-
题名大链壶菌和卡地腐霉的Pr1和Pr2类蛋白酶的研究
被引量：6
- 1
-
-
作者
苏晓庆
-
机构
贵阳医学院生物学教研室
-
出处
《贵阳医学院学报》
CAS
2002年第5期377-380,共4页
-
基金
国家 8 63计划资助项目 (1 0 2 j99 0 2 )
-
文摘
目的 :证实灭蚊真菌大链壶菌和卡地腐霉经诱导可产生枯草杆菌蛋白酶类蛋白酶 (Pr1)和胰蛋白酶类蛋白酶 (Pr2 )。方法 :采用特异性底物测定、X光胶片印迹试验、含底物的硝酸纤维薄膜试验等多种方法对蚊虫体壁类似物———几丁质诱导前后培养液中酶的活性进行检测和比较。结果 :大链壶菌和卡地腐霉均可产生Pr1和Pr2类蛋白酶。并且 ,经几丁质诱导 30～ 6 0h后 ,卡地腐霉产生的Pr1和Pr2类蛋白酶及大链壶菌产生的Pr2类蛋白酶活性均明显增高。并通过对培养液进行冷冻干燥、等电聚焦电泳和脱盐等处理 ,对该蛋白酶进行了初步纯化。结论 :大链壶菌和卡地腐霉均可产生Pr1和Pr2类蛋白酶。几丁质对这些类蛋白酶的释放有诱导作用。
-
关键词
灭蚊
真菌
生物学害虫防治
大链壶菌
卡地腐霉
枯草杆菌蛋白酶类蛋白酶
胰蛋白酶类蛋白酶
-
Keywords
mosquito control
fungi
pest control,biological
Lagenidium giganteum
Pythium carolinianum
subtilisin like proteases
trypsin like proteases
-
分类号
R184.31
[医药卫生—流行病学]
-
-
题名卡地腐霉Pr1蛋白酶cDNA片段的分离和克隆
被引量：3
- 2
-
-
作者
施晓鋆
苏晓庆
-
机构
贵阳医学院生物学教研室
-
出处
《贵阳医学院学报》
CAS
2003年第1期1-4,共4页
-
基金
国家 8 63计划资助项目 (1 0 2 j99 0 2 )
-
文摘
目的 :分离和克隆灭蚊真菌卡地腐霉 (Pythiumcarolinianum)Pr1蛋白酶 (subtilisin likeprotease)的cDNA片段。方法 :用 1%的几丁质悬液诱导培养卡地腐霉菌丝 30h ,然后按下述流程操作 :抽提菌丝的总RNA ;逆转录合成cDNA第一链 ;根据Pr1的保守氨基酸序列设计合成一对简并引物 ,以cDNA第一链为模板 ,用MOPAC方法 (MixedoligonucleotidesprimedamplificationofcDNA)扩增cDNA ;将扩增产物纯化、连入pGEM T载体 ,转化大肠杆菌DH5α用于测序。结果 :所获片段中 ,1个 5 30bp的cDNA片段与枯草杆菌类蛋白酶基因有较高的相似性 ,尤其与真菌Aphanomycesastaci (卵菌纲、水霉目 )的Pr1在核苷酸序列及翻译得到的氨基酸序列水平有较高的相似性 ,分别为 5 9%和 4 9%。此序列已登录Genbank数据库 ,检索号 :AF4 990 0 6。P .car olinianum与A .astaciPr1部分cDNA序列的比对亦登录Genbank数据库 ,检索号 :AY0 94 976 ,AY0 94 977。结论 :这一DNA片段可能是卡地腐霉Pr1蛋白酶的一条cDNA片段。更进一步的工作是设法获得全长cDNA片段 ,并加以证实。
-
关键词
灭蚊
真菌
害虫防治
生物学
CDNA
卡地腐霉
枯草杆菌蛋白酶类蛋白酶
简并引物
-
Keywords
mosquito control
fungi
pest control,biological
cDNA
Pythium carolinianum
subtilisin like protease
degenerate primer
-
分类号
Q55
[生物学—生物化学]
R184.3
[医药卫生—流行病学]
-
