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旋毛虫肌幼虫排泄分泌物中特异性诊断抗原的研究 被引量：44
1
作者 崔晶 王中全 张灯 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期268-271,共4页
目的　寻找旋毛虫肌幼虫排泄分泌 (ES)物中的特异性诊断抗原。　方法　应用SDS PAGE和Western印迹对旋毛虫肌幼虫体外培养 18、3 0h后的ES抗原中的蛋白组分进行研究。　结果　旋毛虫肌幼虫培养 18、3 0h后得到的ES抗原组分大致相同 ,两... 目的　寻找旋毛虫肌幼虫排泄分泌 (ES)物中的特异性诊断抗原。　方法　应用SDS PAGE和Western印迹对旋毛虫肌幼虫体外培养 18、3 0h后的ES抗原中的蛋白组分进行研究。　结果　旋毛虫肌幼虫培养 18、3 0h后得到的ES抗原组分大致相同 ,两种ES抗原中主要蛋白带的分子量为 112、110、10 8、97、5 3、49、45、42、3 5、2 3和 16kDa。18hES抗原中的 10 2、97、95和 5 3kDa以及 3 0hES抗原中的 5 3、49、45和 43kDa均与并殖吸虫病、华支睾吸虫病、日本血吸虫病及囊尾蚴病患者血清发生明显的交叉反应。ES抗原中的 2 3kDa蛋白组分只与旋毛虫感染的大鼠、小鼠及患者血清反应 ,而不与上述其它寄生虫感染者、正常大鼠和小鼠及正常人血清发生交叉反应。　结论　旋毛虫肌幼虫ES抗原中的 2 3kDa蛋白组分为旋毛虫肌幼虫的特异性抗原 ,可用于旋毛虫病的血清学诊断及血清流行病学调查。 展开更多
关键词 旋毛虫 肌幼虫 排泄分泌物 特异性诊断抗原 SDS-PAGE
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旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠免疫保护作用的比较研究 被引量：21
2
作者 申丽 洁朱声 +1 位作者 华罗仲 金雷莉 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期6-8,共3页
目的　比较旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠的免疫保护作用。方法　收集人工感染大鼠小肠内的成虫， 经研磨和冻融制备成虫可溶性抗原。采用体外培养的方法从培养液中提取旋毛虫成虫排泄分泌抗原。分别用两种抗原免疫小鼠， ... 目的　比较旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠的免疫保护作用。方法　收集人工感染大鼠小肠内的成虫， 经研磨和冻融制备成虫可溶性抗原。采用体外培养的方法从培养液中提取旋毛虫成虫排泄分泌抗原。分别用两种抗原免疫小鼠， 间隔１ 周共免疫３ 次， 末次免疫后１ 周， 每只小鼠攻击感染１００ 条旋毛虫感染性肌肉幼虫。感染后１ 周检查小鼠小肠内成虫数量和雌虫生殖力， 感染后５ 周检查肌肉幼虫负荷。结果　成虫可溶性抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别为７９５５ ％ 、６２２５ ％ 和６５０ ％ 。成虫排泄分泌抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别是９７２７ ％ 、８６６０ ％ 和９００ ％ 。结论　实验结果表明旋毛虫成虫可溶性抗原和成虫排泄分泌抗原均能够诱导宿主产生较强的抗攻击感染的免疫力， 但后者的免疫原性更强。 展开更多
关键词 旋毛虫 成虫 可溶性抗原 排泄分泌抗原
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旋毛虫新生幼虫cDNA文库的构建 被引量：24
3
作者 刘明远 付宝权 +5 位作者 卢强 吴秀萍 姚春雨 宇丽 窦兰清 P.Boireau 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2001年第3期5-7,共3页
为了克隆和研究旋毛虫新生幼虫功能性抗原基因 ,采用酸性异硫氰酸胍 酚 氯仿一步法提取新生幼虫总RNA ,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA ,反转录合成第一链cDNA及第二链cDNA ,用CHROMASPIN 40 0柱离心层析纯化后 ,与载体λZAPExpress连接... 为了克隆和研究旋毛虫新生幼虫功能性抗原基因 ,采用酸性异硫氰酸胍 酚 氯仿一步法提取新生幼虫总RNA ,Oligo(dT)纤维素柱纯化mRNA ,反转录合成第一链cDNA及第二链cDNA ,用CHROMASPIN 40 0柱离心层析纯化后 ,与载体λZAPExpress连接。体外包装后得到中国猪旋毛虫 (Trichinellaspiralis)分离株新生幼虫cDNA文库。文库容量为2 .0× 10 6,重组率为 98.6 % ,插入片段长度在 0 .4× 10 3— 2 .0× 10 3bp。 展开更多
关键词 旋毛虫 新生幼虫 CDNA文库 功能性抗原基因 猪
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我国首次发现乡土旋毛虫的研究报告 被引量：23
4
作者 许汴利 崔兆麟 +2 位作者 张玉林 蔺西萌 夏胜利 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期257-262,共6页
目的 :对我国两株旋毛虫进行虫种归属鉴定。方法 :通过生物学特性的比较研究。结果 :单对虫体杂交试验 ,表明河南猪株与黑龙江犬株存在生殖隔离现象 ;冷冻耐力试验 ,在 - 15℃下 ,前者 9d即死亡 ,后者可存活 1年以上 ;在 4℃ ,前者肌肉... 目的 :对我国两株旋毛虫进行虫种归属鉴定。方法 :通过生物学特性的比较研究。结果 :单对虫体杂交试验 ,表明河南猪株与黑龙江犬株存在生殖隔离现象 ;冷冻耐力试验 ,在 - 15℃下 ,前者 9d即死亡 ,后者可存活 1年以上 ;在 4℃ ,前者肌肉期幼虫呈圆盘状卷曲 ,后者呈螺旋状卷曲 ;生殖力指数 ( RCI)在小鼠试验分别为 195.7和 6.2 ( P<0 .0 1) ,在大鼠分别为 191.3和 14.4 ( P<0 .0 1) ;前者对家猪易感 ,后者不易感 ;随机扩增多态性 DNA指纹分析其扩增后产物的 DNA片段电泳带型 ,河南猪株旋毛虫与 T.spiralis基本相同 ,黑龙江犬株旋毛虫与 T.nativa一致。结论 :我国至少存在上述两种旋毛虫 ,即 :河南猪株旋毛虫系 T.spiralis,黑龙江犬株旋毛虫系 T.nativa。 展开更多
关键词 旋毛虫 乡土旋毛虫 多态性 DNA 生殖力 冷冻耐力
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中国旋毛虫分离株成虫和新生幼虫基因文库的构建及筛选 被引量：19
5
作者 刘明远 徐克诚 +4 位作者 黎诚耀 柳增善 孙远涛 赵君 郑明光 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期147-150,共4页
利用λＺＡＰⅡ载体构建了中国分离株Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ及Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｎａｔｉｖａ成虫和新生幼虫ｃＤ－ＮＡ基因文库，检测结果表明，所克隆的ｃＤＮＡ片段分布在０．２～２．０ｋｂ之间，表明２个ｃＤＮ... 利用λＺＡＰⅡ载体构建了中国分离株Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ及Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｎａｔｉｖａ成虫和新生幼虫ｃＤ－ＮＡ基因文库，检测结果表明，所克隆的ｃＤＮＡ片段分布在０．２～２．０ｋｂ之间，表明２个ｃＤＮＡ基因文库对ｍＲＮＡ的覆盖面很大。利用ＲＡＰＤ技术，以肌幼虫基因文库作对照，采用７０个单引物及２０对复合引物对以上２个文库进行筛选扩增，结果：（１）共获得２条Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ及４条Ｔ．ｎａｔｉｖａ的成虫与新生幼虫特异性基因片段，鉴于成虫与新生幼虫是旋毛虫的２个侵袭性阶段，其所特有的特异性基因片段极有可能就是这２个时期虫体的侵袭性因子基因，即所要寻找的强保护性抗原基因，从而为后续研究奠定了基础；（２）发现１条Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ种特有的基因片段，这一特异性基因片段为虫种鉴定提供了物质条件；（３）发现旋毛虫同种不同分离株（中国分离株及法国分离株）间ｃＤＮＡ文库扩增图谱完全相同。 展开更多
关键词 旋毛虫 成虫 新生幼虫 基因文库
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旋毛虫属分类的研究进展 被引量：24
6
作者 王中全 崔晶 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期310-314,共5页
关键词 旋毛虫 分类 生物学 动物地理学
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旋毛虫肌幼虫ES抗原特异性蛋白2个结构基因的分子克隆及其高效表达 被引量：20
7
作者 阎玉河 童光志 卢景良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期581-588,共8页
旋毛虫肌幼虫排泄－分泌（ＥＳ）抗原来源于体外培养的旋毛虫肌幼虫的排泄－分泌物。为研制具有ＥＳ抗原功能的旋毛虫基因重组抗原，首先用ＡＧＰＣ法提取旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ并进行变性琼脂糖凝胶电泳分析，发现它缺少真核生物所具有... 旋毛虫肌幼虫排泄－分泌（ＥＳ）抗原来源于体外培养的旋毛虫肌幼虫的排泄－分泌物。为研制具有ＥＳ抗原功能的旋毛虫基因重组抗原，首先用ＡＧＰＣ法提取旋毛虫肌幼虫总ＲＮＡ并进行变性琼脂糖凝胶电泳分析，发现它缺少真核生物所具有的２８ＳｒＲＮＡ。根据编码４５０００和４９０００蛋白的基因结构，设计并合成２对ＰＣＲ引物，用ＲＴ－ＰＣＲ方法分别扩增出了２个目的基因（ＴＳＰＧ和ＴＳＰＧⅡ）。序列分析发现，ＴＳＰＧ在第４５８到５０５位之间的核苷酸编码框架与结构基因Ｐ４５的不同，此外，还有多处出现与Ｐ４５不同的碱基。在ＴＳＰＧⅡ核苷酸序列中只有１个碱基与Ｐ４９不同。根据可识别的糖基化位点判定，ＴＳＰＧ和ＴＳＰＧⅡ各含有１个Ｎ－型连接的糖基化位点。将构建的３个重组质粒转化大肠杆菌，通过温度诱导培养，分别在大肠杆菌中表达出３７０００、４６０００和３４０００的重组蛋白，三者的表达水平分别为２２％、１０％和８％；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析和ＥＬＩＳＡ检测表明，它们均可被猪旋毛虫病阳性血清和单克隆抗体识别，但特异性有所不同。将ＴＳＰＧⅡ克隆至Ｅ．ｃｏｌｉ－Ｙｅａｓｔ穿梭载体ｐＨＩＬ－Ｓ１上，经内切酶消化和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交鉴定后，? 展开更多
关键词 旋毛虫 ES抗原 基因克隆 高效表达
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旋毛虫成虫cDNA文库免疫筛选及序列分析 被引量：21
8
作者 杨雅平 诸欣平 +2 位作者 杨静 周蕾 黄松 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期270-273,共4页
目的　为获得旋毛虫成虫抗原基因。　方法　应用免疫血清和人工感染血清对旋毛虫成虫cDNA文库进行免疫筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库 (GenBank)查寻比较 ,采用DNAstar软件进行基因序列分析。　结果　免疫筛选成虫cDNA文库 ,获得 9... 目的　为获得旋毛虫成虫抗原基因。　方法　应用免疫血清和人工感染血清对旋毛虫成虫cDNA文库进行免疫筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库 (GenBank)查寻比较 ,采用DNAstar软件进行基因序列分析。　结果　免疫筛选成虫cDNA文库 ,获得 9个阳性克隆。对其中的Ts87进行测序 ,又采用 5′ RACE ,获取全长为 1172bp的cDNA片段 ,该基因编码 3 47个氨基酸。序列分析表明 ,克隆Ts87是个尚未见报道的旋毛虫基因序列 ,存在预测的抗原表位。　结论　获得具有抗原性的旋毛虫抗原新基因。 展开更多
关键词 旋毛虫 成虫 CDNA文库 免疫筛选 序列分析 抗原基因
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用DNA限制性片段长度多态性鉴定中国旋毛虫3个分离株 被引量：22
9
作者 诸欣平 刘明远 +2 位作者 王凤云 周蕾 宋铭忻 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 1998年第2期101-105,共5页
以旋毛虫国际标准虫株Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ（Ｔｓ）、Ｔ．ｎａｔｉｖａ（Ｔｎ）和Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ（Ｔｎｅ）作对照，利用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）差异对分离自我国黑龙江省３株旋毛虫进行虫种归属鉴定。５种内切酶实验结... 以旋毛虫国际标准虫株Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ（Ｔｓ）、Ｔ．ｎａｔｉｖａ（Ｔｎ）和Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ（Ｔｎｅ）作对照，利用限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）差异对分离自我国黑龙江省３株旋毛虫进行虫种归属鉴定。５种内切酶实验结果显示：黑龙江猪株（ＨＬ）与Ｔｓ酶切图谱相同；犬株（ＷＣ）与Ｔｎ酶谱相同；猫株（ＳＷ）与Ｔｎ的ＤｒａⅠ，ＰｓｔⅠ，ＨａｅⅢ酶谱相近，而与Ｔｎｅ酶谱差异显著。提示：黑龙江猪株系Ｔｓ；犬株系Ｔｎ；猫株在分类归属上似乎与Ｔｎ靠近。 展开更多
关键词 旋毛虫 限制性片段长度 多态性 虫种鉴定
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旋毛虫幼虫囊包的结构及其形成机制 被引量：22
10
作者 崔晶 《国外医学（寄生虫病分册）》 CAS 2002年第5期196-199,共4页
本文介绍了近年来国外学者对旋毛虫幼虫囊包(营养细胞-感染性第1期幼虫复合体)的结构及其形成机制的研究进展。
关键词 旋毛虫 幼虫囊包 结构 形成机制
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用随意扩增的DNA多态性鉴定中国分离的部分旋毛虫虫株 被引量：19
11
作者 刘明远 宋铭忻 +7 位作者 杨瑞馥 陈佩慧 安春丽 柳增善 郭兆彪 侯顺利 路易鑫 诸欣平 《中国兽医科技》 CSCD 1997年第2期18-20,共3页
以旋毛虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ）国际标准虫种作对照，利用随意扩增的ＤＮＡ多态性技术对国内的部分旋毛虫分离株进行了鉴定与分析。经５条引物的单扩增及复合扩增结果显示，中国的旋毛虫猪株为Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ... 以旋毛虫（Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌａｓｐｉｒａｌｉｓ）国际标准虫种作对照，利用随意扩增的ＤＮＡ多态性技术对国内的部分旋毛虫分离株进行了鉴定与分析。经５条引物的单扩增及复合扩增结果显示，中国的旋毛虫猪株为Ｔ．ｓｐｉｒａｌｉｓ，犬株为Ｔ．ｎａ－ｔｉｖａ，猫株为Ｔ．ｎｅｌｓｏｎｉ。 展开更多
关键词 旋毛虫 DNA 多态性 虫种鉴定
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用SSR-PCR和RAPD技术研究中国不同地域旋毛虫株的遗传变异 被引量：17
12
作者 李莉 牛安欧 +1 位作者 刘蓉 方正明 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期757-761,共5页
目的　对中国不同地域的旋毛虫株基因组DNA进行多态性分析 ,并为其种及种下分类提供依据。方法　采用微卫星锚定PCR(SSR PCR)及随机扩增多态性DNA技术 (RAPD)对我国 6旋毛虫株基因组DNA进行PCR扩增 ,根据扩增产物电泳条带情况进行SAS分... 目的　对中国不同地域的旋毛虫株基因组DNA进行多态性分析 ,并为其种及种下分类提供依据。方法　采用微卫星锚定PCR(SSR PCR)及随机扩增多态性DNA技术 (RAPD)对我国 6旋毛虫株基因组DNA进行PCR扩增 ,根据扩增产物电泳条带情况进行SAS分析 ,计算遗传距离并构建进化树。结果　T3、T7与国内各地域株间遗传距离均大于 0 85 ;湖北株与天津株、黑龙江株与云南株之间的遗传距离均小于 0 2。河南株与前 4株的遗传距离在SSR PCR小于 0 3,在RAPD小于0 6。结论　中国 6株旋毛虫在基因水平可分为不同层次的 3类 :a 湖北株、天津株为一类 ;b 黑龙江株、云南株为一类 ;c 不明株与河南株归为一类或者不明株归为a类中。国内 6株归属于T1。此外 ,国际标准株T3。 展开更多
关键词 旋毛虫 遗传变异 RAPD SSR-PCR 种株
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日本血吸虫不同发育阶段与旋毛虫抗原交叉性的研究 被引量：15
13
作者 田明礼 易新元 +1 位作者 曾宪芳 曾庆仁 《湖南医科大学学报》 CSCD 1998年第3期225-228,共4页
运用ＥＩＴＢ技术分析日本血吸虫（Ｓｊ）尾蚴、肝期童虫及雌雄成虫与旋毛虫（Ｔｓ）肌蚴抗原的交叉性。结果显示：Ｓｊ尾蚴、肝期童虫、成虫各阶段不同程度地被抗－ＴｓＳＡＲＳ，ＴｓＩＲＳ识别，其识别的抗原分子量在１５～１００（... 运用ＥＩＴＢ技术分析日本血吸虫（Ｓｊ）尾蚴、肝期童虫及雌雄成虫与旋毛虫（Ｔｓ）肌蚴抗原的交叉性。结果显示：Ｓｊ尾蚴、肝期童虫、成虫各阶段不同程度地被抗－ＴｓＳＡＲＳ，ＴｓＩＲＳ识别，其识别的抗原分子量在１５～１００（尤５０～７０）ｋＤ之间，两种抗血清识别的带型基本相同。所识别的各期Ｓｊ抗原中以尾蚴抗原最多，次为肝期童虫。３０天成虫仅雌虫抗原与上述两种抗血清在９７ｋＤ处显出一条弱带。抗－ＳｊＡＲＳ，ＳｊＩＲＳ识别ＴｓＳＡ中抗原成份分子量基本在３４ｋＤ以上，以３４ｋＤ和３５～３８ｋＤ带最为明显。提示Ｔｓ与Ｓｊ之间存在较多的交叉抗原，主要在幼虫阶段。 展开更多
关键词 日本血吸虫 旋毛虫 抗原类 交叉反应
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旋毛虫p49抗原基因克隆体外表达条件的研究 被引量：14
14
作者 张伟光 蔡海松 +3 位作者 林新坚 刘光明 宋思扬 苏文金 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1998年第2期7-10,共4页
旋毛虫肌幼虫排泄一分泌（ES）抗原是用于旋毛虫病免疫检测的理想抗原，包括45kD、49kD和53kD三种主要的特异性蛋白成分。本文利用含有P49抗原基因克隆的重组表达质粒pGEX—p49，电转化大肠杆菌，获得DH5α／pGEX—p49转化子。SDS—PAG... 旋毛虫肌幼虫排泄一分泌（ES）抗原是用于旋毛虫病免疫检测的理想抗原，包括45kD、49kD和53kD三种主要的特异性蛋白成分。本文利用含有P49抗原基因克隆的重组表达质粒pGEX—p49，电转化大肠杆菌，获得DH5α／pGEX—p49转化子。SDS—PAGE电泳表明，含重组质粒pGEX—p49的大肠杆菌能表达-分子量为61kD的融合蛋白（p49／GST），Western—blot表明该融合蛋白能被鼠旋毛虫病阳性血清特异识别。为提高融合蛋白的表达量，本文对宿主菌诱导条件、诱导物浓度、诱导时细菌生长状态等条件与表达量的关系进行了研究。 展开更多
关键词 旋毛虫 ES抗原 融合蛋白 P49基因 基因表达
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旋毛虫p49抗原相关抗体的快速检测 被引量：11
15
作者 宋思扬 蔡海松 +4 位作者 张伟光 林新坚 郑忠辉 黄耀坚 苏文金 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第1期26-28,共3页
目的　建立旋毛虫病的快速检测技术。方法　基因工程抗原包被有色乳胶颗粒，抗抗体包被磁性颗粒，在抗体存在下形成抗原－ 乳胶－ 抗体－ 抗抗体－ 磁性颗粒的复合场，在磁场作用下沉淀下来，从而达到快速检测旋毛虫相关抗体的目的。结... 目的　建立旋毛虫病的快速检测技术。方法　基因工程抗原包被有色乳胶颗粒，抗抗体包被磁性颗粒，在抗体存在下形成抗原－ 乳胶－ 抗体－ 抗抗体－ 磁性颗粒的复合场，在磁场作用下沉淀下来，从而达到快速检测旋毛虫相关抗体的目的。结果　１９ 份人工感染鼠血清、５ 份人工感染猪血清、３ 份旋毛虫病猪血清、４ 份病人血清均呈阳性反应，而对照血清均为阴性反应；该方法在鼠感染旋毛虫后第五天可测出ＩｇＭ 抗体，第九天可测出ＩｇＧ抗体。结论　本检测技术简便易行，不需专用设备，可望成为一种快速诊断旋毛虫病的有效方法。 展开更多
关键词 旋毛虫 融合蛋白 乳胶-磁性 p49抗原
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旋毛虫新生幼虫差减cDNA文库的构建及其初步筛选 被引量：14
16
作者 刘明远 黎诚耀 +6 位作者 吴秀萍 JFFabien 付宝权 CTrap 卢强 张西臣 PBoireau 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期355-358,共4页
利用差减杂交 (减法杂交 ,subtractive hybridization)技术 ,以旋毛虫新生幼虫 ( newborn larvae,NBL)的 c DNA作为试验方 ( tester) ,以肌幼虫 +成虫的 c DNA作为驱动方 ( driver) ,制备新生幼虫差减 c DNA;利用 T载体构建 NBL差减 c ... 利用差减杂交 (减法杂交 ,subtractive hybridization)技术 ,以旋毛虫新生幼虫 ( newborn larvae,NBL)的 c DNA作为试验方 ( tester) ,以肌幼虫 +成虫的 c DNA作为驱动方 ( driver) ,制备新生幼虫差减 c DNA;利用 T载体构建 NBL差减 c DNA文库 ,获克隆株 90个。以试验方的差减 c DNA第 2次 PCR产物 +未差减c DNA为试验方探针 ,以驱动方的差减 c DNA第 2次 PCR产物 +未差减 c DNA为驱动方探针 ,在 NBL差减c DNA文库中初筛 NBL的期特异性克隆 ,获初筛克隆 2 4个。这些初筛期特异性克隆进一步用 Southern blot确认鉴定 ,获真阳性期特异性克隆 2个 ( NBL SSC1 ,NBL SSC2 )。DNASIS以及 Blaster的分析结果显示 ,这2个克隆为旋毛虫的 2个新基因 ,其中 NBL SSC1编码糖蛋白 ,NBL SSC2编码丝氨酸蛋白酶。本试验为旋毛虫期特异性基因全长序列的调取、分析。 展开更多
关键词 旋毛虫 新生幼虫 期特异性基因 差减文库 CDNA文库
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旋毛虫死活快速鉴别的实验研究 被引量：17
17
作者 沈玉娟 常正山 张永年 《中国兽医寄生虫病》 2003年第4期21-22,共2页
为了寻找快速鉴别旋毛虫死活的染色方法。用 0 .0 3 %美蓝、美蓝 -伊红 -硼砂染液 (M.E.B)和 1%中性红3种染液 ,对死或活旋毛虫幼虫和成虫进行染色。结果 3种染液均能使死亡旋毛虫幼虫在 1分钟内着色 ,活虫则不着色。 3种染液对旋毛虫... 为了寻找快速鉴别旋毛虫死活的染色方法。用 0 .0 3 %美蓝、美蓝 -伊红 -硼砂染液 (M.E.B)和 1%中性红3种染液 ,对死或活旋毛虫幼虫和成虫进行染色。结果 3种染液均能使死亡旋毛虫幼虫在 1分钟内着色 ,活虫则不着色。 3种染液对旋毛虫死、活成虫均不着色。结论认为 展开更多
关键词 旋毛虫 幼虫 成虫 美蓝 M.E.B. 中性红 染色
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免疫层析试纸条诊断旋毛虫病的研究 被引量：15
18
作者 秦银霞 崔晶 王中全 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期866-868,共3页
目的建立一种能诊断人体旋毛虫病及动物旋毛虫感染的快速血清学方法。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条(immunochromatographic strip),对旋毛虫病及其它寄生虫病患者血清、旋毛虫及其它寄生虫感染的动物血清... 目的建立一种能诊断人体旋毛虫病及动物旋毛虫感染的快速血清学方法。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条(immunochromatographic strip),对旋毛虫病及其它寄生虫病患者血清、旋毛虫及其它寄生虫感染的动物血清进行检测。结果试纸条检测旋毛虫病患者与旋毛虫感染的小鼠、大鼠、兔、猪血清的阳性率分别为100%(20/20)、97.87%(92/94)、100%(5/5)、100%(5/5)及100%(25/25),15min内肉眼可观察结果;其它寄生虫病(并殖吸虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病、囊虫病及包虫病等)患者及正常人血清、其它寄生虫感染动物及正常动物血清均为阴性。试纸条和ELISA对100条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率分别为91.3%(21/23)和95.7%(22/23)(χ2=0.36,P>0.05),两种方法对200～500条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率均为100%(71/71)。试纸条对乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠血清检测的阳性率亦均为100%。试纸条在4℃可保存13个月,检测结果在室温可保存3个月。结论该试纸条可用于人体旋毛虫病和动物旋毛虫感染的快速血清学诊断,也可用于其它种旋毛虫感染的血清流行病学调查。 展开更多
关键词 旋毛虫 旋毛虫病 免疫层析试纸条 血清学诊断
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旋毛虫抗小鼠体内A549肺癌细胞作用的研究 被引量：17
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作者 宫鹏涛 张西臣 +4 位作者 李建华 张国才 杨举 曹利利 张景芝 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第3期200-202,共3页
目的观察旋毛虫对BALB/c小鼠体内A549瘤细胞生长的抑制作用。方法将实验小鼠(BALB/c)随机分为7组,每组10只,1～6组分别接种未处理或不同方法处理的旋毛虫,在不同时间段接种A549细胞。7组为不接种旋毛虫对照组。荷瘤后第30d解剖小鼠,测... 目的观察旋毛虫对BALB/c小鼠体内A549瘤细胞生长的抑制作用。方法将实验小鼠(BALB/c)随机分为7组,每组10只,1～6组分别接种未处理或不同方法处理的旋毛虫,在不同时间段接种A549细胞。7组为不接种旋毛虫对照组。荷瘤后第30d解剖小鼠,测定小鼠体内肿瘤的体积、重量和无瘤生长小鼠比率,检测T淋巴细胞亚群变化。结果未处理旋毛虫接种组,紫外线处理及60Co处理旋毛虫接种组小鼠肿瘤体积和重量均显著低于未接种对照组(P<0.01),脾脏CD3+、CD4+、CD8+百分率、CD4+/CD8+比值及无瘤生长小鼠比率显著高于未接种对照组(P<0.05或P<0.01);接种前7d和接种后11d荷瘤组小鼠的肿瘤体积、重量均显著低于未接种对照组(P<0.01),脾脏CD3+、CD4+、CD8+百分率及CD4+/CD8+比值显著高于未接种对照组(P<0.05)。结论未处理旋毛虫和经不同方法处理的旋毛虫对BALB/c小鼠体内的A549肺癌细胞的生长均有抑制作用,接种11d后荷瘤组的抑瘤效果更显著。 展开更多
关键词 旋毛虫 A549肺癌细胞 抑瘤效果 小鼠
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噬菌体表达短肽模拟旋毛虫抗原表位及其抗血吸虫保护性免疫研究 被引量：12
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作者 周东明 易新元 +2 位作者 曾宪芳 王敏 Larry McReynolds 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期268-271,共4页
目的　从噬菌体随机肽库中筛选出模拟旋毛虫特异性抗原表位的短肽分子 ,探讨其抗血吸虫的交叉免疫保护效果。　方法　以纯化的旋毛虫感染鼠血清IgG为配基 ,亲合筛选法富集特异性噬菌体 ,随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性 ;混合噬... 目的　从噬菌体随机肽库中筛选出模拟旋毛虫特异性抗原表位的短肽分子 ,探讨其抗血吸虫的交叉免疫保护效果。　方法　以纯化的旋毛虫感染鼠血清IgG为配基 ,亲合筛选法富集特异性噬菌体 ,随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性 ;混合噬菌体克隆经皮下免疫小鼠 3次 ,攻击感染后第 4 5天剖杀小鼠 ,观察减虫和减卵效果。　结果　经 3轮筛选 ,特异性噬菌体得到了有效的富集 ,第三轮洗脱噬菌体的产量约为第一轮的 15 0倍。随机挑取 2 4个噬菌体克隆经ELISA测定 ,有 2 1个克隆能与旋毛虫感染鼠血清IgG特异性反应。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率与减卵率分别为 4 2 8%与 6 6 3% (P <0 0 0 1)。　结论　利用噬菌体随机肽库技术可获得模拟旋毛虫特异性抗原表位的短肽分子 ,这些短肽分子能诱导明显的抗血吸虫的保护性免疫。 展开更多
关键词 日本血吸虫 旋毛虫 模拟表位 噬菌体随机肽库
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