广西甜瓜细菌性果斑病病原鉴定及16S rDNA序列分析 被引量：11

1

作者 谢慧婷 李战彪 +4 位作者 秦碧霞 杨世安 崔丽贤 邓铁军 蔡健和 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1698-1703,共6页

【目的】对广西区内疑似甜瓜细菌性果斑病的病原菌进行分离鉴定,明确引起该病害的病原菌,为甜瓜细菌性果斑病的抗病育种及综合防治提供理论依据。【方法】分别采集南宁市和贺州市疑似甜瓜细菌性果斑病的病叶(编号:WM0922)和病果(编号:XD... 【目的】对广西区内疑似甜瓜细菌性果斑病的病原菌进行分离鉴定,明确引起该病害的病原菌,为甜瓜细菌性果斑病的抗病育种及综合防治提供理论依据。【方法】分别采集南宁市和贺州市疑似甜瓜细菌性果斑病的病叶(编号:WM0922)和病果(编号:XD0611)样品,对样品进行分离纯化,并通过测定分离菌株的致病性、观察菌落形态和培养性状、测定其生理生化性状及比对分析16S rDNA序列,对供试病原菌进行鉴定。【结果】从编号WM0922的病叶上分离得到5株菌株,经致病性测定有3株菌株(WM0922-2、WM0922-3和WM0922-4)具有致病性;从编号XD0611的病果上分离得到8株菌株,经致病性测定有4株菌株(XD0611-5、XD0611-6、XD0611-7和XD0611-8)具有致病性;择优选取具有代表性的菌株WM0922-3和XD061 1-7进行后续试验,发现二者均可侵染葫芦子叶,革兰氏反应均为阴性,培养性状及生理生化测定结果一致,对比分析16S rDNA基因序列,与Acidororax citrulli的相似性均在99%以上。【结论】引起甜瓜细菌性果斑病的病原菌为燕麦嗜酸菌西瓜亚种(A.avenae subsp.citrulli)。 展开更多

关键词 甜瓜 果斑病菌 病原菌鉴定 燕麦嗜酸菌西瓜亚种

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瓜类细菌性果斑病菌hrcN基因的生物学功能分析 被引量：10

2

作者 严婉荣 王铁霖 +2 位作者 杨玉文 戴良英 赵廷昌 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期33-40,共8页

以分离自西瓜上的Aac5菌株为例,通过同源重组的方法,构建了hrc N基因插入缺失突变体,通过PCR方法和Southern blot验证突变菌株,对突变体进行致病性、致敏性、生长曲线和运动性测定。为明确hrc N基因与其他基因的关系,通过实时荧光定量PC... 以分离自西瓜上的Aac5菌株为例,通过同源重组的方法,构建了hrc N基因插入缺失突变体,通过PCR方法和Southern blot验证突变菌株,对突变体进行致病性、致敏性、生长曲线和运动性测定。为明确hrc N基因与其他基因的关系,通过实时荧光定量PCR法定量检测了hrp A、hrc V、hrc U、Lux I、LuxR 5个基因的表达量。结果显示:与野生型相比,突变体致病力和致敏性明显减弱,致病时间延迟,群体感应信号减弱,生长能力明显下降,运动性减弱,互补菌株只能恢复部分功能;5个基因在突变体中的表达量均上调,hrc N基因与这5个基因之间均为负调控关系。说明hrc N基因在果斑病菌致病能力上发挥重要作用。 展开更多

关键词 果斑病菌 致病性 hrcN

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广东西瓜果斑病的病原鉴定 被引量：7

3

作者 任小平 李小妮 +3 位作者 王琳 孙嘉祥 吴九玲 刘琼光 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期40-43,共4页

在反季节种植的西瓜上发现1种新细菌病害,其症状与西瓜果斑病菌相似,通过病原菌的分离纯化,接种试验,菌体形态观察,染色反应、培养性状和生理生化特性测定,以及细菌的16S rDNA基因序列分析,确认该病原细菌为燕麦嗜酸菌西瓜亚种Acidovora... 在反季节种植的西瓜上发现1种新细菌病害,其症状与西瓜果斑病菌相似,通过病原菌的分离纯化,接种试验,菌体形态观察,染色反应、培养性状和生理生化特性测定,以及细菌的16S rDNA基因序列分析,确认该病原细菌为燕麦嗜酸菌西瓜亚种Acidovorax avenae subsp. citrulli. 展开更多

关键词 西瓜 果斑病菌 病原鉴定 燕麦噬酸菌西瓜亚种

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瓜类细菌性果斑病研究进展 被引量：41

4

作者 阎莎莎 王铁霖 赵廷昌 《植物检疫》 北大核心 2011年第3期71-76,共6页

瓜类细菌性果斑病是发生在甜瓜、西瓜等葫芦科植物上的一种严重的世界性病害,此病是典型的种传细菌性病害,病原为嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)。本文围绕瓜类细菌性果斑病菌的分离检测、致病机理、遗传多样性及防治等方面的研... 瓜类细菌性果斑病是发生在甜瓜、西瓜等葫芦科植物上的一种严重的世界性病害,此病是典型的种传细菌性病害,病原为嗜酸菌属西瓜种(Acidovorax citrulli)。本文围绕瓜类细菌性果斑病菌的分离检测、致病机理、遗传多样性及防治等方面的研究进展作一概述,阐明了瓜类细菌性果斑病的研究现状。 展开更多

关键词 瓜类细菌性果斑病菌 检测 致病机理 遗传多样性 防治

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免疫凝聚试纸条和TaqMan探针实时荧光PCR检测西瓜细菌性果斑病菌比较研究 被引量：30

5

作者 冯建军 许勇 +1 位作者 李健强 Norm W. SCHAAD 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期102-108,共7页

以西瓜细菌性果斑病菌（Acidovorax avenae subsp．citrulli）菌悬液和田间采集的病组织为试材，研究了免疫凝聚试纸条和实时荧光PCR技术检测的灵敏度和适应性。结果表明，免疫凝聚试纸条检测灵敏度为10^6 cfu／mL，具有简便、快速、易... 以西瓜细菌性果斑病菌（Acidovorax avenae subsp．citrulli）菌悬液和田间采集的病组织为试材，研究了免疫凝聚试纸条和实时荧光PCR技术检测的灵敏度和适应性。结果表明，免疫凝聚试纸条检测灵敏度为10^6 cfu／mL，具有简便、快速、易操作特点，适用于田间快速检测和病害诊断；TaqMan探针实时荧光PCR检测灵敏度达10^3～4 cfu／mL，比传统PCR检测灵敏度（10^5 cfu／mL）提高了10～100倍，且不需要琼脂糖凝胶电泳、溴化乙锭染色和Southern杂交。但需要昂贵的仪器和试剂，适用于室内检测及相关研究。 展开更多

关键词 西瓜 细菌性果斑病菌 免疫凝聚试纸检测 TAQMAN探针 实时荧光PCR检测

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63种杀菌剂对西瓜、甜瓜细菌性果斑病菌的室内毒力测定 被引量：29

6

作者 王雪 高洁 +3 位作者 张静 董春玲 白庆荣 杨丽娜 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期612-617,623,共7页

由燕麦噬酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,简称Aac)引起的西瓜、甜瓜细菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch,简称BFB)是西瓜、甜瓜生产上的一种毁灭性病害。目前资料上报道的一些药剂对果斑病菌的防效不尽一致,为明确这... 由燕麦噬酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,简称Aac)引起的西瓜、甜瓜细菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch,简称BFB)是西瓜、甜瓜生产上的一种毁灭性病害。目前资料上报道的一些药剂对果斑病菌的防效不尽一致,为明确这些药剂的防治效果及筛选更有效的药剂,试验采用抑菌圈法测定了63种杀菌剂对西瓜、甜瓜细菌性果斑病菌的室内毒力作用。结果表明:72%农用硫酸链霉素SPX等11种药剂对西瓜、甜瓜细菌性果斑病菌具有较好的抑制效果,抑菌圈平均直径>10.0mm;不同厂家生产的农用链霉素在相同浓度下抑菌效果明显不同;西瓜菌株和甜瓜菌株对同一药剂的敏感性也有较大差异。 展开更多

关键词 西瓜 甜瓜 细菌性果斑病菌 杀菌剂 毒力测定

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西瓜细菌性果斑病菌Taq Man探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立 被引量：12

7

作者 伍永明 张祥林 罗明 《新疆农业大学学报》 CAS 2006年第3期68-72,共5页

根据西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenaesubsp.citrulli)与相关细菌16S rDNA序列差异,设计出对西瓜细菌性果斑病菌具有稳定点突变特异性探针Aac-probe,利用该探针对23种供试菌株进行了实时荧光PCR检测实验。结果表明,只有西瓜细菌性... 根据西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenaesubsp.citrulli)与相关细菌16S rDNA序列差异,设计出对西瓜细菌性果斑病菌具有稳定点突变特异性探针Aac-probe,利用该探针对23种供试菌株进行了实时荧光PCR检测实验。结果表明,只有西瓜细菌性果斑病菌能检测到荧光增强信号,其它细菌无荧光增强信号。该方法特异性强,灵敏度高,重复性好,可有效地应用于西瓜细菌性果斑病菌的检测。 展开更多

关键词 TAQ Man探针 实时荧光PCR 西瓜细菌性果斑病菌 16S RDNA

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西瓜细菌性果斑病菌的室内药剂筛选试验 被引量：10

8

作者 黄武仁 文衍堂 《华南热带农业大学学报》 2001年第3期10-11,4,共3页

采用含毒介质法进行 6种杀菌剂对西瓜细菌性果斑病的室内毒力测定 ,结果表明 :链霉素、可杀得抑菌效果较好 ,抑菌最低有效浓度分别为 15 μg/mL和 15 0 μg/mL ;其次是细菌灵、细菌杀 ,抑菌有效浓度均为 30 0 μg/mL ,而叶青双、百菌清... 采用含毒介质法进行 6种杀菌剂对西瓜细菌性果斑病的室内毒力测定 ,结果表明 :链霉素、可杀得抑菌效果较好 ,抑菌最低有效浓度分别为 15 μg/mL和 15 0 μg/mL ;其次是细菌灵、细菌杀 ,抑菌有效浓度均为 30 0 μg/mL ,而叶青双、百菌清效果较差 ,抑菌最低有效浓度高达 60 0 μg/mL。 展开更多

关键词 西瓜 药剂筛选 细菌性果斑病菌 室内毒力测定 杀菌剂 燕麦嗜酸杆菌西瓜亚种

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西瓜细菌性果斑病菌的16S rDNA序列分析及特异性引物的设计 被引量：8

9

作者 张祥林 伍永明 +1 位作者 王翀 李碧佳 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期225-231,共7页

利用细菌16S rDNA基因的通用引物对16个供试菌株进行PCR扩增,把扩增产物进行核苷酸序列测定。将获得的序列与GenBank中相关菌株的16S rDNA序列进行同源性分析。以此设计出检测A.a.c的特异性引物,并利用最大简约法构建了16S rDNA系统演... 利用细菌16S rDNA基因的通用引物对16个供试菌株进行PCR扩增,把扩增产物进行核苷酸序列测定。将获得的序列与GenBank中相关菌株的16S rDNA序列进行同源性分析。以此设计出检测A.a.c的特异性引物,并利用最大简约法构建了16S rDNA系统演化树。系统演化关系分析表明,6～9号供试菌株的16S rDNA序列与A.a.c标准菌株仅有3个位点的差异,其同源性均在99.8%以上,在构建的系统演化树上,它们聚为同一个族群。利用设计的一对特异性引物(BFB64/65),对各供试菌株进行PCR检测,结果只有A.a.c相关菌株产生扩增条带,产物大小与预期一致。 展开更多

关键词 西瓜细菌陛果斑病菌(A.a.c) 16S RDNA 序列分析 系统发育 引物设计

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免疫检测试纸条法检测西瓜子中的瓜类果斑病菌 被引量：8

10

作者 粟寒 吴翠萍 +2 位作者 李彬 黄艳霞 高渊 《植物检疫》 北大核心 2009年第1期12-13,共2页

将西瓜子进行表面消毒后破碎,用无菌水于4℃浸泡4h,取300μL浸提液加入250mL细菌液体培养基中,28℃150r/min培养3d,取培养液0.7mL与Agdia公司提供的瓜类果斑病菌检测试纸条样品浸提网袋中的缓冲液混匀,取混合液1mL用于免疫检测试纸条检... 将西瓜子进行表面消毒后破碎,用无菌水于4℃浸泡4h,取300μL浸提液加入250mL细菌液体培养基中,28℃150r/min培养3d,取培养液0.7mL与Agdia公司提供的瓜类果斑病菌检测试纸条样品浸提网袋中的缓冲液混匀,取混合液1mL用于免疫检测试纸条检测。该方法可有效检测出西瓜子中是否带有瓜类果斑病菌(Acidovorax avenaesub sp.citrulli(Schaadet al.)Willems et al.)。 展开更多

关键词 瓜类果斑病菌 西瓜子 检测 免疫检测试纸条

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改良DAS-Dot-ELISA检测西瓜细菌性果斑病菌 被引量：9

11

作者 熊亮斌 刘箐 +7 位作者 王天昌 高丽萍 王婧 刘姝彤 宋蕤 施颖波 王军平 文朝慧 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1551-1556,共6页

以硝酸纤维素膜为载体,对Dot-ELISA法的封闭条件、包被抗体浓度、点样量等反应条件进行优化,建立改良DAS-Dot-ELISA法快速检测西瓜细菌性果斑病菌。研究发现,以含乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的脱脂奶粉液高温处理后用于封闭,可有效降低背景... 以硝酸纤维素膜为载体,对Dot-ELISA法的封闭条件、包被抗体浓度、点样量等反应条件进行优化,建立改良DAS-Dot-ELISA法快速检测西瓜细菌性果斑病菌。研究发现,以含乙二胺四乙酸二钠(EDTA)的脱脂奶粉液高温处理后用于封闭,可有效降低背景;轻微振荡可提高杂交效率,减少非特异性结合。改良DAS-Dot-ELISA可快速、经济的检测西瓜果斑病菌,灵敏度达1.9×105CFU/mL。在对两批次种子样品的检测中,改良DAS-Dot-ELISA法检测带菌率分别为8.0%和6.0%,与微孔板ELISA结果完全一致;对每粒种子的检测结果,改良DAS-Dot-ELISA法与微孔板ELISA吻合率平均达99.0%,显示较好的实用前景,同时为快速检测西瓜果斑病菌提供一种新途径。 展开更多

关键词 西瓜细菌性果斑病菌 双抗体夹心Dot-ELISA 硝酸纤维素膜 快速检测

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瓜类细菌性果斑病菌tvrR基因的克隆及其对致病性的影响 被引量：8

12

作者 魏娜 钱国良 +3 位作者 李晓霞 张志峰 刘凤权 胡白石 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期68-74,共7页

根据丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato)DC3000中新的毒性基因tvrR(TetR-like viru-lence regulator)的氨基酸序列,从瓜类细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的全基因组中发现并克隆了tvrR... 根据丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato)DC3000中新的毒性基因tvrR(TetR-like viru-lence regulator)的氨基酸序列,从瓜类细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)的全基因组中发现并克隆了tvrR基因的同源物。通过同源重组的方法,构建了tvrR基因的插入突变体,并且经过PCR及Southern杂交验证确认。突变体和野生型一样可以激发烟草过敏反应。致病性试验结果显示:突变体比野生型的病程延长,但最终致病情况与野生型无差异。接种的寄主组织中菌体生长能力检测发现,突变体的繁殖速度慢于野生型,但最终其菌体数量也能达到野生型菌株的最大值。在营养丰富的LB培养基和营养贫乏的MMX基本培养基中生长测定均发现,突变体生长速度慢于野生型,但最终也能达到野生型的最大生长量。瓜类细菌性果斑病菌tvrR基因突变体致病性的改变与其生长能力变化的一致性表明,其致病性的变化是由于其生长能力的改变引起的。 展开更多

关键词 瓜类细菌性果斑病菌 tvrR基因 突变 致病性

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利用环介导等温扩增方法快速检测瓜类细菌性果斑病菌和番茄细菌性溃疡病菌 被引量：8

13

作者 吴秀芹 杨樱子 +3 位作者 罗金燕 邱文 安千里 李斌 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1235-1241,共7页

为建立简单、快速和灵敏地检测瓜类细菌性果斑病菌Acidovorax avenae subsp. citrulli(Aac)和番茄细菌性溃疡病菌Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis(Cmm)的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)... 为建立简单、快速和灵敏地检测瓜类细菌性果斑病菌Acidovorax avenae subsp. citrulli(Aac)和番茄细菌性溃疡病菌Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis(Cmm)的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,以Aac的ugpB基因和Cmm的micA基因为靶标,分别设计、合成和筛选特异性引物,摸索和优化各项反应条件和反应体系,成功建立了以钙黄绿素颜色为指示且只需要金属浴恒温反应30～60 min的LAMP扩增体系。特异性分析表明该LAMP方法可以快速检出5株不同的Aac菌株和2株不同的Cmm菌株,其它对照菌株如燕麦嗜酸菌燕麦亚种A. avenae subsp. avenae、丁香假单胞菌Pseudomonas syringae、水稻黄单胞菌水稻致病变种Xanthomonas oryzae pv. oryzae和茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum则呈现阴性反应;引物比目前报道的LAMP引物有更高的DNA样品检测灵敏度,Aac和Cmm的灵敏度分别为1.72×10~2fg/μL和1.26×10~2fg/μL。研究结果表明,所设计的Aac和Cmm引物特异性好、灵敏度高,更有利于从源头上控制这2种检疫性细菌病害的流行和传播。 展开更多

关键词 瓜类细菌性果斑病菌 番茄细菌性溃疡病菌 环介导等温扩增方法 快速检测

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瓜类细菌性果斑病菌对硫酸铜的敏感性检测与分析 被引量：7

14

作者 赵文龙 杨玉文 +3 位作者 王铁霖 蒋洁 刘慧芹 赵廷昌 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期100-105,共6页

果斑病菌两个亚群的143个菌株继代培养10代后,通过平板画线法对各菌株的硫酸铜敏感性检测结果表明：在硫酸铜浓度为300μg/mL（1.88 mmol/L）时只有一株菌株表现敏感,在浓度达到750 μg/mL（4.69 mmol/L）时所有菌株均表现敏感;浓度为45... 果斑病菌两个亚群的143个菌株继代培养10代后,通过平板画线法对各菌株的硫酸铜敏感性检测结果表明：在硫酸铜浓度为300μg/mL（1.88 mmol/L）时只有一株菌株表现敏感,在浓度达到750 μg/mL（4.69 mmol/L）时所有菌株均表现敏感;浓度为450～650μg/mL （2.81～4.06 mmol/L）时分离自甜瓜的敏感菌株所占比率显著低于西瓜菌株;继代培养后所有菌株的硫酸铜敏感性没有改变,证实果斑病菌具有稳定的抗铜性. 展开更多

关键词 细菌性果斑病菌 硫酸铜 敏感性

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利用PCR技术专化性检测瓜类细菌性果斑病菌 被引量：6

15

作者 田艳丽 胥婧 +3 位作者 赵玉强 李新辉 胡白石 刘凤权 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期512-516,共5页

将hrpB2基因作为检测靶标,根据hrpB2基因设计了1对特异性引物HB2F2/HB2R2,用此特异引物从瓜类细菌性果斑病菌菌株中扩增出290 bp的特异性片段,而其余参试菌株和甜瓜组织的PCR反应结果为阴性,灵敏度试验证明可以检测到103CFU/ml靶标菌体... 将hrpB2基因作为检测靶标,根据hrpB2基因设计了1对特异性引物HB2F2/HB2R2,用此特异引物从瓜类细菌性果斑病菌菌株中扩增出290 bp的特异性片段,而其余参试菌株和甜瓜组织的PCR反应结果为阴性,灵敏度试验证明可以检测到103CFU/ml靶标菌体。对市售的17个品种的甜瓜种子进行PCR检测,其中4个品种检测出携带有瓜类细菌性果斑病菌。将hrp基因作为靶标,为快速检测瓜类细菌性果斑病菌提供了新的方法。 展开更多

关键词 瓜类细菌性果斑病菌 hrpB2基因 特异性引物 PCR检测

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瓜类果斑病菌胶体金试纸条的检测应用 被引量：6

16

作者 周佩 姜培 +4 位作者 罗金燕 陈磊 商明清 杜伟 罗来鑫 《中国植保导刊》 北大核心 2021年第2期96-99,共4页

瓜类果斑病是一种严重为害西甜瓜作物的细菌病害,胶体金试纸条是对其进行现场检测的主要手段。将中国检验检疫科学研究院研制的瓜类果斑病菌胶体金检测试纸条与市场上商品化的美国Agdia公司同类试纸条进行比较,发现两种试纸条的灵敏度... 瓜类果斑病是一种严重为害西甜瓜作物的细菌病害,胶体金试纸条是对其进行现场检测的主要手段。将中国检验检疫科学研究院研制的瓜类果斑病菌胶体金检测试纸条与市场上商品化的美国Agdia公司同类试纸条进行比较,发现两种试纸条的灵敏度和特异性相当,适用于检测出现疑似果斑病症状的叶片和果实;也可用于种子带菌检测,但易出现假阳性结果。另外,还总结了该类试纸条应用于检测中的注意事项,为瓜类果斑病的田间检测提供技术参考。 展开更多

关键词 瓜类果斑病菌 胶体金试纸条 检测

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甜瓜细菌性果斑病病菌鉴定及不同材料抗病性测定 被引量：6

17

作者 刘梦华 卢霞 +5 位作者 李腾 李永博 樊文义 司龙亭 李文虎 阿门 《安徽农业科学》 CAS 2021年第6期145-148,共4页

为明确近几年江苏地区甜瓜叶片及瓜上发生的某一细菌性病害,以江苏绿港现代农业发展有限公司设施大棚中甜瓜发病叶片为研究对象,经分离纯化得到菌株LG08,观察病菌形态初步判定该病原菌为甜瓜细菌性果斑病菌,为进一步明确该病菌,分别用4... 为明确近几年江苏地区甜瓜叶片及瓜上发生的某一细菌性病害,以江苏绿港现代农业发展有限公司设施大棚中甜瓜发病叶片为研究对象,经分离纯化得到菌株LG08,观察病菌形态初步判定该病原菌为甜瓜细菌性果斑病菌,为进一步明确该病菌,分别用4对细菌性果斑病菌通用标记(BX、BX-S、ERC和WFB)、3对甜瓜细菌性果斑病菌特异性标记(AcM380、AcM797、AcM13)及16S测序进行分析。结果表明,菌株LG08为燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli)。苗期和坐果期对西甜瓜部分材料接种菌株LG08,结果发现菌株LG08对西甜瓜都有致病性。该研究不仅有利于进一步了解甜瓜细菌性果斑菌的特性,为果斑病的防治提供参考,而且也有助于甜瓜抗病品种的选育。 展开更多

关键词 甜瓜 细菌性果斑病菌 分离纯化 抗病材料

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抗瓜类细菌性果斑病菌单克隆抗体的制备及特性鉴定 被引量：5

18

作者 曾海娟 王广彬 +6 位作者 郭慧琴 邱实 李建武 翟绪昭 丁承超 宋春美 刘箐 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期228-232,共5页

以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F... 以瓜类细菌性果斑病菌燕麦嗜酸菌西瓜亚种(Acidovorax avenae subsp.citrulli,Aac)野生型菌株SD01免疫BALB/c小鼠,间接酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法筛选获得4株稳定分泌抗SD01菌株的单克隆杂交瘤细胞株6F、6D、7E、4F,腹水抗体效价分别为1∶102 400、1∶102 400、1∶25 600、1∶51 200。采用饱和硫酸铵沉淀及Protein-G亲和层析法纯化腹水,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)显示纯化后的单克隆抗体(m Ab)纯度较高,纯化后单克隆抗体(2 mg/m L)效价分别为1∶12 800、1∶6 400、1∶3 200、1∶6 400,亚型鉴定结果表明4种单克隆抗体均为Ig G2 a。间接ELISA结果表明,4种单克隆抗体对8种果斑病菌结合能力不同:6F可以结合6种,6D、4F可以结合8种,7E可以结合5种。与3种非Aac近源种植物病原菌交叉反应情况为:6F、4F与2种非Aac近源种植物病原菌存在交叉反应,6D、7E与3种非Aac近源种植物病原菌均无交叉反应。 展开更多

关键词 细菌性果斑病菌 单克隆抗体 制备 特性鉴定

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瓜类果斑病菌的检测与防治进展 被引量：4

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作者 曾海娟 吴淑燕 +4 位作者 邱实 李建武 翟绪昭 宋春美 刘箐 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第1期100-105,共6页

瓜类果斑病菌可引起西瓜、甜瓜等葫芦科植物患病,可通过种子远距离传播,是一种常见的瓜类采后果实腐烂的病原菌。该病害具有发病迅速、传播速度快等特点,一旦感染会对瓜类产量带来巨大损失,因而田间病菌的检测与诊断及早期预防十分重要... 瓜类果斑病菌可引起西瓜、甜瓜等葫芦科植物患病,可通过种子远距离传播,是一种常见的瓜类采后果实腐烂的病原菌。该病害具有发病迅速、传播速度快等特点,一旦感染会对瓜类产量带来巨大损失,因而田间病菌的检测与诊断及早期预防十分重要。本文系统地综述了国内外瓜类果斑病菌的免疫学检测方法、分子生物学检测方法及防治等研究进展。 展开更多

关键词 瓜类果斑病菌 检测 防治 进展

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PMA-qPCR方法快速检测细菌性果斑病菌活菌的研究

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作者 郝芳敏 丁伟红 +4 位作者 马二磊 严蕾艳 黄芸萍 王毓洪 臧全宇 《浙江农业科学》 2023年第3期664-669,共6页

本文将叠氮溴化丙锭(PMA)与qPCR技术相结合,建立了一种适于细菌性果斑病菌株活细胞快速检测的PMA-qPCR方法。通过试验控制单因素变化,对PMA预处理反应体系中的各参数进行优化,确立了PMA终浓度为9μg·mL^(-1),曝光时间为8 min的PMA... 本文将叠氮溴化丙锭(PMA)与qPCR技术相结合,建立了一种适于细菌性果斑病菌株活细胞快速检测的PMA-qPCR方法。通过试验控制单因素变化,对PMA预处理反应体系中的各参数进行优化,确立了PMA终浓度为9μg·mL^(-1),曝光时间为8 min的PMA预处理体系,能有效抑制1.0×10^(7)mL^(-1)灭活死菌的扩增,对活菌的扩增没有影响。当活菌数在2.0×10^(1)~2.0×10^(6)mL^(-1),qPCR反应体系中活菌数与Ct值呈线性相关(R^(2)=0.9827)。本文建立的PMA-qPCR方法可在一定范围内有效去除细菌性果斑病死菌的干扰,定量检测出活菌数量,研究结果可为植物细菌性果斑病的流行规律研究提供新的技术支撑,并能有效避免PCR检测实际样品可能造成的假阳性结果。 展开更多

关键词 细菌性果斑病菌 叠氮溴化丙锭 活菌检测 快速检测

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