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题名稳定遗传的染色体组合整合酿酒酵母重组菌株的构建
被引量：2
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作者
左颀
赵心清
刘海军
胡世洋
马中义
白凤武
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机构
大连理工大学生命科学与技术学院
中国石油天然气股份有限公司吉林石化公司研究院
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出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第4期669-673,共5页
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基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(Nos.2012AA021205
2012AA101805)
+1 种基金
教育部新世纪优秀人才支持计划(No.NCET-11-0057)
国家国际科技合作专项(No.2013DFA60470-1)资助~~
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文摘
染色体整合表达可获得稳定遗传的基因工程菌,是工业酿酒酵母育种的重要手段。pAUR135整合载体是抗生素标记基因可循环使用的载体,添加特定的同源臂后可构建在酵母染色体上稳定遗传的菌株。目前对酵母菌的分子育种常需要对多个基因进行过表达,利用pAUR135载体可将不同基因分别整合在不同染色体或相同染色体的不同位点,这种组合整合表达方法可对不同基因的表达强度比例进行调节,构建表型优化的工业酿酒酵母菌株。本研究以木糖代谢途径基因为例,构建了3个pAUR135整合载体,将3个木糖代谢基因依次整合到工业酿酒酵母染色体的不同位点,获得了染色体组合整合表达的代谢工程菌株。与将这3个基因整合在同一个位点的对照重组菌株相比,染色体组合整合的重组菌株木糖利用率提高了24.4%–35.5%。多基因染色体组合整合方法从新的角度对工业酵母进行代谢工程改造,所获得的工程菌株不带有任何外来基因和选择标记,可以保持性状的稳定,是工业酿酒酵母分子育种的新方法。
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关键词
同源重组
pAUR135整合载体
工业酿酒酵母
染色体组合整合
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Keywords
homologous recombination, pAUR135 vector, industrial Saccharomyces cerevisiae, combinational chromosomalintegration
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分类号
Q933
[生物学—微生物学]
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