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咪喹莫特对朗格汉斯细胞及角质形成细胞细胞因子mRNA表达及分泌水平的影响 被引量：3
1
作者 骆丹 缪旭 +4 位作者 吉玺 吴迪 朱洁 林向飞 徐丽贤 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期274-278,共5页
目的观察咪喹莫特(Imiquimod)溶液对人表皮朗格汉斯细胞(LC)及永生化角质形成细胞(KC)株-HaCaT细胞细胞因子mRNA及分泌水平的影响,探讨其免疫调节机制。方法联用密度梯度离心及免疫磁珠法分离纯化人表皮LC,将LC及HaCaT细胞均各分为实验... 目的观察咪喹莫特(Imiquimod)溶液对人表皮朗格汉斯细胞(LC)及永生化角质形成细胞(KC)株-HaCaT细胞细胞因子mRNA及分泌水平的影响,探讨其免疫调节机制。方法联用密度梯度离心及免疫磁珠法分离纯化人表皮LC,将LC及HaCaT细胞均各分为实验组和对照组,实验组加5μgml咪喹莫特,对照组不加药,处理4h后,提取总RNA,采用RTPCR法分别检测各组细胞中细胞因子TNFα、IL1β及IL6mRNA的表达量,取培养上清,用ELISA方法检测3种细胞因子的含量。结果LC实验组TNFα、IL1β及IL63种细胞因子mRNA表达量及分泌量均较对照组显著增高(P<0.05),而HaCaT细胞组加药后3种细胞因子mRNA表达量及分泌量较对照组未见明显增加(P>0.05)。结论5μgml咪喹莫特溶液能增加LC细胞因子TNFα、IL1β及IL6的mRNA表达量,但其对HaCaT细胞上述3种细胞因子mRNA表达量均未见有明显上调作用。 展开更多
关键词 咪喹莫特 朗格汉斯细胞(lc) 角质形成细胞(KC) HaCaT细胞 细胞因子 RTPCR
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人表皮朗格汉斯细胞的分离纯化及其对咪喹莫特免疫刺激作用的反应
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作者 骆丹 缪旭 +4 位作者 吉玺 吴迪 徐丽贤 朱洁 林向飞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期146-150,共5页
目的:探讨获取较高纯度和活性人表皮朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)的实验方法,并观察分选所获人表皮LC接受免疫调节剂咪喹莫特刺激后细胞因子mRNA表达的变化。方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后... 目的:探讨获取较高纯度和活性人表皮朗格汉斯细胞(Langerhans cell,LC)的实验方法,并观察分选所获人表皮LC接受免疫调节剂咪喹莫特刺激后细胞因子mRNA表达的变化。方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后的细胞用结合有FITC的鼠抗人CD1a单抗标记,经流式细胞仪检测LC纯化率,采用0.4%台盼蓝染色检测细胞的活性。将人表皮LC分为实验组和对照组,实验组加5μg/ml咪喹莫特,对照组不加药,处理4小时后提取总RNA,采用RT-PCR法检测各组细胞中细胞因子TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的表达量。结果:流式细胞仪检测分选后LC纯化率为84.48%,台盼蓝染色显示细胞活性>95%。LC经咪喹莫特处理后的实验组TNF-α、IL-1β及IL-6三种细胞因子mRNA表达量均较对照组显著增高(P<0.05)。结论:联合应用密度梯度离心和免疫磁珠法,可获得较高纯度、有活性的LC细胞,且具有操作简单、易于无菌条件下分离纯化的优点。LC能接受咪喹莫特刺激而上调细胞因子mRNA的表达。 展开更多
关键词 朗格汉斯细胞(lc) 密度梯度离心 免疫磁珠 咪喹莫特 细胞因子
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