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免疫双标记细胞的检测在中枢神经系统白血病诊断中的意义 被引量:1
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作者 谢晓宝 邱国强 +3 位作者 吴浩清 严锋 华晓莹 华铮 《临床血液学杂志》 CAS 2002年第2期67-68,共2页
目的 :观察末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT)及淋巴细胞系列相关抗原双标记细胞在脑脊液中的检出对中枢神经系统白血病 (CNS L)的临床意义。方法 :采用免疫荧光标记技术配合流式细胞术 ,检测初治或完全缓解期急性淋巴细胞白血病脑脊液中TdT... 目的 :观察末端脱氧核苷酸转移酶 (TdT)及淋巴细胞系列相关抗原双标记细胞在脑脊液中的检出对中枢神经系统白血病 (CNS L)的临床意义。方法 :采用免疫荧光标记技术配合流式细胞术 ,检测初治或完全缓解期急性淋巴细胞白血病脑脊液中TdT及淋巴系列相关抗原双标记细胞及其治疗后的变化。结果 :6 4例中 8例脑脊液检出上述免疫双标记细胞 ,均为急性淋巴细胞白血病 ,其中 1例无CNS L临床迹象 ,免疫双标记细胞占3.38% ,经治疗后免疫双标记细胞在脑脊液均明显减少或消失。结论 :脑脊液中免疫双标记细胞的检出对CNS L的诊断及治疗指导具有重要的临床意义 。 展开更多
关键词 中枢神经系统白血病 急性淋巴细胞白血病 末端脱氧转移酶 流式细胞术 免疫双标记细胞 免疫荧光标记技术 流式细胞术 脑脊液
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薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响 被引量:17
2
作者 鲍英 夏璐 +4 位作者 姜华 章永平 乔敏敏 张学军 袁耀宗 《胃肠病学》 2005年第2期75-78,共4页
背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道。目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径。方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu... 背景:薏苡仁提取液目前已广泛应用于临床抗肿瘤治疗,但至今尚未见其单独应用于胰腺癌的报道。目的:观察薏苡仁提取液对人胰腺癌细胞凋亡和超微结构的影响,以探索胰腺癌治疗的新途径。方法:以不同浓度薏苡仁提取液处理人胰腺癌细胞系PaTu-8988后,分别通过光镜观察、Hoechst33258荧光染色、末端脱氧核苷酸转移酶原位标记(TUNEL法)和流式细胞术检测细胞凋亡,应用透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:经10μl/ml和20μl/ml薏苡仁提取液作用72h后,PaTu-8988细胞的增殖能力明显下降,其作用呈剂量依赖性;光镜观察显示凋亡细胞变圆、体积缩小,Hoechst33258荧光强染,TUNEL标记阳性。20μl/ml薏苡仁提取液作用24、48和72h后,流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体凋亡峰,细胞凋亡率呈时间依赖性,分别为7.1%±0.6%、11.3%±0.3%和15.1%±2.9%,显著高于对照组的2.4%±1.1%(P<0.01)。透射电镜观察显示,凋亡早期主要是线粒体结构的改变,后期则出现典型的凋亡征象,如核固缩、染色质凝集靠近核膜和凋亡小体形成。结论:薏苡仁提取液可诱导人胰腺癌细胞凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性,线粒体可能在早期细胞凋亡中起重要作用。 展开更多
关键词 薏苡仁提取液 癌细胞凋亡 PaTu-8988 末端脱氧转移酶 Hoechst 33258荧光染色 透射电镜观察 临床抗肿瘤治疗 人胰腺癌细胞系 流式细胞术检测 TUNEL标记 时间依赖性 TUNEL法 细胞超微结构 光镜观察 剂量依赖性 流式细胞仪
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TUNEL技术方法的探讨 被引量:6
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作者 陈春莲 蓝儒竹 +2 位作者 叶章群 吴翠环 周晟 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期274-276,共3页
探讨末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口标记技术 (TUNEL)的染色方法 ,以期提高特异性与敏感性。采用以去势 (经手术切除睾丸 )后天数不同的大白鼠前列腺 ,用 TUNEL 法染色 ,观察不同时期的细胞凋亡水平 ,对经典的 TUNEL 法进行改良 ... 探讨末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口标记技术 (TUNEL)的染色方法 ,以期提高特异性与敏感性。采用以去势 (经手术切除睾丸 )后天数不同的大白鼠前列腺 ,用 TUNEL 法染色 ,观察不同时期的细胞凋亡水平 ,对经典的 TUNEL 法进行改良 ,将染色结果与 TU NEL 经典法和 HE染色法进行对比。结果表明 :采用改良法后 ,阳性细胞明显增加 ,而且着色深 ,凋亡指数明显增高 (P<0 .0 1)。 展开更多
关键词 TUNEL技术 去势 末端脱氧转移酶 凋亡指数 免疫组织化学
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基于发生机制的FLT3长度突变分型及其临床意义值得重视
4
作者 张阳 周晓苏 刘红星 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2024年第6期329-333,共5页
FLT3内部串联重复(ITD)突变是急性髓系白血病中常见的基因突变, 具有重要的预后分层和靶向治疗指导意义。随着高通量测序技术的广泛应用和对突变序列分析能力的提升, 发现超过半数的FLT3-ITD突变并不只是单纯的串联重复, 还伴有非模板... FLT3内部串联重复(ITD)突变是急性髓系白血病中常见的基因突变, 具有重要的预后分层和靶向治疗指导意义。随着高通量测序技术的广泛应用和对突变序列分析能力的提升, 发现超过半数的FLT3-ITD突变并不只是单纯的串联重复, 还伴有非模板序列添加等复杂情况。近期的研究揭示了FLT3长度突变(FLT3-LM)的序列特征、发生机制及相关临床预后意义。伴非模板序列添加的FLT3-LM由异常活化的末端脱氧核苷酸转移酶参与形成, 这部分患者在化疗、靶向治疗和异基因造血干细胞移植治疗时表现出不同的治疗反应和预后。这为更精准理解FLT3-LM提供了新的视角, 同时提出了基于发生机制的FLT3-LM分型建议。新的分型规则更能体现疾病生物学特征的差异, 更精准地指导FLT3-LM患者的预后分层和个体化治疗方案的制订。 展开更多
关键词 白血病 FLT3内部串联重复突变 FLT3长度突变 DNTT 末端脱氧转移酶
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TdT阴性的淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病临床特点、诊断及预后研究进展 被引量:1
5
作者 后书敏 邵静波 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期120-124,共5页
末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotide transferase,TdT)是一种特殊类型的DNA聚合酶,它可以在无DNA复制模板的条件下将单个脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'-OH端。TdT是造血系统中不成熟淋巴细胞中特异性较强的细胞内标记,... 末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotide transferase,TdT)是一种特殊类型的DNA聚合酶,它可以在无DNA复制模板的条件下将单个脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'-OH端。TdT是造血系统中不成熟淋巴细胞中特异性较强的细胞内标记,在淋巴源性肿瘤的诊断中具有重要意义。淋巴母细胞淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病(lymphoblastic lymphoma/acute lymphoblastic leukemia,LBL/ALL)的诊断依赖免疫分型。TdT通常在LBL/ALL中呈阳性表达,是临床诊断LBL/ALL的重要依据。TdT阴性的LBL/ALL在临床中较为少见,鉴于该分子诊断特异性较高,其阴性表达会给诊断带来一定的困难。TdT阴性的原因有多种,在淋巴细胞不同分化阶段中TdT的表达情况不同,另因不同检测方法的灵敏度不同,也可导致偶见TdT的假阴性。此外,有文献指出TdT阴性与TdT阳性的LBL/ALL在临床特点及预后方面亦不相同。了解TdT的表达意义、阴性的原因,以及阴性或阳性表达的LBL/ALL的不同特点,有助于临床诊断、治疗选择及预后判断。该文对国内外相关文献进行了梳理,就TdT阴性的原因及其表达阴性的LBL/ALL的临床特点、诊断及预后等进行综述。 展开更多
关键词 末端脱氧转移酶 淋巴母细胞淋巴瘤 急性淋巴细胞白血病 临床特点 诊断 预后
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GANT61对子宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响及其机制的探讨 被引量:4
6
作者 常亚男 陈红 +5 位作者 段洁 乐方舒 牟芬 徐雅馨 吴旺 刘梦薇 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期188-191,共4页
目的观察神经胶质瘤相关癌基因同源物1(Gli-1)特异性拮抗剂——GANT61在体内和体外对子宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法(1)实验分为两组,实验组加入GANT61,对照组仅加入二甲基亚砜(DMSO),采用逆转录(RT)-... 目的观察神经胶质瘤相关癌基因同源物1(Gli-1)特异性拮抗剂——GANT61在体内和体外对子宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法(1)实验分为两组,实验组加入GANT61,对照组仅加入二甲基亚砜(DMSO),采用逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹(western blot)法分别检测两组HeLa细胞中Gli-1 mRNA和蛋白的表达,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL法)检测两组HeLa细胞的凋亡率。(2)建立子宫颈癌裸鼠移植瘤模型(随机分为实验组和对照组,分别于裸鼠背部皮下注射GANT61和DMSO处理后的HeLa细胞),28d后剥除两组裸鼠的移植瘤,HE染色观察两组移植瘤组织的形态,免疫组化SP法检测两组移植瘤组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)3和生存素(survivin)蛋白的表达。结果(1)实验组HeLa细胞中Gli-1 mRNA和蛋白的表达水平分别为0.81±0.47、0.15±0.07,均明显低于对照组的2.37±1.61、0.44±0.07(P<0.05)。实验组HeLa细胞的凋亡率为(27.1±11.4)%,明显高于对照组的(6.9±3.1)%(P=0.002)。(2)接种28d后,实验组裸鼠移植瘤体积为(217±78)mm^3,明显低于对照组的(677±177)mm^3(P=0.000);实验组裸鼠移植瘤重量为(0.39±0.17)g,明显低于对照组的(1.26±0.36)g(P=0.003)。光镜下观察,实验组裸鼠移植瘤组织中的细胞凋亡情况较对照组明显;实验组裸鼠移植瘤组织中caspase-3、survivin蛋白的积分吸光度(IA)值分别为29335±1512、11530±1012,对照组分别为12382±1079、31032±1292,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论GANT61可在体外抑制HeLa细胞中Gli1 mRNA和蛋白的表达,并在体内、体外促进HeLa细胞的凋亡,其促凋亡机制可能与上调凋亡相关分子caspase-3的表达并下调survivin的表达有关。 展开更多
关键词 HELA细胞凋亡 子宫颈癌 SURVIVIN蛋白 caspase-3 半胱氨天冬氨蛋白 末端脱氧转移酶 裸鼠移植瘤 移植瘤模型
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基于末端脱氧核苷酸转移酶扩增DNA-铜纳米簇荧光传感检测L-组氨酸 被引量:4
7
作者 肖慧 何婧琳 +4 位作者 肖昊 杨婵 冯泽猛 印遇龙 曹忠 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1517-1522,共6页
利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)扩增形成聚胸腺嘧啶(T)DNA模板,制备了聚T铜纳米簇(TS-CuNCs),构建了一种用于L-组氨酸(L-His)检测的荧光传感分析新方法。TdT酶在d TTP存在下合成聚T单链DNA核苷酸序列。由于胸腺嘧啶和Cu^(2+)之间的亲合... 利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)扩增形成聚胸腺嘧啶(T)DNA模板,制备了聚T铜纳米簇(TS-CuNCs),构建了一种用于L-组氨酸(L-His)检测的荧光传感分析新方法。TdT酶在d TTP存在下合成聚T单链DNA核苷酸序列。由于胸腺嘧啶和Cu^(2+)之间的亲合力,聚T单链DNA作为合成铜纳米簇(CuNCs)的模板,加入还原剂后形成CuNCs,荧光强度增强。在L-His存在下,L-组氨酸的咪唑基与Cu^(2+)螯合形成L-His-Cu^(2+)配合物,因而进入聚胸腺嘧啶序列中的Cu^(2+)量减少,使得合成的CuNCs数量减少,导致荧光信号减弱。实验结果表明,体系荧光响应信号与L-His浓度的对数值在5.0×10^(-9)~5.0×10^(-4)mol/L范围内呈线性关系,检出限达到3.4×10^(-9)mol/L。本方法用于实际尿液样品中L-组氨酸检测的回收率为97.4%~104.6%,在生物医学及临床诊断中具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 末端脱氧转移酶 聚胸腺嘧啶 铜纳米簇 L-组氨 荧光分析
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R2-CHOP方案治疗原发皮肤弥漫大B细胞淋巴瘤(腿型)1例
8
作者 王菲 尤学芬 +4 位作者 蔡奕峰 林赠华 曹鑫 王越 钱娟 《江苏医药》 CAS 2023年第11期1187-1188,F0003,共3页
患者,男,57岁,因“发现右下肢皮肤肿块3个月”于2018年8月22日至我院就诊。行皮肤组织病理活检。免疫组化提示:CD79(+),CD20(+),CD3(-),CD56(-),CD138(-),EB病毒编码小RNA(-),T细胞胞浆内抗原1(-),颗粒酶B(-),CD5(-),末端脱氧核苷酸转移... 患者,男,57岁,因“发现右下肢皮肤肿块3个月”于2018年8月22日至我院就诊。行皮肤组织病理活检。免疫组化提示:CD79(+),CD20(+),CD3(-),CD56(-),CD138(-),EB病毒编码小RNA(-),T细胞胞浆内抗原1(-),颗粒酶B(-),CD5(-),末端脱氧核苷酸转移酶(-),髓过氧化物酶(-),Bcl-2(+),Bcl-6(弱+),c-Myc(+) 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 末端脱氧转移酶 CHOP方案 皮肤肿块 CD138 髓过氧化物 CD56 组织病理活检
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TdT阳性大B细胞淋巴瘤1例
9
作者 代洁 谭燕勤 +3 位作者 马越 周成敏 黄宗瑶 李吉满 《肿瘤预防与治疗》 2023年第9期759-762,共4页
末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxyribonucleotidyl transferase,TdT)阳性是诊断B淋巴母细胞淋巴瘤的重要免疫标记物,它在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)的表达极为罕见,本病例结合患者临床病史、其他免疫... 末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxyribonucleotidyl transferase,TdT)阳性是诊断B淋巴母细胞淋巴瘤的重要免疫标记物,它在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)的表达极为罕见,本病例结合患者临床病史、其他免疫组化综合标记和基因检测等多种检测结果最终诊断为DLBCL伴TdT阳性表达。本病例较为罕见,故对患者的临床资料、病理诊断和治疗随访进行回顾性分析。 展开更多
关键词 末端脱氧转移酶 B淋巴母细胞淋巴瘤 弥漫大B细胞淋巴瘤 诊断
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基于末端脱氧核苷酸转移酶协同G-四链体核酶的恩诺沙星检测方法
10
作者 王乾 颜玉婷 +1 位作者 周芳芳 黄悦 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2659-2665,共7页
基于末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)协同G-四链体核酶设计信号放大策略,建立了一种恩诺沙星电化学检测方法。目标物恩诺沙星与特异性核酸适体的结合触发TdT在电极表面的扩增反应,产生G-四链体核酶纳米线结构,进而发挥辣根过氧化物酶活性催... 基于末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)协同G-四链体核酶设计信号放大策略,建立了一种恩诺沙星电化学检测方法。目标物恩诺沙星与特异性核酸适体的结合触发TdT在电极表面的扩增反应,产生G-四链体核酶纳米线结构,进而发挥辣根过氧化物酶活性催化信号放大,实现恩诺沙星的高灵敏和高特异性检测。该方法对恩诺沙星的线性检测范围为0.5~50μg/L,检测限低至0.043μg/L。此外,该无标记电化学生物传感器简单快速,成本低,并成功应用于对实际食品样本的分析检测,显示出较好的应用潜能。 展开更多
关键词 末端脱氧转移酶 G-四链体 信号放大 恩诺沙星 灵敏检测 功能材料
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基于双重脱氧核酶的超灵敏比色法检测铜离子 被引量:3
11
作者 梅晓宏 田晶晶 +3 位作者 张洋子 杜再慧 张媛 许文涛 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1945-1952,共8页
铜是生命的必需元素,是某些活性蛋白的辅基,而过量的铜具有一定毒性,可导致肝炎、胃肠炎、肺炎等病症。因此对Cu^(2+)的灵敏定量检测十分必要。本研究建立了一种基于双重脱氧核酶的比色生物传感器,用于灵敏、特异性定量检测Cu^(2+)。此... 铜是生命的必需元素,是某些活性蛋白的辅基,而过量的铜具有一定毒性,可导致肝炎、胃肠炎、肺炎等病症。因此对Cu^(2+)的灵敏定量检测十分必要。本研究建立了一种基于双重脱氧核酶的比色生物传感器,用于灵敏、特异性定量检测Cu^(2+)。此生物传感器包含两种具有不同功能的脱氧核酶:Cu^(2+)依赖性的切割型脱氧核酶与G-四链体脱氧核酶。当待测物中存在Cu^(2+)时,Cu^(2+)依赖性的切割型脱氧核酶被切割,用于特异性信号识别;经末端转移酶诱导形成G-四链体脱氧核酶,用于"一对多"的信号放大与可视化信号输出。在"信号识别"与"信号输出"两步反应之间,利用指数扩增反应(Exponential amplification reaction,EXPAR),放大"信号识别"的反应信号。在最优条件下,可实现Cu^(2+)的灵敏的选择性检测:使用全波长酶标仪测定,比色法检出限为7.6 pmol/L;裸眼检出限为10 pmol/L。将此传感器用于自来水中Cu^(2+)的测定,裸眼检测范围为10~200 pmol/L,比色法加标回收率为96.3%~98.4%。此检测平台为特异性检测自来水中的Cu^(2+)提供了超灵敏、可视化的检测工具,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 铜离子 脱氧 末端脱氧转移酶 等温扩增
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TDT及其表达的研究进展 被引量:2
12
作者 曹石 周荔雯 冯颖 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1190-1193,共4页
末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TDT)是一种特殊的DNA聚合酶,无需模板就可以将脱氧核苷酸结合到DNA分子的3′-OH端。TDT不仅在免疫系统中具有重要作用,而且对某些淋巴瘤的诊断也具有重要应用。TDT在淋巴... 末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TDT)是一种特殊的DNA聚合酶,无需模板就可以将脱氧核苷酸结合到DNA分子的3′-OH端。TDT不仅在免疫系统中具有重要作用,而且对某些淋巴瘤的诊断也具有重要应用。TDT在淋巴母细胞淋巴瘤/白血病中阳性,是诊断淋巴母细胞淋巴瘤/白血病的重要依据之一。该文就TDT及其表达的最新研究进展作一综述,进一步为病理诊断提供帮助。 展开更多
关键词 淋巴瘤 免疫系统 末端脱氧转移酶 文献综述
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凋亡细胞原位末端标记法技术在检测大鼠耳蜗组织细胞凋亡中的应用 被引量:1
13
作者 李增鹏 肖华亮 +3 位作者 仲召阳 向德兵 牟江洪 张沁宏 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期316-317,共2页
关键词 耳蜗组织 细胞凋亡 凋亡细胞原位末端标记法 末端脱氧转移酶 抗原修复方法
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TdT在儿童期B-ALL中的表达特点 被引量:1
14
作者 徐翀 蒋黎敏 +1 位作者 李莉 沈立松 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第6期436-439,442,共5页
目的分析末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达特点,并探讨TdT在B-ALL微小残留(MRD)检测中的意义。方法用TdT/CD10/CD34/CD19四色荧光抗体组合对初发时的白血病细胞进行检测,以3例正常骨髓标本作为对照... 目的分析末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)在儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中的表达特点,并探讨TdT在B-ALL微小残留(MRD)检测中的意义。方法用TdT/CD10/CD34/CD19四色荧光抗体组合对初发时的白血病细胞进行检测,以3例正常骨髓标本作为对照,分析TdT在B-ALL中的表达特点。同时,以能够使白血病细胞在TdT/CD10双参数点图上出现的位置完全不同于TdT+CD19+的正常骨髓细胞分布的位置,作为TdT/CD10/CD34/CD19组合有效并可用于MRD监测的标准。以该组合对病人诱导治疗结束后以及持续治疗过程中的骨髓标本进行监测。结果在70例B-ALL中,TdT阳性为63例(90.0%)。其中,Common B-ALL中的TdT阳性例数比例,及TdT阳性表达率都显著高于其它各期;其它各期之间无显著差异。虽然大部分病例的TdT与CD34都呈现较高的阳性表达率,但TdT与CD34阳性表达率之间并无明显的相关性。Pro B-ALL、Pre B-ALL和Common B-ALL之间,平均TdT MFI无显著差异,但三者中除了前两者的平均TdT MFI都显著低于正常骨髓中的TdT+CD19+细胞外,Common B-ALL的平均TdT MFI与正常细胞无显著差异。所有B-ALL总的平均TdT MFI显著低于正常细胞。应用TdT/CD10/CD34/CD19抗体组合可在65.7%的B-ALL病例中进行MRD检测,其有效频率高于其它用于MRD检测的抗体组合。 展开更多
关键词 TDT 儿童期 B-ALL 末端脱氧转移酶 微小残留病 基因表达
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末端脱氧核苷酸转移酶在生物传感及核酸合成领域的应用
15
作者 唐梦童 王兆官 +1 位作者 李娇娇 齐浩 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期51-64,共14页
末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)是聚合酶X家族中的一员,与典型的DNA聚合酶不同,TdT以恒温的无模板依赖的方式催化脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)聚合到寡核苷酸的3’羟基端来合成DNA。并且TdT对底物的耐... 末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)是聚合酶X家族中的一员,与典型的DNA聚合酶不同,TdT以恒温的无模板依赖的方式催化脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)聚合到寡核苷酸的3’羟基端来合成DNA。并且TdT对底物的耐受性高具有聚合修饰型dNTP的能力,如荧光修饰的dNTP、生物素修饰的dNTP,甚至人工碱基均可作为其良好底物。TdT的这些生化特性使其被广泛的应用在生物传感和核酸合成领域中,促进了许多基于核酸的工具和方法的发展,并为酶促从头合成DNA技术的发展奠定基础。介绍了TdT的性质,重点总结了它在其介导的生物检测技术、核酸的修饰技术以及酶促合成DNA技术三个方面的核心作用、目前面临的挑战以及未来研究的方向,以期促进TdT在生物传感器和核酸合成中的进一步应用。 展开更多
关键词 末端脱氧转移酶 生物传感器 修饰型 合成
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急性淋巴细胞白血病合并慢性丙型肝炎一例
16
作者 徐贤丽 陈茂伟 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 2018年第4期250-251,共2页
患者男,43岁,农民。因"前胸壁疼痛1月余"入院。患者于2017年1月初始诉前胸壁疼痛,至当地医院查CT提示骨髓瘤可能,外院诊断为骨髓瘤可能,实验室检查发现抗-HCV阳性。外院未行抗病毒治疗,予止痛、护肝等对症治疗后于2月13日转至... 患者男,43岁,农民。因"前胸壁疼痛1月余"入院。患者于2017年1月初始诉前胸壁疼痛,至当地医院查CT提示骨髓瘤可能,外院诊断为骨髓瘤可能,实验室检查发现抗-HCV阳性。外院未行抗病毒治疗,予止痛、护肝等对症治疗后于2月13日转至广西医科大学第一附属医院。否认外伤、手术史,否认输血、静脉药瘾史,否认不洁性行为史,家族中父母无HCV感染史。体格检查:皮肤、巩膜无黄染,全身淋巴结未扪及肿大。胸廓对称无畸形,无局部隆起或凹陷,前胸壁轻压痛,以双侧季肋部明显,呼吸节律规整。心、肺、腹查体未见异常。实验室检查:白细胞计数6.92×10^9/L,红细胞计数4.83×10^9/L,Hb 131.10 g/L,血小板计数236.80×10^9/L,中性粒细胞计数3.00×10^9/L,淋巴细胞计数2.96×10^9/L,嗜酸性粒细胞计数0.51×10^9/L。血脂、肝功能、肾功能均正常。HBsAg阴性,HBeAg阴性,抗-HBs阳性,抗-HBe阳性,抗-HBc阳性;HCV抗体阳性,HCV RNA 4.9×10^9IU/mL,基因型为1b型。骨髓细胞学示:淋巴细胞增生异常,原、幼淋巴细胞比例为0.885,该类细胞大小不一,以大细胞为主,可见空泡,伪足。免疫分型:CD22 89.21%、CD19 94.60%、CD10 99.32%、CD34 97.38%、cCD79a 75.55%、末端脱氧核苷酸转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT) 97.02%、组织相容性抗原-DR抗体(HLA-DR) 99.66%,髓系增殖抑制。提示:急性B淋巴细胞白血病(普通型B-ALL可能)。骨髓活组织检查示非霍奇金淋巴瘤淋巴瘤,B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤。胸部CT考虑多发性骨髓瘤。X线片示颅骨板障增宽,颈、胸、腰、骶尾椎及骨盆骨质改变,符合多发性骨髓瘤表现。腹部B型超声示肝光点增粗增强,脾回声未见异常。诊断:①急性淋巴细胞白血病L2型(B细胞性);②慢性丙型肝炎。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 慢性丙型肝炎 广西医科大学第一附属医院 抗-HCV阳性 非霍奇金淋巴瘤 末端脱氧转移酶 急性B淋巴细胞白血病 多发性骨髓瘤
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黄皮酰胺对高血压局灶性脑缺血-再灌注大鼠Bcl-2蛋白表达和细胞凋亡的影响 被引量:18
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作者 蒋祝昌 毕桂南 石胜良 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期289-292,i002,共5页
目的观察黄皮酰胺对肾性高血压大鼠(RHR)脑缺血-再灌注后Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的影响,探讨其脑保护作用机制。方法75只RHR被随机分成假手术组、单纯缺血-再灌注组和黄皮酰胺组。采用线栓法制作局灶性脑缺血-再灌注模型,假手术组不造... 目的观察黄皮酰胺对肾性高血压大鼠(RHR)脑缺血-再灌注后Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的影响,探讨其脑保护作用机制。方法75只RHR被随机分成假手术组、单纯缺血-再灌注组和黄皮酰胺组。采用线栓法制作局灶性脑缺血-再灌注模型,假手术组不造成缺血。用免疫组化法和原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL法)分别观察缺血2h后再灌注6、12、24、48和72h脑细胞Bcl-2蛋白表达和凋亡细胞数。结果①再灌注6h即可见Bcl-2蛋白表达较多,24h达高峰,此后逐渐下降。与单纯缺血-再灌注组比较,黄皮酰胺组Bcl-2蛋白表达于再灌注后各时间点均明显增高,差异均有显著性(P均<0.01)。②再灌注6h后有较多凋亡细胞,于72h达高峰。与单纯缺血-再灌注组比较,再灌注6-24h黄皮酰胺组凋亡细胞均显著减少(P均<0.01),但再灌注48h后细胞凋亡的抑制作用不明显(P均>0.05)。假手术组及缺血-再灌注组的非缺血侧无Bcl-2阳性细胞,仅见0-2个凋亡细胞。结论局灶性脑缺血-再灌注后Bcl-2表达显著增高,细胞凋亡参与了脑缺血-再灌注损伤的过程。黄皮酰胺能显著上调Bcl-2表达,抑制细胞凋亡,并可能与Bcl-2协同抑制细胞凋亡,这可能是黄皮酰胺脑保护作用的机制。 展开更多
关键词 Bcl-2蛋白表达 细胞凋亡 黄皮酰胺 局灶性 末端脱氧转移酶标记法 脑缺血-再灌注模型 脑缺血-再灌注损伤 肾性高血压大鼠 脑保护作用机制 脑缺血一再灌注 TUNEL法 凋亡细胞 免疫组化法 抑制作用 阳性细胞 72h 24h
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半胱氨酸蛋白酶32在丝裂霉素C诱导膀胱癌细胞凋亡中的作用 被引量:12
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作者 赵长林 徐惠绵 +4 位作者 刘佳 祁荣 郭丽 孔垂泽 李宏 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期488-490,共3页
目的 探讨半胱氨酸蛋白酶 32 (caspase 3)在丝裂霉素C(MMC)诱导膀胱癌EJ细胞凋亡中的作用。 方法 采用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记法 (TUNEL)和流式细胞术 (FCM)研究EJ细胞凋亡及细胞周期变化 ,分析caspase 3抗体对低剂量MM... 目的 探讨半胱氨酸蛋白酶 32 (caspase 3)在丝裂霉素C(MMC)诱导膀胱癌EJ细胞凋亡中的作用。 方法 采用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记法 (TUNEL)和流式细胞术 (FCM)研究EJ细胞凋亡及细胞周期变化 ,分析caspase 3抗体对低剂量MMC诱导EJ细胞凋亡的影响。 结果 TUNEL法显示MMC组EJ细胞出现细胞凋亡特有的形态学特征 ,凋亡指数 (6 2 .9± 2 .2 ) % ,较cas pase 3抗体加MMC组 (4.9± 0 .3) %和空白组 (2 .7± 0 .7) %显著增高 (P <0 .0 0 1)。FCM检测结果明 ,MMC主要诱导G0 /G1期细胞凋亡而出现凋亡峰 ,凋亡率 2 6 .0 6 % ;caspase 3抗体能特异性抑制MMC诱导EJ细胞凋亡 ,凋亡率仅为 4.6 5 %。 结论 低剂量MMC对caspase 3的活化在诱导膀胱癌细胞凋亡中有重要作用。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 细胞凋亡 流式细胞术 末端脱氧转移酶介导生物素标记法 半胱氨蛋白 丝裂霉素C
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大鼠梗阻性胆管炎细胞免疫功能降低及中药锦红片的影响 被引量:14
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作者 章学林 张静喆 +2 位作者 顾宏刚 马恩伟 朱培庭 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第18期2050-2053,共4页
目的:探讨梗阻性胆管炎大鼠细胞免疫功能降低的发生机制及清热通下中药锦红片的影响.方法:♂SD大鼠24只建立急性梗阻性胆管炎模型,随机分为模型组(n=8)、锦红片治疗组(n=8)和单纯胆管梗阻组(n=8),检测血浆IL-2,CD_3^+,CD_4^+,CD_8^+,内... 目的:探讨梗阻性胆管炎大鼠细胞免疫功能降低的发生机制及清热通下中药锦红片的影响.方法:♂SD大鼠24只建立急性梗阻性胆管炎模型,随机分为模型组(n=8)、锦红片治疗组(n=8)和单纯胆管梗阻组(n=8),检测血浆IL-2,CD_3^+,CD_4^+,CD_8^+,内毒素,胸腺指数,胸腺细胞凋亡指数及电镜下观察胸腺的超微结构及凋亡.结果:模型组IL-2,CD_3^+,CD_4^+和胸腺指数显著低于治疗组和单纯胆管梗阻组(IL-2:28.5±3.0 ng/L vs 33.9±3.6 ng/L,39.6±2.2 ng/L,P<0.05,P<0.01;CD_3^+:54.5%±5.5% vs 70.7%±4.8%,66.3%±7.1%,均P<0.01;CD_4^+:34.5%±8.3% vs 44.2%±3.3%,44.5%±4.2%,均P<0.01:胸腺指数:0.89±0.18 vs 1.10±0.13.1.12±0.24,均P<0.05),CD_8^+3组间没有统计学差异,血浆内毒素和凋亡指数明显高于治疗组和梗阻组(内毒素:0.85±0.14 Eu/mL vs 0.53±0.10 EU/mL,0.49±0.11 EU/mL,均P<0.01;凋亡指数:25.7±5.1 vs 15.8±5.5.9.0±3.1.P<0.05,P<0.01),模型组胸腺可见较多典型的凋亡细胞,结果显示经中药干预治疗后,免疫功能、内毒素血症和胸腺细胞凋亡有所改善,接近单纯胆管梗阻组水平.结论:梗阻性胆管炎大鼠存在免疫功能降低,胸腺细胞异常凋亡.锦红片对维持免疫机能的稳定有积极的意义. 展开更多
关键词 中药锦红片 梗阻性胆管炎 胸腺 细胞免疫 凋亡 联免疫法 末端脱氧转移酶缺口标记
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胃癌中COX-2及NF-κB的表达与其病理特征的关系 被引量:11
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作者 蔡跃芳 张明亮 +3 位作者 严悦卿 陈韬 吴浪庭 骆训武 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1830-1833,共4页
目的研究胃癌(gastriccancer,GC)中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、核因子-κB(nuclearfactorκappaB,NF-κB)的表达规律与病理特征的关系。方法采用免疫组织化学染色法(SABC法)和末端脱氧核苷酸转移酶(TDT)介导的dUTP缺口标记法(... 目的研究胃癌(gastriccancer,GC)中环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、核因子-κB(nuclearfactorκappaB,NF-κB)的表达规律与病理特征的关系。方法采用免疫组织化学染色法(SABC法)和末端脱氧核苷酸转移酶(TDT)介导的dUTP缺口标记法(TUNEL)检测15例正常胃黏膜(normalgastricmucosa,NGM)和40例GC组织中COX-2、NF-κBp65表达情况。结果GC中COX-2、NF-κBp65的阳性表达分别为67.5%、62.5%,NGM组则为13.3%、6.70%,GC组和NGM组差别有显著性(P<0.01)。COX-2、NF-κBp65在低分化GC中表达显著高于高分化型,且后者还与GC病期有关(P<0.05)。COX-2、NF-κBp65与GC淋巴结转移、血管浸润均密切相关(P<0.05)。结论COX-2、NF-κB的表达水平对评价GC的恶性程度、有无转移和预后有一定参考价值。 展开更多
关键词 COX-2 病理特征 胃癌 末端脱氧转移酶 免疫组织化学染色法 NF-kB cancer factor Kappa SABC法 淋巴结转移 p65 环氧合 表达规律 dUTP 表达情况 阳性表达 高分化型 血管浸润 恶性程度 参考价值 GC 因子 胃黏膜
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