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杂合肽基因的合成及在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 高鹏 冯兴军 +1 位作者 毕重朋 单安山 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期99-103,共5页
将LfcinB15-Ma12杂合肽基因克隆到载体pET32a上,构建抗菌肽LfcinB15-Ma12杂合肽基因,并在大肠杆菌中表达融合蛋白。根据已报道的抗菌肽LfcinB和Magainin基因的氨基酸序列,推导出其cDNA序列,将两者连接为杂合基因并克隆到载体pET32a上,I... 将LfcinB15-Ma12杂合肽基因克隆到载体pET32a上,构建抗菌肽LfcinB15-Ma12杂合肽基因,并在大肠杆菌中表达融合蛋白。根据已报道的抗菌肽LfcinB和Magainin基因的氨基酸序列,推导出其cDNA序列,将两者连接为杂合基因并克隆到载体pET32a上,IPTG诱导表达。构建了LfcinB15-Ma12杂合肽基因重组质粒,经PCR扩增和DNA测序分析,成功构建了LfcinB15-Ma12杂合肽基因重组质粒,经IPTG诱导,成功表达了杂合肽LfcinB15-Ma12。这为利用基因工程表达其他抗菌肽奠定了基础。 展开更多
关键词 Lfcin B MAGAININ 杂合基因 表达
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Magainin-Aurein杂合肽基因的合成与克隆
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作者 栗学清 邓秀丽 曹黎刚 《长治医学院学报》 2007年第2期89-91,共3页
目的:构建抗菌肽Magainin-Aurein杂合肽基因,并将M-A杂合肽基因克隆到载体pUC18上。方法:根据已报道的抗菌肽Magainin-2和Aurein1.2基因的氨基酸序列,推导出其cDNA序列,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略,分别获得大量完整的Magainin-2... 目的:构建抗菌肽Magainin-Aurein杂合肽基因,并将M-A杂合肽基因克隆到载体pUC18上。方法:根据已报道的抗菌肽Magainin-2和Aurein1.2基因的氨基酸序列,推导出其cDNA序列,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略,分别获得大量完整的Magainin-2和Aurein1.2基因片段。将两者连接为杂合基因并克隆到载体pUC18上。结果:构建了M-A杂合肽基因重组质粒,经PCR扩增、酶切和DNA测序分析表明,杂合肽基因的DNA序列及阅读框完全正确。结论:pUC18-M-A重组质粒构建成功,为进一步亚克隆到表达载体并进行高效表达打下基础,并为其他抗菌肽杂合肽的制备提供了参考。 展开更多
关键词 Magainin-2 Aurein1.2 杂合基因 克隆
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家蚕抗菌肽-死亡素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:7
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作者 翁宏飚 牛宝龙 +1 位作者 孟智启 徐孟奎 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期352-355,共4页
A 44-residue hybrid peptide (CB (1-24)-Arg-Ser-Tyr-Tan (4-21)) incorporating 1-24 residues of cecropin B (CB) and 4-21 residues of thanatin (Tan) was designed and constructed. The CB-Tan gene was cloned into expressio... A 44-residue hybrid peptide (CB (1-24)-Arg-Ser-Tyr-Tan (4-21)) incorporating 1-24 residues of cecropin B (CB) and 4-21 residues of thanatin (Tan) was designed and constructed. The CB-Tan gene was cloned into expression plasmid pGEX-3X and expressed in E.coli BL21. The fusion protein was purified by affinity chromatography. After digested with enterokinase the gene product released with antibacterial activity and gave one band in Tricine-SDS-PAGE. 展开更多
关键词 家蚕 抗菌-死亡素杂合基因 大肠杆菌 克隆 表达 CEC B-Tan基因 融合表达 抗菌活性
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蛙皮素-蜂毒素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与诱导表达 被引量:4
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作者 黄音 刘飞鹏 +1 位作者 周天鸿 朱嘉明 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期207-210,共4页
A hybrid peptide gene was designed and synthesized. Its encoding peptide is constructed from residues 3~14 of magainin and residues 1~13 of melittin. The MA E gene was cloned into plasmids pUC18 and pBV220. By DNA s... A hybrid peptide gene was designed and synthesized. Its encoding peptide is constructed from residues 3~14 of magainin and residues 1~13 of melittin. The MA E gene was cloned into plasmids pUC18 and pBV220. By DNA sequencing, the whole sequences of this gene is confirmed to be correct. The recombinant plasmid pBMA\|E was expressed in \%E.coli\% DH5α. A gene product band can be seen with Tricine\|SDS\|PAGE. The MA E hybrid peptide was purified by immobilized metal affinity chromatography. Bioactivity assay was carried out in liquid turbidity method. The bactericide value to \%E.coli\% K 12 D 31 is 0.182. 展开更多
关键词 抗菌 MA-E基因 大肠杆菌 抗菌活性 表达 克隆 蛙皮素-蜂毒素杂合基因
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恶性疟原虫杂合113肽抗原基因在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中的初步表达 被引量:4
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作者 黄建生 王昌才 +5 位作者 陈仕荣 钟雄林 胡亚芳 陈锦辉 黄扬中 任大明 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1995年第3期173-176,共4页
我们先前已经将人工合成的恶性疟原虫杂合113肽基因克隆到表达载体pWR450-1中,获得了重组质粒pWRAB。现将nWRAB先转化到LB5000修饰后,再转化到疫苗菌SL3261,得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL326... 我们先前已经将人工合成的恶性疟原虫杂合113肽基因克隆到表达载体pWR450-1中,获得了重组质粒pWRAB。现将nWRAB先转化到LB5000修饰后,再转化到疫苗菌SL3261,得到重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261(pWRAB)。pWRAB在SL3261中以β-半乳糖苷酶一杂合多肽抗原AB融合蛋白(GZ-Am形式表达,表达量约13.3%。免疫双扩散发现从SL3261(pWRAB)中纯化的GZ-AB可与抗GZ-AB抗体反应,滴度为1:16。蛋白质印渍技术(Westernblot)显示在GZ-AB相应位置处出现特异条带。上述结果初步说明SL3261表达的GZ-AB具有抗原性。连续传代SL3261(pWRAB)未见质粒pWRAB丢失及明显的毒性,为恶性疟口服活疫苗的制备打下了基础。 展开更多
关键词 沙门氏菌 恶性疟原虫 杂合113基因 表达
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