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具有广谱偶氮还原能力柠檬酸菌AzoR-2的分离鉴定和还原特性研究 被引量：3
1
作者 洪义国 郭俊 +2 位作者 王敏妮 许玫英 孙国萍 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1397-1403,共7页
从印染活性污泥中分离到1株高效广谱偶氮还原菌AzoR-2,并对该菌株进行了鉴定和偶氮还原特性分析.通过细胞形态和BIOLOG细菌自动鉴定系统的生理生化特性及16S rDNA与β-内酰胺酶基因相结合的分子生物学特性的分析,鉴定该菌株为柠檬酸菌... 从印染活性污泥中分离到1株高效广谱偶氮还原菌AzoR-2,并对该菌株进行了鉴定和偶氮还原特性分析.通过细胞形态和BIOLOG细菌自动鉴定系统的生理生化特性及16S rDNA与β-内酰胺酶基因相结合的分子生物学特性的分析,鉴定该菌株为柠檬酸菌属细菌,定名为Citrobactersp.AzoR-2.通过对其偶氮还原特性的研究表明,菌株AzoR-2能够在厌氧条件下利用多种有机物和氢气为电子供体还原多种偶氮化合物,具有广谱偶氮还原特征.对电子供体和偶氮键的定量分析表明,还原过程中偶氮键接受的电子全部来自一级电子供体.氧气对其偶氮还原具有强烈的抑制作用.该菌株的偶氮还原系统定位在菌体的细胞膜上,推测该菌株的偶氮还原与菌体膜上的电子传递过程密切相关.菌株AzoR-2的厌氧偶氮还原在碱性pH值范围发生,其反应的最适pH值为7.5.菌株偶氮还原要求的温度范围较宽泛,在20-40℃范围内都显还原活性,最适作用温度为35℃.具有偶氮还原能力的柠檬酸菌在受偶氮染料污染的环境以及在印染废水的脱色中,可以发挥重要作用. 展开更多
关键词 柠檬酸菌 16SrDNA β-内酰氨酶基因 偶氮还原
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中性柠檬酸菌对几种常见藻类生长的他感作用 被引量：16
2
作者 袁峻峰 孟智芳 +2 位作者 陈德辉 葛东凌 章宗涉 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 1999年第4期12-15,共4页
在４５００～４８００ｌｕｘ光照，２６～２８℃的培养条件下，从绿裸藻（Ｅｕｇｌｅｎａｖｉｒｉｄｉｓ）水华中分离的优势菌种之一中性柠檬酸菌（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）的分泌物对斜生栅藻（Ｓｃｅｎｅｄｅ... 在４５００～４８００ｌｕｘ光照，２６～２８℃的培养条件下，从绿裸藻（Ｅｕｇｌｅｎａｖｉｒｉｄｉｓ）水华中分离的优势菌种之一中性柠檬酸菌（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒｉｎｔｅｒｍｅｄｉｕｓ）的分泌物对斜生栅藻（Ｓｃｅｎｅｄｅｓｍｕｓｏｂｌｉｑｕｕｓ）、粉核小球藻（Ｃｈｌｏｒｅｌａｐｙｒｅｎｏｉｄｏｓａ）、羊角月牙藻（Ｓｅｌｅｎａｓｔｒｕｍｃａｐｒｉｃｏｒｍｕｔｕｍ）、水华鱼腥藻（Ａｎａｂａｅｎａｆｌｏｓ－ａｑｕａｅ）和易变鱼腥藻（Ａｎａｂａｅｎａｖｑｒｉａｂｉｌｉｓ）的生长有促进作用；对银灰平裂藻（Ｍｅｒｉｓｍｏｐｅｄｉａｇｌａｕｃａ）、莱茵衣藻（Ｃｈｌａｍｙｄｏｎｏｎａｓｒｅｉｎｈａｒｄｉ）和铜绿微囊藻（Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｓａｅｒｕｇｉｕｏｓａ）的生长具有抑制作用。中性柠檬酸菌胞外分泌物能促进粉核小球藻细胞个体的长大，对其他藻类主要是影响细胞的大小。中性柠檬酸菌对不同藻类影响的差异对水华过程可能具有重要意义。 展开更多
关键词 藻类 中性柠檬酸菌 抑制作用 促生作用 水华
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弗氏柠檬酸菌甘油脱水酶基因在大肠杆菌中的克隆和表达 被引量：4
3
作者 齐向辉 朱绮霞 +2 位作者 韦宇拓 黄鲲 黄日波 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期10-13,共4页
以弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)基因组DNA为模板,通过PCR得到甘油脱水酶(glycerol dehydratase)基因dhaB、dhaC、dhaE,克隆到表达载体pSE380上,得到重组质粒pSE-dhaBCE。将此重组质粒转化到E.coliJM109中,重组菌株SDS-PAGE结果... 以弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)基因组DNA为模板,通过PCR得到甘油脱水酶(glycerol dehydratase)基因dhaB、dhaC、dhaE,克隆到表达载体pSE380上,得到重组质粒pSE-dhaBCE。将此重组质粒转化到E.coliJM109中,重组菌株SDS-PAGE结果显示有明显的61kD、22kD、16kD三条特异性蛋白条带出现。重组菌株经诱导表达,酶活力为11.59U/mL。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸菌 甘油脱水酶 克隆 表达 克隆和表达 酶基因 柠檬酸 大肠杆菌 SDS-PAGE 基因组DNA
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一株溶藻细菌的筛选及鉴定 被引量：3
4
作者 张洪铭 普连仙 张胜花 《环境科学导刊》 2018年第2期42-45,共4页
从景观水体中筛选出具有溶藻作用的细菌,并对其抑藻效果和生理生化特征进行了初步研究,研究结果表明:溶藻效果随着菌液浓度的增加而增加,同时确定该菌株通过分泌胞外物质进行溶藻,经鉴定为柠檬酸菌属的一种。
关键词 溶藻细菌 筛选 鉴定 柠檬酸菌属 溶藻效果
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弗氏柠檬酸菌dhaT基因的克隆表达、序列分析、酶的纯化及特性研究 被引量：1
5
作者 齐向辉 罗兆飞 +5 位作者 韦宇拓 陈发忠 王珊珊 侯守海 廖东庆 黄日波 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期42-47,共6页
1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PD)是一种重要的化工原料,越来越受到广泛的关注。以弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)基因组DNA为模板,通过PCR得到1,3-丙二醇氧化还原酶(1,3-propanediol dehydrogenase,PDOR)的基因dhaT,序列显示... 1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PD)是一种重要的化工原料,越来越受到广泛的关注。以弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)基因组DNA为模板,通过PCR得到1,3-丙二醇氧化还原酶(1,3-propanediol dehydrogenase,PDOR)的基因dhaT,序列显示与来源于C．freundii DSM 30040 (Genbank U09771)相应基因的相似性为78％。将此基因构建于表达载体pSE380,得到重组质粒pSE-dhaT。重组质粒转化到宿主菌E．coli JM109中进行了表达,重组酶通过镍柱及Sephacral S- 300进行纯化,重组酶SDS-PAGE结果显示有非常明显的单一的42kDa特异性蛋白条带出现。以丙醛为底物测定重组酶还原反应的最适温度为37℃、最适pH为8．0,对丙醛的Km值为10．05mmol／L,最大反应速度Vmax为37．27μmoL／min／mg;以1,3-PD为底物测定重组酶氧化反应的最适温度为25℃、最适pH为10．5,对1,3-PD的Km值为1．28mmob／L,最大反应速度Vmax为25．55μmol／min／mg。重组酶的还原反应比活为49．50U／mg,氧化反应比活为79．72U／mg。该酶同样具有假定的结合Fe2+的G-X-X-H-X-X-A-H-X-X-G-X-X-X-X-X-P-H-G模体保守结构。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸菌 1 3-丙二醇氧化还原酶 克隆 表达 纯化
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弗氏柠檬酸菌1,3-丙二醇合成的代谢工程研究
6
作者 于越 郭文逸 +1 位作者 王居立 杨洪江 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期451-459,共9页
【目的】研究弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)1,3-丙二醇合成的代谢过程。【方法】构建甘油脱氢酶基因GSR-lac Z、1,3-丙二醇氧化还原酶基因PDO-lac Z和甘油脱水酶基因GL-lac Z等报告基因。在此基础上,构建3个相应的转座子突变文库... 【目的】研究弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)1,3-丙二醇合成的代谢过程。【方法】构建甘油脱氢酶基因GSR-lac Z、1,3-丙二醇氧化还原酶基因PDO-lac Z和甘油脱水酶基因GL-lac Z等报告基因。在此基础上,构建3个相应的转座子突变文库。【结果】筛选到6株突变子,其相应关键酶表达水平提高1-11倍,1,3-丙二醇产量提高幅度为3%-50%。对转座子插入位点分析显示,5株突变子插入位点均为β-内酰胺酶(CKO_02592)编码基因,1株突变子插入位点为二氢硫辛酰胺基转移酶(CKO_02433)编码基因。进一步分析发现,β-内酰胺酶基因突变显著提高甘油脱水酶和甘油脱氢酶的表达水平,而1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平没有变化;二氢硫辛酰胺基转移酶基因突变显著提高1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平,其他两种关键酶基因表达水平不变。【结论】β-内酰胺酶和二氢硫辛酰胺基转移酶基因能够分别影响1,3-丙二醇合成代谢途径关键酶的表达,为构建工程菌株打下基础。 展开更多
关键词 转录融合报告基因 转座子突变文库 弗氏柠檬酸菌 1 3-丙二醇
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激光复合诱变选育木薯原料柠檬酸高产菌 被引量：10
7
作者 洪厚胜 刘辰 +4 位作者 薛业敏 倪建华 许军 吴健 刘建江 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期41-44,共4页
以柠檬酸生产菌黑曲霉 (Aspergillusniger) Wm -0 1为出发菌株 ,通过60 Co γ射线、硫酸二乙脂 (DES)及激光的复合诱变 ,采用高酸、高渗培养基筛选 ,从 2 46株突变株中筛选出一株木薯粉柠檬酸发酵高产菌株Wm 1 0 16,其发酵温度为 (3 9&#... 以柠檬酸生产菌黑曲霉 (Aspergillusniger) Wm -0 1为出发菌株 ,通过60 Co γ射线、硫酸二乙脂 (DES)及激光的复合诱变 ,采用高酸、高渗培养基筛选 ,从 2 46株突变株中筛选出一株木薯粉柠檬酸发酵高产菌株Wm 1 0 16,其发酵温度为 (3 9± 1)℃ ,周期 72h ,2 2 %木薯粉摇瓶 (平均总糖 17 9% ) ,产酸平均达 17 2 % ,15 0m3 大罐实验产酸 16 13 5 % ,周期 67h。 展开更多
关键词 激光复合诱变选育 木薯 柠檬酸高产菌 育种
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汽爆预处理对柠檬酸发酵菌渣制备氨基葡萄糖盐酸盐的影响 被引量：1
8
作者 张传惠 《化学与生物工程》 CAS 2020年第6期58-61,共4页
以柠檬酸发酵菌渣为原料,经汽爆预处理后,采用化学法制备氨基葡萄糖盐酸盐,研究了汽爆预处理对氨基葡萄糖盐酸盐收率的影响。结果表明,汽爆预处理可显著提高氨基葡萄糖盐酸盐的收率;在2.5 MPa下对柠檬酸发酵菌渣汽爆预处理90 s,氨基葡... 以柠檬酸发酵菌渣为原料,经汽爆预处理后,采用化学法制备氨基葡萄糖盐酸盐,研究了汽爆预处理对氨基葡萄糖盐酸盐收率的影响。结果表明,汽爆预处理可显著提高氨基葡萄糖盐酸盐的收率;在2.5 MPa下对柠檬酸发酵菌渣汽爆预处理90 s,氨基葡萄糖盐酸盐的收率较未经汽爆预处理提高了(88.89±7.32)%,纯度达到93.14%;汽爆预处理副产物中可溶性总糖和可溶性总蛋白含量分别达到6.44%和9.37%,可回收重复利用。为柠檬酸废弃物的高值化利用及菌体氨糖的新工艺开发提供了借鉴。 展开更多
关键词 柠檬酸发酵菌渣 汽爆预处理 氨基葡萄糖盐酸盐 可溶性成分
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