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基于肾脏类器官研究镁离子减轻顺铂诱导的急性肾损伤的作用和机制
1
作者 吴欢 嵇姞 +4 位作者 鲁敏 宁一纯 孙肇星 丁小强 俞小芳 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期455-464,483,共11页
目的利用肾脏类器官和HK-2细胞研究镁离子(Mg2+)对顺铂诱导的急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)的作用,并探究可能的机制。方法首先利用人源性诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)构建肾脏... 目的利用肾脏类器官和HK-2细胞研究镁离子(Mg2+)对顺铂诱导的急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)的作用,并探究可能的机制。方法首先利用人源性诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)构建肾脏类器官,在此基础上构建Cis-AKI模型,利用HE染色观察肾脏类器官结构,通过免疫荧光染色观察标志物定位及cleaved caspase-3表达,通过qRT-PCR检测肾小管和肾小球标志物及炎症因子mRNA水平。随后将肾脏类器官及HK-2细胞随机分为对照组、顺铂组(Cis组)和Mg2+预处理组(Cis+Mg2+组)。通过CCK-8和ATP含量评估肾小管上皮细胞的活力;利用TUNEL染色检测肾小管上皮细胞凋亡情况;通过Western blot检测细胞凋亡通路的关键蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3及有机阳离子转运体2(organic cation transporter 2,OCT2)表达;通过免疫荧光检测OCT2的定位与表达。结果肾脏类器官培养第10天的肾小管结构清晰,肾脏标志物大量表达;10μmol/L顺铂导致肾脏类器官结构破坏,cleaved caspase-3表达量和炎症因子mRNA水平显著升高,ATP含量显著下降。与Cis组相比,Cis+Mg2+组肾脏类器官ATP含量升高,TUNEL阳性细胞数减少,细胞凋亡相关蛋白表达显著下降,OCT2表达显著下降;而Cis+Mg2+组HK-2细胞活力、TUNEL阳性细胞数及凋亡相关蛋白均无明显改善,且几乎不表达OCT2。结论肾脏类器官是研究Cis-AKI发病与治疗的理想体外模型;Mg2+预处理可显著减轻顺铂所致肾脏类器官的损伤,其机制可能与OCT2的下调有关。 展开更多
关键词 顺铂 急性肾损伤(AKI) 镁离子(Mg2+) 有机阳离子转运体2(oct2) 肾脏类器官
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基于OCT2、MRP2探讨加味生脉饮对Lewis肺癌小鼠顺铂化疗的增效减毒机制 被引量：1
2
作者 徐虹云 吴春玉 +3 位作者 吴林霖 刘庆南 王丹凝 客蕊 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第12期3138-3146,共9页
【目的】观察加味生脉饮对顺铂化疗Lewis肺癌小鼠有机阳离子转运体2(OCT2)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)的影响,探讨其对Lewis肺癌小鼠顺铂化疗的增效减毒机制。【方法】采用腋窝皮下接种Lewis肺癌细胞(LLC)构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成... 【目的】观察加味生脉饮对顺铂化疗Lewis肺癌小鼠有机阳离子转运体2(OCT2)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)的影响,探讨其对Lewis肺癌小鼠顺铂化疗的增效减毒机制。【方法】采用腋窝皮下接种Lewis肺癌细胞(LLC)构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为对照组、顺铂组、联合组(顺铂联合加味生脉饮)和生脉饮组,每组7只小鼠,给药14 d。观察4组小鼠一般状态、肿瘤生长情况,肿瘤、肾脏组织病理学以及血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度。通过免疫组织化学染色(IHC)和Western Blot的方法检测OCT2、MRP2蛋白表达情况,并使用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定肾脏和肿瘤组织中顺铂含量。【结果】(1)给药结束后,各组小鼠体质量均有下降,顺铂组下降幅度最大,顺铂组体质量变化显著高于联合组、生脉饮组(P<0.05),生脉饮组和联合组小鼠一般状态均优于对照组和顺铂组。(2)干预结束时,顺铂组肿瘤体积和质量小于生脉饮组和对照组,联合组肿瘤体积和质量显著小于顺铂组(P<0.05)。(3)组织病理学结果显示:生脉饮组、对照组肿瘤细胞结构清晰,细胞形态正常;顺铂组与联合组可见肿瘤细胞坏死,肿瘤细胞边缘模糊,联合组肿瘤细胞坏死面积更大。生脉饮组、对照组肾脏细胞形态正常;联合组肾脏细胞损伤较轻,无明显病变;顺铂组肾组织明显病变,肾小管上皮细胞边缘模糊。(4)顺铂组小鼠血清BUN、Cr水平显著高于其他3组(P<0.05)。(5)顺铂组肾脏组织OCT2表达相比对照组显著增加,联合组OCT2表达相比顺铂组显著降低(均P<0.05);顺铂组肿瘤组织MRP2表达相比对照组显著增加,联合组MRP2表达相比顺铂组显著降低(均P<0.05)。(6)联合组肿瘤组织中顺铂含量显著高于顺铂组,联合组肾脏组织中顺铂含量显著低于顺铂组(均P<0.05)。【结论】OCT2、MRP2在顺铂肾脏毒性与耐药性中起重要的调控作用,加味生� 展开更多
关键词 加味生脉饮 顺铂 化疗 肺癌 有机阳离子转运体2(oct2) 多药耐药相关蛋白2(MRP2) 肾毒性 小鼠
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基于高尿酸血症小鼠OCT1表达的萆薢渗湿汤降尿酸机制研究 被引量：4
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作者 何惠芳 陈燕 +1 位作者 张诗军 王昌俊 《岭南急诊医学杂志》 2015年第4期301-303,共3页
目的:探讨萆薢渗湿汤对高尿酸血症小鼠的影响及机制。方法:昆明小鼠随机分为空白组、模型组和中药低、高剂量组,检测各组小鼠血清尿酸水平和肾、小肠和大肠各组织中OCT1表达水平。结果:与模型组比较,中药低、高剂量组小鼠血清尿酸水平... 目的:探讨萆薢渗湿汤对高尿酸血症小鼠的影响及机制。方法:昆明小鼠随机分为空白组、模型组和中药低、高剂量组,检测各组小鼠血清尿酸水平和肾、小肠和大肠各组织中OCT1表达水平。结果:与模型组比较,中药低、高剂量组小鼠血清尿酸水平明显降低,小鼠肾、小肠和大肠各组织OCT1表达量明显升高。结论:萆薢渗湿汤能明显降低小鼠血清尿酸水平,其机制可能是上调小鼠肾、小肠和大肠组织OCT1表达水平。 展开更多
关键词 高尿酸血症 萆薢渗湿汤 有机阳离子转运体1(oct1)
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有机阳离子转运体3(OCT3)的生物学特点及其在相关神经精神疾病中的作用
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作者 韩思达 崔梅 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期889-894,共6页
有机阳离子转运体3(organic cation transporter 3,OCT3)是一种广泛分布于脑内的低亲和力单胺类递质转运体,也可以转运各类有机阳离子物质,最重要的特点是多在高亲和力单胺类递质转运体(即经典单胺类递质转运体)饱和或功能障碍时发挥代... 有机阳离子转运体3(organic cation transporter 3,OCT3)是一种广泛分布于脑内的低亲和力单胺类递质转运体,也可以转运各类有机阳离子物质,最重要的特点是多在高亲和力单胺类递质转运体(即经典单胺类递质转运体)饱和或功能障碍时发挥代偿性的转运作用。OCT3可以在经典单胺类转运体功能障碍或数量减少时改变细胞内外单胺递质的水平,调节多种药物的代谢、疗效、不良反应,影响多种神经毒物的致病性和毒品的成瘾效应。该转运体的相关基因突变也影响了宿主对某些神经精神性疾病的易感性。本文先概述OCT3的蛋白分子结构、在脑内的分布、编码该分子的基因结构及翻译后调节的方式,再分别阐述该转运体底物的类型及转运机制,进而围绕OCT3的转运机制阐述其在抑郁症、应激相关性成瘾以及帕金森病(Parkinson’s disease,PD)中的作用。 展开更多
关键词 有机阳离子转运体3(oct3) 抑郁症 应激 成瘾 帕金森病(PD)
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