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斑马鱼卵黄脂磷蛋白在早期胚胎中促进L1-ORF2诱导的EGFP报告基因表达
1
作者 王文霞 王晓蝶 +7 位作者 武崇光 Luqman ALI 耿琦 张国忠 冯旭 杨悦成 王秀芳 吕占军 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第5期939-953,共15页
为了探讨长散布核元件-1(long interspersed nuclear element-1,L1)在胚胎早期高表达的分子机制,将人L1的第二个开放阅读框(open reading frame 2,ORF2)(L1-ORF2,该文中简称ORF2),插入到pEGFP-C1质粒(C1)的EGFP基因下游,生成C1-ORF2表... 为了探讨长散布核元件-1(long interspersed nuclear element-1,L1)在胚胎早期高表达的分子机制,将人L1的第二个开放阅读框(open reading frame 2,ORF2)(L1-ORF2,该文中简称ORF2),插入到pEGFP-C1质粒(C1)的EGFP基因下游,生成C1-ORF2表达载体,插入的ORF2可以影响EGFP报告基因的表达。将C1-ORF2等表达载体注射到斑马鱼(Danio rerio)早期胚胎中,结果表明,在所使用的表达载体中,只有插入ORF2的表达载体诱导EGFP报告基因高表达。C1-ORF2表达载体诱导的EGFP荧光强度随着胚胎的发育而显著降低。EGFP荧光报告蛋白在C1-ORF2中的表达受到组蛋白的抑制,0 h胚胎溶卵液(简称胚胎溶卵液)能减弱组蛋白对EGFP表达的抑制作用,从胚胎溶卵液中纯化的卵黄脂磷蛋白(lipovitellin,Lv)的作用强于胚胎溶卵液。凝胶阻滞实验表明,ORF2 DNA能与胚胎溶卵液蛋白、组蛋白和Lv结合。改变组蛋白、Lv和ORF2片段三者的添加顺序,结果证明Lv可以结合ORF2片段和组蛋白,从而干扰组蛋白与ORF2的结合。进一步研究发现,Lv增加了C1-ORF2 DNA对DNase I消化的敏感性。该研究获得以下结论:Lv可以与所有检测的DNA片段结合,但与ORF2的结合比与其他DNA片段的结合亲和力更高。Lv通过提高ORF2 DNA染色质的易接近性,激活ORF2诱导的斑马鱼早期胚胎EGFP基因的表达。 展开更多
关键词 长散布核元件-1 斑马鱼(Danio rerio)早期胚胎 卵黄脂磷蛋白 凝胶阻滞实验 染色质重组 体外转录
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DNA双链断裂处染色质重组机制 被引量：1
2
作者 纳小凡 姬明飞 岳岩磊 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2013年第12期21-23,共3页
DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)的修复过程包括DNA断裂处染色质结构变化、DNA修复蛋白复合物的形成以及染色质构型的重新恢复等过程。因此,DSB周围包裹的核小体及其染色质构型对断裂处DNA的修复产生一定影响。该文通过从D... DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)的修复过程包括DNA断裂处染色质结构变化、DNA修复蛋白复合物的形成以及染色质构型的重新恢复等过程。因此,DSB周围包裹的核小体及其染色质构型对断裂处DNA的修复产生一定影响。该文通过从DSBs处开放而松弛的染色质结构的形成机制和DNA修复蛋白在DSB特定区域的募集过程,综述了真核细胞DSB修复的早期事件,以期为研究植物DSB修复过程中表观遗传修饰机制、植物耐逆机制以及作物诱变育种提供新的思路和方向。 展开更多
关键词 DNA双链断裂 染色质重组 DNA修复
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睾丸特异性含溴结构域的蛋白作为潜在男性抗生育药物靶标的研究进展 被引量：2
3
作者 高娜娜 王慧萍 《生殖医学杂志》 CAS 2014年第8期684-688,共5页
哺乳动物的四种含溴结构域蛋白(BET)基因在精子发生不同阶段均有表达,其中睾丸特异表达的bromodomain-containing protein(BRDT)对精子发生必不可少。BRDT在核染色质重组中起关键作用,也参与基因转录和共转录调节。BRDT的第一个溴结构... 哺乳动物的四种含溴结构域蛋白(BET)基因在精子发生不同阶段均有表达,其中睾丸特异表达的bromodomain-containing protein(BRDT)对精子发生必不可少。BRDT在核染色质重组中起关键作用,也参与基因转录和共转录调节。BRDT的第一个溴结构域缺失导致圆形精子细胞错误伸长、精子形态严重缺陷,而圆形精子细胞的错误伸长与减数分裂之后染色质结构异常相关。另外,BRDT是形成圆形精子细胞染色质核仁所必需的;精母细胞和精子细胞缺乏全长的BRDT将会导致转录和可变剪接过程发生改变。动物实验证实一种小分子的BRDT抑制剂(JQ1),具有良好的抗生育作用,这为进一步开发可逆的男性抗生育药物开辟了新思路。 展开更多
关键词 睾丸特异性含溴结构域的蛋白 精子发生 男性抗生育 核染色质重组
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染色质重组试管婴儿 被引量：1
4
作者 曹佐武 《自然杂志》 北大核心 2001年第5期277-280,共4页
日益发展的体外受精技术正广泛应用于临床不孕症的治疗 ,但可能造成缺陷基因下传 .胚胎着床前遗传诊断技术可早期诊断胚胎遗传缺陷 ,减少遗传病胎儿的妊娠 ,但不能修正患儿的基因缺陷 .在此 ,作者提出染色质重组试管婴儿的构想 ,即在体... 日益发展的体外受精技术正广泛应用于临床不孕症的治疗 ,但可能造成缺陷基因下传 .胚胎着床前遗传诊断技术可早期诊断胚胎遗传缺陷 ,减少遗传病胎儿的妊娠 ,但不能修正患儿的基因缺陷 .在此 ,作者提出染色质重组试管婴儿的构想 ,即在体外受精时剔除有缺陷的染色体 ,再植入其他个体相应的正常染色体 ,从而达到修正胎儿遗传缺陷 。 展开更多
关键词 染色质重组试管婴儿 体外受精 遗传病胎儿 缺陷基因 遗传诊断
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