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原癌基因在心血管疾病发病中的作用 被引量:1
1
作者 崔世君 汤健 《自然杂志》 1990年第6期361-362,共2页
原癌基因(protooncogene),也称细胞癌基因(celluIar-oncogenc,c-onc),在肿瘤的发生中具有重要作用。近来发现,它在高血压、心肌肥厚和冠心病的发病中也具有重要意义,本文就此作一综合介绍。
关键词 原癌基因 心血管疾病 细胞癌基因 血管平滑肌细胞 综合介绍 逆转录病毒基因 大鼠 癌基因表达 末端氨基酸 正常血压
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疫苗
2
《生物技术通报》 CAS CSCD 1994年第1期79-81,共3页
关键词 顺反子 恶性疟原虫 沙眼衣原体 脑膜炎双球菌 程云 DNA 抗体反应 免疫反应 末端氨基酸 胃十二指肠疾病
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高分子量麦谷蛋白14和15亚基的纯化、N-末端序列及部分生化特性研究 被引量:17
3
作者 邓志勇 赵会贤 +3 位作者 范三红 吉万全 郭蔼光 薛秀庄 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期46-51,共6页
用SDS-PAGE制备电泳技术结合一种新的凝胶中蛋白质显色方法,对普通小麦 (Triticum aestivum)小偃六号的高分子量麦谷蛋白14和15亚基进行了有效的分离纯化,将其转印于PVDF膜上测定了N-端的氨基... 用SDS-PAGE制备电泳技术结合一种新的凝胶中蛋白质显色方法,对普通小麦 (Triticum aestivum)小偃六号的高分子量麦谷蛋白14和15亚基进行了有效的分离纯化,将其转印于PVDF膜上测定了N-端的氨基酸顺序,通过比较发现它们与已知序列的其他的高分子量麦谷蛋白亚基高度同源。用两种双向电泳技术确定了它们的等电点(PI)属于碱性范 围。 展开更多
关键词 小麦 高分子量麦谷蛋白亚基 纯化 N-末端氨基酸序列 生化特性 贮藏蛋白 等电点
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日粮纤维对猪回肠末端氨基酸及其内源性氨基酸流量的影响 被引量:13
4
作者 李铁军 印遇龙 +1 位作者 黄瑞林 钟华宜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期473-476,共4页
In this paper, the total nitrogen (N) flow and the flow of each amino acid, the endogenous N flow and the endogenous flow of each amino acid and the true digestibility of lysine and protein at the terminal ileum were ... In this paper, the total nitrogen (N) flow and the flow of each amino acid, the endogenous N flow and the endogenous flow of each amino acid and the true digestibility of lysine and protein at the terminal ileum were determined, respectively, using the homoarginin (HA) method in soybean meal based diets with different level of the pea-hull (4%, 8% and 12%) and the rice hull (8%) fed to growing pigs. Five Yorkshire barrows equipped with PVTC for collection of ileal digesta were fed one of the diets according to a 5×5 Latin square design. The experimental results showed, in contrast to control diet, amongst the different level of the pea-hull, 12% pea-hull in the diet (diet D) could markedly affect the total N and amino acid flow, the endogenous N and endogenous amino acid flow (P<0.05), respectively, at the terminal ileum of pigs, but it has no impact on the true ileal digestibility of lysine and protein, respectively. 4% pea-hull (diet B) only could affect the true ileal digestibility of protein (P<0.05), and 8% pea-hull (diet C) also could affect the ileal proline flow (P<0.05). Whereas, 8% rice hull (diet E) in the diet had no impact on the total N and the amino acid flow, the endogenous N and the endogenous amino acid flow, and the true digestibility of lysine and protein at the terminal ileum of pigs, respectively. When the effect was compared between the diet of pea-hull and rice hull, 4% or 8% pea-hull has a similar effect to 8% rice hull (P>0.05). The effect of diet D on the total N and the amino acid flow and the endogenous N and the endogenous amino acid flow was superior to diet E (P<0.05). 展开更多
关键词 日粮纤维 回肠末端氨基酸 内源性氨基酸 流量 真消化率
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扩展青霉脂肪酶的纯化及氨基酸序列测定 被引量:4
5
作者 邬敏辰 黄伟达 孙崇荣 《江南学院学报》 2001年第4期56-62,共7页
扩展青霉 (Pen .expansum)WMC2 0 718所产碱性脂肪酶经离心分离、硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析以及凝胶过滤等步骤 ,其酶纯化了 18.5倍 ,获得了比活性为 4 2 0 0U mg的纯碱性脂肪酶 ,提取得率 4 8.8%。纯化后的脂肪酶经过SDS ... 扩展青霉 (Pen .expansum)WMC2 0 718所产碱性脂肪酶经离心分离、硫酸铵沉淀、疏水层析、阴离子交换层析以及凝胶过滤等步骤 ,其酶纯化了 18.5倍 ,获得了比活性为 4 2 0 0U mg的纯碱性脂肪酶 ,提取得率 4 8.8%。纯化后的脂肪酶经过SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和高效反相色谱 (RP HPLC)检测 ,分别达到了SDS PAGE电泳纯和RP HPLC色谱纯。经SDS PAGE和SephadexG 15 0凝胶过滤色谱 ,分别测得酶的相对分子质量为 2 75 0 0和 2 82 0 0 ,表明该酶以单体形式存在。N末端 2 0个氨基酸残基序列测定的结果为ATADAAAFPDLHRAAKLSSA。该酶的最适作用温度为 30℃ ,在 35℃以下稳定 ,4 5℃处理 30min仅残留 30 %酶活性 ;pH稳定范围在 6 .5~ 10 .5之间 ,最适pH值为 10 .0。阴离子表面活性剂LAS对该酶活性的影响较大 ,而非离子表面活性剂AEO9对酶活性无影响。洗涤剂蛋白酶在规定的添加量范围内 ,对脂肪酶的活性影响较小。 展开更多
关键词 扩展青霉 碱性脂肪酶 纯化 N末端氨基酸序列 测定
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龈沟液12000蛋白质的N-末端氨基酸序列分析及其临床意义 被引量:6
6
作者 王戎机 孟焕新 +1 位作者 陈智滨 曹采方 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期297-299,共3页
目的 对龈沟液中 12 0 0 0蛋白质的N 末端氨基酸进行序列分析 ,鉴定其本质。方法采集快速进展性牙周炎和成人牙周炎患者的龈沟液 ,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出 12 0 0 0蛋白 ,并将其通过电转移技术转至PVDF膜上 ,剪下PVDF膜上... 目的 对龈沟液中 12 0 0 0蛋白质的N 末端氨基酸进行序列分析 ,鉴定其本质。方法采集快速进展性牙周炎和成人牙周炎患者的龈沟液 ,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出 12 0 0 0蛋白 ,并将其通过电转移技术转至PVDF膜上 ,剪下PVDF膜上的目标条带 ,在 4 91ProteinSequencer多肽氨基酸序列测定仪上进行N 末端氨基酸序列分析。结果 龈沟液中低相对分子质量的 12 0 0 0蛋白N 末端 10个氨基酸的顺序为 :Met、Leu、Thr、Glu、Leu、Glu、Lys、Ala、Leu、Asn。经MS Edman检索 ,与该序列相匹配的蛋白是“钙结合蛋白MRP8” ,它是钙结合蛋白 (Calprotectin)的轻亚基。Calprotectin是白细胞胞质中的一种蛋白 ,是败血症、肺炎等一些炎性疾病的标志物。结论 龈沟液中 12 0 0 0蛋白质的本质是钙结合蛋白。 展开更多
关键词 龈沟液 12000蛋白质 N-末端氨基酸序列 临床意义 牙周病
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蕲蛇蛇毒中一个新的类凝血酶的分离纯化与表征 被引量:6
7
作者 赖伟苹 郭春腾 +3 位作者 邓文汉 卢菀华 宁千年 饶平凡 《生命科学研究》 CAS CSCD 2002年第1期64-67,共4页
使用DEAE SephadexA 5 0、POROS 5 0HS及POROS 2 0PI等色谱分离技术 ,从蕲蛇粗毒中分离提纯得到 1个具有凝血活力的组分 ,经SDS PAGE和PAGE检测均为一条带 ,非还原条件下相对分子质量 2 4 .3kDa,还原条件下相对分子质量 33.0kDa ;其凝... 使用DEAE SephadexA 5 0、POROS 5 0HS及POROS 2 0PI等色谱分离技术 ,从蕲蛇粗毒中分离提纯得到 1个具有凝血活力的组分 ,经SDS PAGE和PAGE检测均为一条带 ,非还原条件下相对分子质量 2 4 .3kDa,还原条件下相对分子质量 33.0kDa ;其凝血活力为 91 .0NIHu mg.该组分不具有激活因子ⅩⅢ的活性 ,肝素不影响该组分的凝血活性 ,EDTA部分抑制其活性 ,苯甲基磺酰氟 (PMSF)则会产生不可逆抑制作用 .该酶N 末端氨基酸序列为VIGGNGXDINEHRFLVAFF 。 展开更多
关键词 蕲蛇蛇毒 类凝血酶 分离纯化 表征 N-末端氨基酸序列
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小麦返白系胆色素原脱氨酶纯化及编码cDNA序列分析 被引量:3
8
作者 程冬梅 范三红 +3 位作者 刘香莉 陈根云 邓志勇 郭蔼光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期973-978,共6页
以小麦(Triticumaestivum)返白系F772为材料,通过粗提、加热处理、硫酸铵分级沉淀和凝胶柱层析等方法,对胆色素原脱氨酶(PBGD)进行了提取纯化,纯化倍数为1092,得率为15%.纯化的PBGD约为37kD.对其部分生化性质的研究表明:高浓度的NH4+对... 以小麦(Triticumaestivum)返白系F772为材料,通过粗提、加热处理、硫酸铵分级沉淀和凝胶柱层析等方法,对胆色素原脱氨酶(PBGD)进行了提取纯化,纯化倍数为1092,得率为15%.纯化的PBGD约为37kD.对其部分生化性质的研究表明:高浓度的NH4+对酶活性有强烈的抑制,光照处理可以使酶活性降低.对纯化后的PBGDN末端氨基酸序列进行了测定.根据N端序列设计简并引物,获得了PBGD的cDNA全部编码区序列.它编码一个351个氨基酸的前体蛋白,有一个叶绿体导肽的序列.通过比较小麦PBGD与来自与其他物种的同源蛋白表明,有些氨基酸残基非常保守. 展开更多
关键词 小麦返白系 胆色素原脱氨酶 N末端氨基酸测序 纯化 CDNA克隆
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N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例方法的建立 被引量:4
9
作者 史新昌 杨靖清 +2 位作者 韩春梅 陶磊 饶春明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第10期1073-1081,共9页
目的建立应用N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例的方法。方法利用氨基酸测序仪的摩尔归一化数据,经信号和噪音分离、信号的筛选等数据处理过程,将主肽链N-末端序列数据与其他次要序列数据分开,进而估... 目的建立应用N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例的方法。方法利用氨基酸测序仪的摩尔归一化数据,经信号和噪音分离、信号的筛选等数据处理过程,将主肽链N-末端序列数据与其他次要序列数据分开,进而估计主肽链所占比例。将本方法计算结果与质谱结果进行比较,另用混合样品数据进行验证分析。结果本方法所计算结果基本符合实际情况,可较准确地估计主肽链比例。结论初步建立了应用N-末端氨基酸测序数据估计N-末端不均一的单链重组蛋白制品主肽链比例的方法,为相关蛋白的分析和研究提供了辅助。 展开更多
关键词 N-末端氨基酸测序 N-末端不均一 重组蛋白 相关蛋白 数据处理 比例估计
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重组人胰岛素原料药N末端氨基酸序列的测定 被引量:3
10
作者 田沛霖 张国林 《中国合理用药探索》 CAS 2020年第12期89-94,共6页
目的:建立重组人胰岛素原料药N末端氨基酸序列的测定方法。方法:基于Edman降解原理,重组人胰岛素原料药样品经1%乙酸溶液处理,采用PPSQ-53A蛋白质测序仪依序切割N末端氨基酸后,注入高效液相色谱仪,使用Wakopak Wakosil PTH-GR硅胶柱,通... 目的:建立重组人胰岛素原料药N末端氨基酸序列的测定方法。方法:基于Edman降解原理,重组人胰岛素原料药样品经1%乙酸溶液处理,采用PPSQ-53A蛋白质测序仪依序切割N末端氨基酸后,注入高效液相色谱仪,使用Wakopak Wakosil PTH-GR硅胶柱,通过梯度洗脱分离,流速为0.3 ml/min,柱温为35℃,进样体积为50μl,PDA检测器分析波长为269 nm。同时,采用PPSQ-53A蛋白测序仪进行等度洗脱分析N末端序列。结果:重组人胰岛素原料药N末端氨基酸理论序列:A链为Gly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Thr-Ser-Ile-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gln;B链为Phe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Gly-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu。经测定,样品梯度洗脱的测定结果与理论序列一致,等度洗脱获得的N末端序列也与理论序列一致。结论:所用方法操作简便、可行,能够用于测定重组人胰岛素原料药的N末端氨基酸序列。 展开更多
关键词 重组人胰岛素 N末端氨基酸 序列测定 Edman降解 中国药典 梯度洗脱
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味精菌体蛋白粉在肉仔鸡中的能量和回肠氨基酸表观消化率的研究 被引量:3
11
作者 杨桂芹 李建涛 +3 位作者 张艳春 刘国华 张姝 郑爱娟 《中国饲料》 北大核心 2009年第20期14-17,共4页
通过两个试验测定了味精菌体蛋白粉在肉仔鸡中的能量和回肠氨基酸的表观消化率。试验1选用体重相近的22日龄健康肉仔鸡64只,随机分成2个组,每组8个重复,其中一组饲喂基础日粮,另一组饲喂供试日粮。选用二氧化钛(TiO2)为外源指示剂进行... 通过两个试验测定了味精菌体蛋白粉在肉仔鸡中的能量和回肠氨基酸的表观消化率。试验1选用体重相近的22日龄健康肉仔鸡64只,随机分成2个组,每组8个重复,其中一组饲喂基础日粮,另一组饲喂供试日粮。选用二氧化钛(TiO2)为外源指示剂进行代谢试验,以评定肉仔鸡对味精蛋白粉的能量利用率。结果表明:味精菌体蛋白粉对肉仔鸡的氮校正能量的表观利用率为(36.07±2.76)%。试验2选用体重相近的26日龄健康肉仔鸡32只,随机分为8组,选用TiO2为外源指示剂,采用回肠末端法进行代谢试验,对味精菌体蛋白粉的回肠末端氨基酸的表观消化率进行评定,结果表明:肉仔鸡对味精菌体蛋白粉中4种限制性氨基酸的回肠末端表观消化率分别为:赖氨酸(44.45±0.04)%、蛋氨酸(64.66±0.11)%、苏氨酸(45.16±0.04)%、胱氨酸(90.12±0.03)%;肉仔鸡对味精菌体蛋白粉中17种氨基酸的回肠末端表观消化率平均值为(48.23±0.62)%。表明肉仔鸡对味精菌体蛋白粉中能量和氨基酸的利用率均较低。 展开更多
关键词 味精菌体蛋白粉 氮校正表观代谢能 回肠末端氨基酸消化率 肉仔鸡
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西兰花叶蛋白和茎叶粉对肉仔鸡代谢能和回肠氨基酸表观消化率的影响 被引量:3
12
作者 杨桂芹 梁丽萍 +3 位作者 李建涛 刘国华 张姝 郑爱娟 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期54-58,共5页
通过2个试验测定了西兰花叶蛋白和茎叶粉在肉仔鸡中的氮校正表观代谢能和回肠氨基酸的表观消化率,为合理利用西兰花资源提供科学依据和数据参考。试验1选用体重相近的22日龄健康肉仔鸡144只,随机分成3个组,每组8个重复,公母各50%。其中... 通过2个试验测定了西兰花叶蛋白和茎叶粉在肉仔鸡中的氮校正表观代谢能和回肠氨基酸的表观消化率,为合理利用西兰花资源提供科学依据和数据参考。试验1选用体重相近的22日龄健康肉仔鸡144只,随机分成3个组,每组8个重复,公母各50%。其中1组饲喂基础日粮,另2组分别饲喂试验日粮(西兰花叶蛋白30%替代基础日粮,西兰花茎叶粉35%替代基础日粮)。选用TiO2为外源指示剂进行代谢试验;试验2选用体重相近的26日龄健康肉仔鸡96只,随机分为2组,每组8个重复,公母各50%。选用TiO2为外源指示剂,采用回肠末端法进行代谢试验。结果表明:西兰花叶蛋白和茎叶粉在肉仔鸡中的表观代谢能分别为8.86MJ.kg-1和2.48 MJ.kg-1,氮校正表观代谢能分别为8.14 MJ.kg-1和1.86 MJ.kg-1;西兰花叶蛋白和茎叶粉在肉仔鸡中4种限制性氨基酸的回肠末端表观消化率分别为赖氨酸(48.11±4.28)%和(73.00±6.64)%,蛋氨酸(39.51±4.60)%和(79.18±3.91)%,苏氨酸(33.11±4.66)%和(59.38±6.25)%,胱氨酸(33.47±2.94)%和(65.82±4.46)%;在肉仔鸡中17种氨基酸的回肠末端表观消化率的平均值为(39.57±4.45)%和(71.75±4.85)%。可见,西兰花茎叶粉在肉仔鸡中的表观代谢能较低,西兰花叶蛋白在肉仔鸡中回肠末端氨基酸的消化率较低。 展开更多
关键词 西兰花叶蛋白 西兰花茎叶粉 氮校正表观代谢能 回肠末端氨基酸消化率 肉仔鸡
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玉米胚芽粕对肉仔鸡的代谢能和回肠氨基酸表观消化率的测定 被引量:2
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作者 陶丽娟 张艳春 +2 位作者 李建涛 杨桂芹 刘国华 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期741-746,共6页
玉米胚芽粕蛋白质含量较高,氨基酸种类丰富且营养价值很高,是工业加工的副产品,为合理利用玉米胚芽粕提供理论支持和科学依据,试验1选用64只22d龄体重接近的健康肉仔鸡,随机分为2个处理组,每组8个重复,采用套测法(玉米胚芽粕替代30%基... 玉米胚芽粕蛋白质含量较高,氨基酸种类丰富且营养价值很高,是工业加工的副产品,为合理利用玉米胚芽粕提供理论支持和科学依据,试验1选用64只22d龄体重接近的健康肉仔鸡,随机分为2个处理组,每组8个重复,采用套测法(玉米胚芽粕替代30%基础饲粮),以二氧化钛(TiO2)作为外源指示剂进行代谢试验,以评定玉米胚芽粕在肉仔鸡中的氮校正表观代谢能。试验2选用32只26d龄体重接近的健康肉仔鸡,采用回肠末端法以TiO2为外源指示剂进行代谢试验,对玉米胚芽粕在肉仔鸡中的回肠末端氨基酸的表观消化率进行了评定。结果表明:玉米胚芽粕在肉仔鸡中的表观代谢能(AME)为(6.88±1.41)MJ·kg^-1,氮校正表观代谢能(AMEn)为(6.81±1.25) MJ·kg^-1,能量表观代谢率为(38.47±19.45)%,氮校正能量表观利用率为(38.08±17.05)%。玉米胚芽粕在肉仔鸡中4种限制性氨基酸的回肠末端氨基酸(AA)表观消化率(AID)为:赖氨酸(77.03±0.02)%、蛋氨酸(87.03±0.01)%、苏氨酸(69.95±0.01)%、胱氨酸(78.44±0.01)%。玉米胚芽粕在肉仔鸡中17种氨基酸回肠末端氨基酸表观消化率(AAAD)平均值为(78.67±0.02)%。表明玉米胚芽粕在肉仔鸡中能量的利用率较低,而回肠AAAD较高。 展开更多
关键词 玉米胚芽粕 肉仔鸡 AMEn 回肠末端氨基酸AID
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蛋壳内膜分解菌所产蛋白酶的纯化及其N-末端氨基酸序列测定 被引量:1
14
作者 李勃 党永 +1 位作者 马瑜 陈颖怡 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1182-1185,共4页
从土壤中分离得到的1株产蛋壳内膜分解酶(ESMprotease)的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。通过对其发酵液进行饱和硫酸铵盐析,二次离子交换层析得到蛋壳内膜分解活性达到304.5U/mg的目标蛋白,SDS-PAGE电泳显示该酶分子量约为32kD... 从土壤中分离得到的1株产蛋壳内膜分解酶(ESMprotease)的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa)。通过对其发酵液进行饱和硫酸铵盐析,二次离子交换层析得到蛋壳内膜分解活性达到304.5U/mg的目标蛋白,SDS-PAGE电泳显示该酶分子量约为32kD,通过测定其N-末端15个氨基酸残基为:Ala、Glu、Ala、Gly、Gly、Val、Ala、Gly、Lys、Glu、Asp、Ala、Ala、Glu和Leu。 展开更多
关键词 蛋壳内膜蛋白酶 铜绿假单胞菌 纯化 N-末端氨基酸测序
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人载脂蛋白基因apoAⅠ在毕赤氏酵母中的表达 被引量:2
15
作者 张淼 赵志安 +2 位作者 杨婷婷 刘林 宋大新 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期181-184,189,共5页
将化学法合成的apoAⅠ基因插入分泌型载体 pPIC9K .将重组的 pPIC9K apoAⅠ用BglⅡ酶切后 ,转化PichiapastorisGS115菌株 ,筛选获得G4 18高抗性转化子 .转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导 ,上清液用SDS PAGE检测 ,有明显的rApoAⅠ表达 .经Phen... 将化学法合成的apoAⅠ基因插入分泌型载体 pPIC9K .将重组的 pPIC9K apoAⅠ用BglⅡ酶切后 ,转化PichiapastorisGS115菌株 ,筛选获得G4 18高抗性转化子 .转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导 ,上清液用SDS PAGE检测 ,有明显的rApoAⅠ表达 .经Phenyl sepharose 6 (FastFlow)疏水层析柱和SephadexG 5 0 (coarse)分子筛层析 ,得到rApoAⅠ蛋白纯品 .经Westernblotting ,N末端氨基酸顺序测定证明 ,毕赤氏酵母表达的rApoAⅠ与人血浆提取的ApoAⅠ基本一致 . 展开更多
关键词 人载脂蛋白ApoAI 分泌型载体 毕赤氏酵母 蛋白质印迹 N末端氨基酸顺序测定
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Ca^(2+)和Mg^(2+)对54kD钙结合蛋白荧光强度影响的研究
16
作者 陆任云 朱卫华 +2 位作者 周丽萍 庄庆祺 顾心健 《南京大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期594-598,共5页
猪血小板 5 4kD钙结合蛋白 (calciumbindingprotein ,CaBP)是一个等电点为 5 .5的弱酸性蛋白质 ,其N 末端为丙氨酸 (Ala) ,且未经修饰 ,在 2 80nm波长的紫外光激发下 ,该蛋白质具有λmax为 335nm的内源荧光发射光谱 ,Ca2 +、Mg2 +均能... 猪血小板 5 4kD钙结合蛋白 (calciumbindingprotein ,CaBP)是一个等电点为 5 .5的弱酸性蛋白质 ,其N 末端为丙氨酸 (Ala) ,且未经修饰 ,在 2 80nm波长的紫外光激发下 ,该蛋白质具有λmax为 335nm的内源荧光发射光谱 ,Ca2 +、Mg2 +均能减弱其发射荧光的强度 ,但对其λmax没有影响 .通过测定不同Ca2 +浓度下荧光强度的变化 ,可计算出在无Mg2 +存在时 ,该蛋白质的钙结合常数为 3.2× 10 - 8mol/L ,而在Mg2 +饱和条件下 ,钙结合常数为 7.4× 10 - 6 mol/L .乙醇亦不影响该蛋白质荧光的λmax,而对其荧光强度的影响则依赖于是否与钙结合 .未与Ca2 +结合时 ,乙醇浓度的增加导致荧光强度增强 ,与Ca2 +结合后 ,在低浓度乙醇溶液中 ,蛋白荧光强度减小 ,至乙醇浓度大于 16 .6 %后 ,其荧光强度逐渐增强 ,在 35 %乙醇溶液中 5 4kDCaBP对Ca2 展开更多
关键词 54kD钙结合蛋白 等电点 N-末端氨基酸 荧光光谱 钙结合常数 荧光强度
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猪囊尾蚴囊液16kDa特异性蛋白鉴定及其N-末端氨基酸序列测定
17
作者 马承旭 卢思奇 +2 位作者 薛燕萍 杨亚平 王风云 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2009年第2期71-75,共5页
为了寻找猪囊尾蚴病诊断生物标记物,本研究从自然感染猪体肌肉分离、收集囊尾蚴,抽取囊液制备粗抗原,用其免疫家兔获得抗血清,再用SDS-PAGE分析囊尾蚴囊液总蛋白。以特异性抗血清通过Western Blot鉴定低分子量高特异性蛋白,测定其N... 为了寻找猪囊尾蚴病诊断生物标记物,本研究从自然感染猪体肌肉分离、收集囊尾蚴,抽取囊液制备粗抗原,用其免疫家兔获得抗血清,再用SDS-PAGE分析囊尾蚴囊液总蛋白。以特异性抗血清通过Western Blot鉴定低分子量高特异性蛋白,测定其N-末端氨基酸序列并与相关资料进行对比分析,初步确定所鉴定蛋白归属。研究结果表明,从囊尾蚴囊液中鉴定出一低分子量为16kDa的特异性蛋白,其N-末端起始的10个氨基酸序列为DLSKGEWQLV,该序列与猪囊尾蚴囊液肌红蛋白的同源性为80%。鉴于其对抗猪囊尾蚴血清具有高特异性和高反应性,可将其作为生物标记物,用于猪囊虫病的免疫学诊断研究。 展开更多
关键词 猪囊虫病 囊尾蚴 囊液 N-末端氨基酸序列
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不同来源醋糟在生长猪上的有效能值和回肠末端氨基酸消化率评定
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作者 王丽芬 麻龙腾 +5 位作者 吴士博 丁鹏 陈宇光 贺喜 范志勇 宋泽和 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期5646-5658,共13页
本试验旨在通过消化代谢试验和回肠末端食糜采集试验对4种不同来源醋糟(江苏镇江香醋、山西老陈醋、四川阆中保宁醋和甘肃酒泉黑醋)在生长猪上的有效能值和氨基酸消化率进行评价,为其在猪生产中应用提供数据参考和科学依据。试验1选取10... 本试验旨在通过消化代谢试验和回肠末端食糜采集试验对4种不同来源醋糟(江苏镇江香醋、山西老陈醋、四川阆中保宁醋和甘肃酒泉黑醋)在生长猪上的有效能值和氨基酸消化率进行评价,为其在猪生产中应用提供数据参考和科学依据。试验1选取10头80日龄且体重[(21.90±2.56)kg]相近的健康“杜×长×大”三元杂交阉公猪,按照不完全拉丁方设计随机分成5组,共进行3期试验(每期试验预试期7 d,正试期3 d,试验期共30 d),每组共6个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂玉米型基础饲粮,试验组分别以15%的4种醋糟等比例替代基础饲粮中的玉米。采用全收粪法测定4种醋糟生长猪消化能和代谢能。试验2选取12头80日龄且体重[(20.10±2.74)kg]相近的健康“杜×长×大”三元杂交阉公猪进行回肠末端简单T型瘘管安装,按照不完全拉丁方设计随机分为6组,共进行3期试验(每期试验预试期8 d,正试期2 d,试验期共30 d),每组共6个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别以4种醋糟中的蛋白质作为饲粮氨基酸的唯一来源,无氮饲粮被用来计算基础内源性氨基酸的损失。正试期收集回肠食糜用于测定氨基酸的表观回肠消化率(AID)和标准回肠消化率(SID)。结果表明:1)以干物质为基础,江苏镇江香醋醋糟、山西老陈醋醋糟、四川阆中保宁醋醋糟、甘肃酒泉黑醋醋糟在生长猪上的消化能和代谢能分别为11.63和10.89 MJ/kg、11.70和10.90 MJ/kg、12.33和11.42 MJ/kg以及11.92和11.11 MJ/kg,且均显著低于对照组(P<0.05),4种醋糟之间有效能值差异不显著(P>0.05)。2)4种不同来源醋糟饲粮粗蛋白质和总氨基酸AID和SID显著低于对照组饲粮(P<0.05),而甘肃酒泉黑醋醋糟在4种醋糟中的粗蛋白质和氨基酸消化率较高。综上所述,4种不同来源醋糟在生长猪上的有效能值和回肠末端氨基酸消化率有较大差异,其中甘肃酒泉黑� 展开更多
关键词 生长猪 醋糟 消化能 代谢能 回肠末端氨基酸消化率
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p53C—末端356—393氨基酸对人肺癌细胞恶性表型的影响
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作者 汪蕙 李金照 《结核病与胸部肿瘤》 2002年第4期241-247,共7页
目的:根据p53蛋白中心区与特殊DNA序列结合活性,受到C-末端氨基酸负面影响,研究去掉C-末端氨基酸残基外源p53,是否增加对人肺癌细胞恶性生长的抑制。方法;利用DNA重组技术,构建去掉C-末端356-393区37个氨基酸p53和全工p53的... 目的:根据p53蛋白中心区与特殊DNA序列结合活性,受到C-末端氨基酸负面影响,研究去掉C-末端氨基酸残基外源p53,是否增加对人肺癌细胞恶性生长的抑制。方法;利用DNA重组技术,构建去掉C-末端356-393区37个氨基酸p53和全工p53的真核细胞表达质粒,(PEGFP-p53(del),PEGFP-p53)。经lipofectin介导转染有p53缺失和突变的人肺癌细胞801D,G418筛选,建立单克隆转染细胞系,PCR检测外源基因,镜检细胞绿色荧光(GFP)蛋白表达,细胞集落形成试验检测细胞体外恶性增殖能力。FAX检测细胞周期,行裸鼠移植瘤试验检测细胞体内恶性增殖能力。结果:获转染细胞克隆系PEGFP-p53(del)-801D、PEGFP-p53-801D。PEGFP-801D.PCR证明外源基因在细胞中存在,镜检证明绿荧光蛋白在细胞中表达。体外集落形成实验证明PEGFP-p53(del)-801D集落形成抑制率为99.6%,PEGFP-p53-801D为81%。PEGFP-p53(del)-801D细胞恶性增殖能力明显低于PEGFP-p53-801D。P<0.01。裸鼠移植瘤实验证明PEGFP-p53(del)-801D和PEGFP-p53-801D恶性增殖增殖能力明显降低。PEGFP-p53(del)-801D移植瘤细胞中可检测出绿荧光蛋白表达,证明外源p53(del)基因在肿瘤中存在和表达,也显示出PEGFP-p53(del)-801D和PEGFP-p53-801D仍有活的癌细胞存在。结论:去掉C-末端356-393氨基酸残基外源p53明显增加对801D细胞体外恶性增殖抑制。801D细胞对外源p53抑癌作用存在“异质性”。 展开更多
关键词 肺癌 去C-末端氨基酸p53 转染细胞 集落形成 细胞生长
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病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN-端肽对乳腺癌miRNAs表达谱的影响 被引量:1
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作者 段克才 陈天天 丁勇兴 《蚌埠医学院学报》 CAS 2018年第11期1401-1404,共4页
目的:阐明病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ(virus macrophage inflammatory protein-Ⅱ,v MIP-Ⅱ) N末端21个氨基酸的多肽(NT21MP)对乳腺癌MCF-7细胞miRNAs表达谱的调控作用。方法:收集各组细胞抽提RNA,RNA质量评估后逆转录成c DNA。采用染料法(... 目的:阐明病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ(virus macrophage inflammatory protein-Ⅱ,v MIP-Ⅱ) N末端21个氨基酸的多肽(NT21MP)对乳腺癌MCF-7细胞miRNAs表达谱的调控作用。方法:收集各组细胞抽提RNA,RNA质量评估后逆转录成c DNA。采用染料法(SYBR GreenⅠ)进行相对定量分析,实验按照2-△△Ct解析法进行设计。结果:总共检测了168个miRNAs,以上调> 2倍或下调<0. 5倍筛选。相对于S组,N组升高的有9个:miR-223、miR-451a、miR-128、miR-489、miR-141、miR-320a、miR-155-3p、miR-335、miR-320e,降低的有2个:miR-15a、miR-339。结论:筛选得到NT21MP调控miRNAs差异表达谱,其为研究miRNAs在NT21MP调控中的作用机制提供依据。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ N末端21个氨基酸多肽 MIRNAS
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