜下观察、拍照,同时随机选取50个左右染色细胞输入HPIAS-2000图像分析仪测定Ag-NORs光密度值,并做统计分析。结果培养第1～5周,实验组细胞Ag-NORs均深于对照组细胞;随着培养时间的延长,两组细胞核内着色颗粒均逐渐减少;两组培养细胞的Ag-NORs含量均逐渐降低,对照组下降较快,实验组下降较缓。相同培养时间比较,实验组培养细胞的Ag-NORs含量均显著高于对照组(P<0.05)。实验组细胞之间两两比较,除第21d与28d(P>0.05)无显著性差异外,其余各组差异均显著(P<0.01);对照组细胞之间两两比较,除第28d与35d外(P>0.05),其余各组差异均显著。结论条件培养基不仅可促进卵黄培养细胞的分裂增殖,而且能保持卵黄细胞在培养过程中的分裂增殖活性。 展开更多
关键词 日本血吸虫 条件培养基 卵黄细胞 核仁组织区相关嗜银蛋白
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汉防己甲素对人单核细胞样细胞系U937的影响
7
作者 舒丹毅 唐军民 +1 位作者 张晓明 唐岩 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1996年第4期430-434,510,共6页
本文报导中药汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，Ｔｅｔ）对人单核细胞样细胞系Ｕ９３７的形态、细胞化学特性以及增殖分化的影响。经浓度为５×１０－３ｍｇ／ｍｌ的Ｔｅｔ作用５天后，Ｕ９３７细胞的形态、细胞化学特性接近于... 本文报导中药汉防己甲素（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，Ｔｅｔ）对人单核细胞样细胞系Ｕ９３７的形态、细胞化学特性以及增殖分化的影响。经浓度为５×１０－３ｍｇ／ｍｌ的Ｔｅｔ作用５天后，Ｕ９３７细胞的形态、细胞化学特性接近于单核／巨噬细胞。３Ｈ－ＴｄＲ掺入证明Ｔｅｔ对Ｕ９３７细胞的ＤＮＡ合成有抑制作用。银染核仁组织者区（Ａｇ－ＮＯＲ）显示细胞核内Ａｇ－ＮＯＲ计数亦明显下降。 展开更多
关键词 汉防己甲素 U937细胞系 ~3H-TdR掺入 细胞化学 核仁组织者区相关嗜银蛋白
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