新型苯并咪唑类化合物的合成及抗柯萨奇B_3病毒活性 被引量：5

1

作者 张钟闾 罗先金 +2 位作者 修乃云 彭宗根 滕立 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期488-492,共5页

3-硝基邻苯二甲酸酐经氨解、Hoffman降解、水合肼还原及闭环反应得2-芳基-1H-苯并咪唑-4-羧酸,经氯化亚砜酰氯化后与相应的胺反应,制得2-取代芳基-1H-苯并咪唑-4-酰胺类衍生物1a～1g,均为新化合物。并测定了其抑制柯萨奇B3病毒(CVB3)活... 3-硝基邻苯二甲酸酐经氨解、Hoffman降解、水合肼还原及闭环反应得2-芳基-1H-苯并咪唑-4-羧酸,经氯化亚砜酰氯化后与相应的胺反应,制得2-取代芳基-1H-苯并咪唑-4-酰胺类衍生物1a～1g,均为新化合物。并测定了其抑制柯萨奇B3病毒(CVB3)活性。结果显示,化合物1b、1c、1e和1g的活性优于利巴韦林。 展开更多

关键词 苯并咪唑 柯萨奇b3病毒(cvb3) 抗病毒活性 合成

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柯萨奇B3病毒VP1基因在原核中的表达及其临床意义 被引量：4

2

作者 毕胜利 曲萌 +1 位作者 陈廷友 宋玉国 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期847-850,856,共5页

目的:研究柯萨奇B3病毒(CVB3)VP1基因在大肠杆菌中的表达及其临床意义。方法:将柯萨奇B3病毒中国分离株VP1基因克隆入PQE-30载体,转导入大肠杆菌(Ml5)中,使CVB3的VP1基因在大肠杆菌中得到稳定的表达,采用NAT亲和方法纯化,间接ELISA方法... 目的:研究柯萨奇B3病毒(CVB3)VP1基因在大肠杆菌中的表达及其临床意义。方法:将柯萨奇B3病毒中国分离株VP1基因克隆入PQE-30载体,转导入大肠杆菌(Ml5)中,使CVB3的VP1基因在大肠杆菌中得到稳定的表达,采用NAT亲和方法纯化,间接ELISA方法做免疫学活性鉴定。结果:表达的VP1产物与抗柯萨奇B3病毒的兔抗CVB3(多克隆抗体)血清产生较强的免疫反应,与天然的CVB3蛋白抗原(病毒组织培养抗原)的抗原性近似。应用无关兔抗体对照呈阴性反应。应用表达的VP1产物作为抗原,对临床急性病毒性心肌炎患者血清进行了特异性IgM酶联免疫吸附试验检测,其结果与组织培养的CVB3制备的细胞蛋白抗原对上述患者血清的特异性IgM检测结果基本一致。结论:采用基因工程方法制备出的CVB3-VP1蛋白抗原产量高,纯化后免疫反应原性基本没有变化。试用表达CVB3的VP1基因工程抗原代替目前实验用有感染危险的病毒培养抗原的方法,快速、特异地检出CVB3的感染,为急性心肌炎的早期诊断和及时的临床治疗提供可靠的实验室诊断指标。 展开更多

关键词 柯萨奇b3病毒(cvb3) VP1基因 基因表达

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抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊对柯萨奇B_3病毒性心肌炎小鼠LDH、CK的影响 被引量：2

3

作者 闫莉婷 冯会红 +6 位作者 牛云锋 李萌萌 魏婷婷 苏靖 靳海红 刘月红 韩淑英 《华北煤炭医学院学报》 2011年第1期3-4,共2页

①目的探讨抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊(K-CoxB-JK复方)对实验性小鼠柯萨奇B3病毒(CVB3)性心肌炎的治疗作用。②方法采用雄性BALB/C小鼠腹腔注射CVB3,建立实验性小鼠病毒性心肌炎模型。将84只雄鼠随机分为正常对照组、模型组、病毒唑组... ①目的探讨抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊(K-CoxB-JK复方)对实验性小鼠柯萨奇B3病毒(CVB3)性心肌炎的治疗作用。②方法采用雄性BALB/C小鼠腹腔注射CVB3,建立实验性小鼠病毒性心肌炎模型。将84只雄鼠随机分为正常对照组、模型组、病毒唑组、复方组,每组21只。模型组、病毒唑组和复方组小鼠腹腔接种CVB3稀释液半小时后即给药,正常对照组给予一定量生理盐水。将接种当天定为第1天,每日1次,连续给药18天,于第19天处死。观察小鼠精神状态,统计小鼠死亡率并检测血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)浓度。③结果复方组LDH、CK较模型组低,病毒唑组LDH、CK高于模型组、正常组。④结论 K-CoxB-JN复方对小鼠CVB3病毒性心肌炎的有治疗作用,且其治疗作用优于病毒唑。 展开更多

关键词 病毒性心肌炎 柯萨奇b3病毒(cvb3) K-Coxb-JN复方 bALb/C小鼠

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脂筏在柯萨奇B3病毒感染心肌细胞中作用

4

作者 王槐栋 张莹 +1 位作者 许东洙 黄红兰 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期228-229,共2页

目的探讨脂筏在柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌细胞中的作用,旨在为阐明CVB3致病的分子机理及寻找新的抗病毒靶点提供依据。方法用甲基-β-环糊精(MβCD)去除细胞膜维持脂筏稳定性的胆固醇分子后感染CVB3,用Western blot法检测CVB3 VP1蛋... 目的探讨脂筏在柯萨奇B3病毒(CVB3)感染心肌细胞中的作用,旨在为阐明CVB3致病的分子机理及寻找新的抗病毒靶点提供依据。方法用甲基-β-环糊精(MβCD)去除细胞膜维持脂筏稳定性的胆固醇分子后感染CVB3,用Western blot法检测CVB3 VP1蛋白的表达并测定病毒的滴度,同时观察补充外源性胆固醇恢复MβCD对CVB3感染的抑制作用。结果用MβCD去除胆固醇分子破坏细胞膜脂筏结构,可抑制CVB3感染细胞;1.2、5.5和10 mmol/L MβCD去除细胞膜胆固醇CVB3滴度分别为(4.2±0.06)、(3.5±1.05)、(3.0±0.15)和(2.0±0.15)lgP-FU/mL,均低于无MβCD处理对照组的(5.7±0.06)lgPFU/mL(P<0.001);补充外源性胆固醇可恢复MβCD对CVB3感染的抑制作用。结论细胞膜脂筏在CVB3感染心肌细胞中起重要作用,是病毒进入细胞的关键因素。 展开更多

关键词 脂筏 甲基-β-环糊精(MβCD) 柯萨奇b3病毒(cvb3) 心肌细胞 感染

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柯萨奇B4病毒非结构蛋白P_2C重组质粒的构建 被引量：1

5

作者 高久春 黄红兰 李凡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期583-585,共3页

目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUC... 目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUCm-T载体,用BamHⅠ、HindⅢ双酶切鉴定,与非结构蛋白P2C的PCR扩增产物片段大小一致。结论:成功地构建了柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。 展开更多

关键词 柯萨奇b4病毒(cvb4) 1型糖尿病 非结构蛋白P2C 重组质粒

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白藜芦醇通过Nrf2/ARE通路减轻柯萨奇病毒B3感染的乳鼠心肌细胞炎症和氧化应激反应 被引量：9

6

作者 顾烽 符霞 +3 位作者 孙立勤 王海玲 陈宣颖 蔡远榛 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期63-69,共7页

柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎的主要病毒株,CVB3感染能够通过激活炎症反应及氧化应激反应来造成心肌细胞损伤。白藜芦醇(Resveratrol,RES)是具有抗炎、抗氧化作用的多酚化合物,已经被证实能够减轻缺血缺氧... 柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎的主要病毒株,CVB3感染能够通过激活炎症反应及氧化应激反应来造成心肌细胞损伤。白藜芦醇(Resveratrol,RES)是具有抗炎、抗氧化作用的多酚化合物,已经被证实能够减轻缺血缺氧、缺氧复氧、脂多糖、过氧化氢等病理因素引起的心肌细胞损伤,但RES对CVB3感染引起心肌细胞损伤的保护作用尚未明确。为了研究RES通过核因子-E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)/抗氧化反应元件(Antioxidant response element,ARE)通路减轻CVB3感染乳鼠心肌细胞的炎症和氧化应激反应,本研究采用原代培养大鼠乳鼠心肌细胞,分为DMEM处理的对照组、CVB3感染的CVB3组、CVB3感染及RES处理的RES组、CVB3感染及RES、Nrf2抑制剂鸦胆苦醇处理的RES+鸦胆苦醇组、CVB3感染及RES、血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)抑制剂锌原卟啉-9(Zinc protoporphyrin-9,ZnPP9)处理的RES+ZnPP9组,比较5组间心肌酶、CVB3拷贝数、炎症因子、氧化应激指标、Nrf2/ARE通路分子的差异。结果显示:与对照组比较,CVB3组培养基中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶同工酶-MB(Creatine kinase isoenzyme-MB,CK-MB)、白介素(Interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、活性氧簇(Reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量及细胞中CVB3拷贝数、Nrf2、NADH依赖的醌氧化还原酶1(NAD(P)H:quinone oxidoreductase-1,NQO-1)、HO-1的表达量明显增多(P<0.05),培养基中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)的含量明显减少(P<0.05);与CVB3组比较,RES组培养基中LDH、CK-MB、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、ROS、MDA的含量明显减少(P<0.05),培养基中SOD、GPx的含量及Nrf2、NQO-1、HO-1的表达量明显增多(P<0.05),CVB3拷贝数无明显变化(P>0.05);与RES组比较,RES+鸦胆苦醇组� 展开更多

关键词 白藜芦醇(RES) 柯萨奇病毒b3(cvb3) 通路 感染

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基于PI3K/AKT通路研究槲皮素对柯萨奇病毒B3诱导心肌细胞损伤的保护作用 被引量：8

7

作者 刘回丽 吴健 黄晓婷 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期431-438,共8页

柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎的主要病毒株,能够通过激活氧化应激及细胞凋亡来引起心肌细胞损伤。槲皮素是具有抗氧化、抗凋亡作用的黄酮类化合物,已经在CVB3感染小鼠中被证实能够减轻心肌损伤,但槲皮素是... 柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎的主要病毒株,能够通过激活氧化应激及细胞凋亡来引起心肌细胞损伤。槲皮素是具有抗氧化、抗凋亡作用的黄酮类化合物,已经在CVB3感染小鼠中被证实能够减轻心肌损伤,但槲皮素是否直接在心肌细胞中抑制CVB3引起的氧化应激及凋亡尚未明确。本研究的目的是基于PI3K/AKT通路研究槲皮素对CVB3诱导心肌细胞损伤及氧化应激、凋亡的调节作用。本研究将原代培养新生SD大鼠的心肌细胞,分为不感染CVB3的对照组、感染CVB3的CVB3组、感染CVB3并用槲皮素处理的槲皮素组、感染CVB3并用槲皮素及PI3K抑制剂LY294002处理的槲皮素+LY组。检测CVB3基因组RNA、细胞活力OD490nm值及凋亡率、培养基中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量、细胞中bcl-2、bax、裂解型caspase-3、磷酸化PI3K、磷酸化AKT的表达量。结果显示,槲皮素组中CVB3的基因组RNA与CVB3组比较无差异(P>0.05),凋亡率、培养基中AST、LDH、MDA的含量、细胞中bax、裂解型caspase-3的表达量均明显低于CVB3组(P<0.05),OD490nm值、培养基中SOD的含量、细胞中bcl-2、磷酸化PI3K、磷酸化AKT的表达量明显高于CVB3组(P<0.05);槲皮素+LY组中CVB3的基因组RNA与槲皮素组比较无差异(P>0.05),凋亡率、培养基中AST、LDH、MDA的含量、细胞中bax、裂解型caspase-3的表达量均明显高于槲皮素组(P<0.05),OD490nm值、培养基中SOD的含量、细胞中bcl-2、磷酸化PI3K、磷酸化AKT的表达量明显低于槲皮素组(P<0.05)。本研究揭示,槲皮素能够减轻CVB3诱导的心肌细胞损伤、氧化应激及凋亡,且该作用与激活PI3K/AKT通路有关。 展开更多

关键词 病毒性心肌炎 柯萨奇病毒b3(cvb3) 槲皮素 氧化应激 凋亡

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心安颗粒对病毒性心肌炎小鼠IL-6,TNF-α及病毒复制的影响 被引量：7

8

作者 陶莉莉 杨思进 +1 位作者 白雪 杨燕妮 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期135-140,共6页

目的:研究心安颗粒对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的柯萨奇B3病毒(CVB3)mRNA,白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:将60只健康雄性BALB/c小鼠随机分为6组,空白组、模型组、利巴韦林组(阳性药物,0.... 目的:研究心安颗粒对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的柯萨奇B3病毒(CVB3)mRNA,白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。方法:将60只健康雄性BALB/c小鼠随机分为6组,空白组、模型组、利巴韦林组(阳性药物,0.02 g·kg-1·d-1)和心安颗粒高、中、低剂量组(12,6,3 g·kg-1·d-1),其中空白组腹腔接种0.15 m L生理盐水,其余5组均腹腔接种1×10-8TCID50·m L-1CVB3 Nancy标准病毒液0.15 m L,进行模型制备。造模2 h后对各给药组小鼠灌胃(ig)相应药物,空白组和模型组小鼠ig生理盐水,连续7 d。7 d后小鼠进行实验,观察小鼠心肌组织病理变化,并进行评分;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌组织中CVB3 mRNA水平和蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α,IL-6蛋白表达。结果:给药7 d后,与空白组比较,模型组心肌细胞排列紊乱,出现间质水肿,可见大量炎症细胞浸润,发生明显病变,心肌病变评分和心肌组织中CVB3 mRNA表达水平和IL-6,TNF-α蛋白水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠心肌组织病变得到改善,病理评分和心肌组织中CVB3 mRNA和TNF-α,IL-6蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:心安颗粒可明显下调病毒性心肌炎模型小鼠心肌组织中CVB3 mRNA和TNF-α,IL-6蛋白水平的表达,推测是其防治病毒性心肌炎的作用机制之一。 展开更多

关键词 病毒性心肌炎 心安颗粒 柯萨奇病毒b3(cvb3) 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-6

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瓜蒌皮激活PI3K/PKB通路减轻柯萨奇病毒感染心肌细胞损伤的实验研究 被引量：3

9

作者 邱清勇 刘大勇 +2 位作者 彭锦 吕秋 杜兰雪 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1036-1042,共7页

柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎最常见的病毒株,感染心肌细胞后能够激活细胞凋亡、引起细胞损伤;已有研究证实,瓜蒌皮激活磷脂酰肌醇3⁃激酶(Phosphatidylinositol 3⁃kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B,... 柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)是引起病毒性心肌炎最常见的病毒株,感染心肌细胞后能够激活细胞凋亡、引起细胞损伤;已有研究证实,瓜蒌皮激活磷脂酰肌醇3⁃激酶(Phosphatidylinositol 3⁃kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B,PKB)通路减轻缺氧/复氧引起的心肌细胞凋亡,但瓜蒌皮对CVB3感染引起心肌细胞凋亡的调节作用及机制尚不清楚。因此,本研究将观察瓜蒌皮激活PI3K/PKB通路减轻柯萨奇病毒感染心肌细胞损伤的作用。在培养心肌H9c2细胞后分组,对照组给予不含药物及病毒的培养基,CVB3组给予含有CVB3病毒液的培养基,瓜蒌皮组含有CVB3病毒液及瓜蒌皮提取物的培养基,瓜蒌皮+抑制剂组含有CVB3病毒液、瓜蒌皮提取物及抑制剂LY294002的培养基。检测培养基中乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase,LDH)及磷酸肌酸激酶同工酶(Creatine phosphokinase⁃isoenzyme⁃MB,CK⁃MB)的含量、细胞活力A490、细胞凋亡率、细胞中cleaved caspase⁃9、cleaved caspase⁃3、p⁃PI3K、p⁃PKB的表达。结果显示,与对照组比较,CVB3组培养基中LDH、CK⁃MB的含量、细胞凋亡率、细胞中天冬氨酸蛋白水解酶⁃9(cleaved caspase⁃9,cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase⁃9)、cleaved caspase⁃3的表达均增加,A490及细胞中p⁃PI3K、p⁃PKB的表达均降低(P<0.05);与CVB3组比较,瓜蒌皮组培养基中LDH、CK⁃MB的含量、细胞凋亡率、细胞中cleaved caspase⁃9、cleaved caspase⁃3的表达均降低,A490及细胞中p⁃PI3K、p⁃PKB的表达均增加(P<0.05);与瓜蒌皮组比较,瓜蒌皮+抑制剂组培养基中LDH、CK⁃MB的含量、细胞凋亡率、细胞中cleaved caspase⁃9、cleaved caspase⁃3的表达均增加,A490及细胞中p⁃PI3K、p⁃PKB的表达均降低(P<0.05)。以上结果表明,瓜蒌皮提取物能够减轻CVB3感染心肌细胞的损伤及凋亡,激活PI3K/PKB通路是可能的分子机制。本研究首次发现瓜蒌皮提取物对CVB3感染� 展开更多

关键词 病毒性心肌炎 柯萨奇病毒b3(cvb3) 瓜蒌皮 凋亡 PI3K/PKb通路

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细胞自噬促进柯萨奇病毒B3复制的研究 被引量：2

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作者 罗小暖 宋娟 +7 位作者 宋芹芹 夏冬 史冰田 刘宓 夏志强 王晓乐 秘春景 韩俊 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-5,共5页

本研究探索柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)感染引起的自噬与病毒复制之间的关系。CVB3感染HeLa细胞,并在病毒感染后6 h、8 h和10 h时检测LC3-Ⅰ蛋白、LC3-Ⅱ蛋白和p62蛋白的表达水平。结果显示CVB3病毒感染促使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比... 本研究探索柯萨奇病毒B3(Coxsackievirus B3,CVB3)感染引起的自噬与病毒复制之间的关系。CVB3感染HeLa细胞,并在病毒感染后6 h、8 h和10 h时检测LC3-Ⅰ蛋白、LC3-Ⅱ蛋白和p62蛋白的表达水平。结果显示CVB3病毒感染促使LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,同时降低p62蛋白的表达。分别将自噬诱导剂雷帕霉素(Rapamy-cin)、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine,3MA)或溶酶体抑制剂阿洛司他丁(Aloxistatin,E46D)预处理HeLa细胞2 h,CVB3感染药物处理细胞并在病毒感染6 h后收集细胞、检测CVB3病毒VP1蛋白的表达。结果显示雷帕霉素和E64D促使CVB3病毒VP1蛋白表达增加,而3MA降低CVB3病毒VP1蛋白的表达。本研究得出结论 CVB3病毒感染诱导自噬进而促进病毒复制。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒b3(cvb3) 自噬 病毒复制

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柯萨奇病毒B3(CVB3)通过激活NADK2促进小鼠巨噬细胞NLRP3的活化

11

作者 桑瑞 魏金环 +3 位作者 潘静莹 杨日云 毛立明 包璟崟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期34-40,共7页

目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细... 目的研究在柯萨奇病毒B3(CVB3)刺激下,小鼠巨噬细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)表达的变化及机制。方法CVB3刺激RAW264.7细胞、小鼠原代(骨髓来源或腹腔)巨噬细胞以及感染NLRP3短发夹RNA(shRNA-NLRP3)慢病毒的RAW264.7细胞,实时荧光定量PCR检测NLRP3和白细胞介素1β(IL-1β)表达水平;ELISA检测细胞上清中IL-1β的含量;Western blot法检测NLRP3蛋白的变化,免疫共沉淀(Co-IP)法检测NLRP3相互作用蛋白的表达。结果CVB3刺激RAW264.7细胞、骨髓来源或腹腔巨噬细胞后,NLRP3和IL-1β表达明显升高;下调NLRP3后,IL-1β分泌明显减少;NLRP3抗体Co-IP所得复合物银染,组间差异蛋白经质谱分析鉴定为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2),证明CVB3诱导NADK2与NLRP3相互作用。结论CVB3通过激活NADK2促进巨噬细胞NLRP3活化,增加炎症因子IL-1β表达和释放。 展开更多

关键词 含pyrin结构域NOD样受体家族蛋白3(NLRP3) 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸激酶2(NADK2) 柯萨奇病毒b3(cvb3) 巨噬细胞

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柯萨奇病毒B3感染HeLa细胞后mTOR通路部分信号蛋白表达的变化 被引量：1

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作者 张娟 李欣 +4 位作者 杨丽 田朗 邢晓为 黄利华 杨作成 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1-8,共8页

目的研究柯萨奇病毒B3(CVB3)感染宫颈癌细胞株(HeLa)后mTOR通路中信号分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)、p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化真核细胞翻译起... 目的研究柯萨奇病毒B3(CVB3)感染宫颈癌细胞株(HeLa)后mTOR通路中信号分子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)、p70S6激酶(p70S6K)、磷酸化真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)、磷酸化p70S6激酶(p-p70S6K)等蛋白表达的变化。方法 CVB3感染Hela细胞后3、6、9、12和24 h作为病毒组,未被CVB3感染的同时间点细胞作为对照组;运用Western blotting检测mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、4EBP1、p-4EBP1表达的变化。结果①CVB3感染Hela细胞后,不同时间点感染后的mTOR、p-mTOR、4EBP1、p70S6K、p-4EBP1、p-p70S6K表达含量变化及与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②通过直线相关性分析发现,病毒组mTOR与p70S6K蛋白表达之间具有正相关关系,对照组间无相关关系;病毒组mTOR与4EBP1蛋白表达之间具有负相关关系,而对照组具有正相关关系;两组间的mTOR与p-mTOR均具有正相关关系,病毒组p70S6K与p-p70S6K蛋白表达具有正相关关系,对照组无相关关系。病毒组4EBP1与p-4EBP1蛋白表达无明显相关,对照组具有正相关关系。结论 CVB3感染HeLa细胞后可抑制mTOR/p70S6K通路,激活mTOR/4EBP1通路调控细胞的生长。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒b3(cvb3) MTOR 磷酸化 信号通路

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SiRNA抑制柯萨奇B_3病毒的复制和表达 被引量：1

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作者 刘松兰 魏全 +1 位作者 刘正湘 刘曌宇 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期529-533,共5页

目的研究观察体外合成siRNA对培养HELA细胞中柯萨奇B3病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)的影响。方法根据siRNA靶序列设计原则,针对编码CVB3病毒聚合酶、VP1蛋白和5非编码区基因组,特异性地体外合成三对siRNA,同时合成一对与CVB基因组序列... 目的研究观察体外合成siRNA对培养HELA细胞中柯萨奇B3病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)的影响。方法根据siRNA靶序列设计原则,针对编码CVB3病毒聚合酶、VP1蛋白和5非编码区基因组,特异性地体外合成三对siRNA,同时合成一对与CVB基因组序列无关的阴性对照siRNA。利用脂质体转染进入Hela细胞,用CVB3感染培养HELA细胞,观察转染后HELA细胞病变;采用RT-PCR技术检测感染CVB3各组的病毒RNA;用免疫荧光技术检测各组CVB3蛋白的表达;并用培养细胞上清液再感染HELA细胞观察病毒滴度。结果针对CVB3病毒聚合酶的siR-NA能有效的抑制病毒的复制和CVB3蛋白的表达,并能抑制病毒的再感染;而针对VP1蛋白和5非编码区的siRNA能部分抑制病毒的复制和CVB3蛋白的表达。结论我们设计合成针对编码CVB3病毒聚合酶基因组的siRNA能有效抑制CVB3病毒复制和表达。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒b3(cvb3) RNA干扰 沉默RNA

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化学合成siRNA体外对柯萨奇B_3病毒的影响

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作者 丁英俊 刘松兰 +1 位作者 廖玉华 董继华 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2004年第4期204-208,共5页

目的　RNA干扰是近年来研究基因功能的重要工具。本研究是在培养HELA细胞中 ,体外化学合成siRNA (smallinterferingRNA)对柯萨奇B3病毒 (CoxsackievirusB3,CVB3)的影响 ,探讨RNA干扰的抗病毒效应与其应用前景。方法　根据siRNA靶序列设... 目的　RNA干扰是近年来研究基因功能的重要工具。本研究是在培养HELA细胞中 ,体外化学合成siRNA (smallinterferingRNA)对柯萨奇B3病毒 (CoxsackievirusB3,CVB3)的影响 ,探讨RNA干扰的抗病毒效应与其应用前景。方法　根据siRNA靶序列设计原则 ,设计了一段针对编码CVB3病毒VP4蛋白基因组的siRNA ,并在体外通过化学合成形成siRNA。同时合成一段与CVB基因组序列无关的阴性对照siRNA。用CVB3感染培养HELA细胞 ,将其分为 3组 ,即siRNA组 (n =8) ,阴性siRNA组(n =8) ,病毒对照组 (n =8) ,分别观察转染后第 1天到第 5天的细胞病变 ,并与未感染CVB3的空白对照组进行比较 ;采用RT PCR技术检测感染CVB3各组的病毒RNA片断 ,观察病毒RNA与内参GAPDH的OD比值 ;用免疫荧光技术检测各组CVB3蛋白的表达。结果　RT PCR检测各组CVB3病毒5 端非编码区 (5 UTR)RNA ,siRNA组与阴性siRNA组和病毒对照组比较无明显变化 (p >0 0 5 ) ;免疫荧光检测各组CVB3病毒蛋白也未见显著差异 ;细胞病理效应 (cytophaticeffects,CPE)各组间未见明显差异。结论　本文选择针对编码CVB3病毒VP4蛋白基因组的siRNA未能抑制CVB3病毒复制。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒b3(cvb3) RNA干扰 SIRNA

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