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新风胶囊含药血清通过调控环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB)影响类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡
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作者 李舒 万磊 +6 位作者 刘健 黄传兵 李方泽 程静 胡赛赛 陈莹莹 朱子衡 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期792-799,共8页
目的探讨新风胶囊(XFC)含药血清通过调控环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB)对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的影响。方法XFC灌胃大鼠,制备含药血清。人RA-FLS来源于RA患者滑膜组织,用100μL的10 ng/mL肿瘤坏死因子... 目的探讨新风胶囊(XFC)含药血清通过调控环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB)对类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)增殖、凋亡的影响。方法XFC灌胃大鼠,制备含药血清。人RA-FLS来源于RA患者滑膜组织,用100μL的10 ng/mL肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激RA-FLS建立模型。构建pcDNA3.1-circ-CBLB及阴性对照,分别转染至RA-FLS中。实验分为对照组、TNF-α处理的RA-FLS组、XFC处理的RA-FLS组、pcDNA3.1-circ-CBLB-NC转染的RA-FLS组(过表达空转组)、pcDNA3.1-circ-CBLB转染的RA-FLS组(过表达组)、pcDNA3.1-circ-CBLB联合XFC处理的RA-FLS组(过表达给药组)。采用CCK-8法检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞周期与凋亡,采用实时定量PCR检测circ-CBLB表达水平,采用ELISA检测抗炎因子白细胞介素4(IL-4)、IL-10,促炎因子IL-6、TNF-α水平。结果XFC最佳含药血清量为200 mL/L,处理时间为72 h;与同一时间模型组相比,XFC组、过表达组、过表达给药组的细胞活力均下降。与模型组比较,XFC组、过表达组、过表达给药组circ-CBLB表达水平升高、凋亡率升高,S期和G2期细胞比例增加,IL-4、IL-10含量升高,IL-6、TNF-α含量降低。结论XFC处理上调RA-FLS中circ-CBLB表达,提高抗炎因子的水平,降低促炎因子的水平,抑制RA-FLS的细胞活力,提高其凋亡率,延长细胞周期,抑制RA-FLS增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 新风胶囊(xfc) 环状RNA Cbl原癌基因B(circ-CBLB) 成纤维细胞样滑膜细胞(FLS) 细胞增殖 细胞凋亡 细胞因子
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新风胶囊通过抑制成纤维细胞样滑膜细胞的长链非编码RNA和NF-κB表达减轻类风湿关节炎的炎症反应 被引量:3
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作者 文建庭 刘健 +1 位作者 王馨 王杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期640-645,共6页
目的 研究长链非编码RNA ENST00000619282(lncRNA ENST00000619282)、 miR-148b-5p、核因子κB(NF-κB)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)中的表达,以及新风胶囊(XFC)的干预作用。方法 收集正... 目的 研究长链非编码RNA ENST00000619282(lncRNA ENST00000619282)、 miR-148b-5p、核因子κB(NF-κB)在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的类风湿性关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)中的表达,以及新风胶囊(XFC)的干预作用。方法 收集正常人和XFC治疗前后RA患者外周血单个核细胞(PBMC)各30例,观察ENST00000619282的表达、与临床指标的相关性分析及XFC的治疗作用;建立RA-FLS永生化细胞系,制备XFC含药血清,观察XFC含药血清对RA-FLS ENST00000619282、 miR-148b-5p及NF-κB通路表达的影响。结果 与正常组相比,RA患者ENST00000619282表达显著升高,受试者工作特征(ROC)曲线结果显示ROC曲线下面积(AUC)为0.7166, Spearman相关性分析结果表明,ENST00000619282与病程、 IgA呈负相关,与28关节疾病活动度评分(DAS28)、视觉模拟评分(VAS)、血沉(ESR)、 C反应蛋白(CRP)呈正相关;XFC治疗后,ENST00000619282表达显著下降。CCK-8法结果显示,TNF-α对RA-FLS最佳处理剂量和时间分别为10 ng/mL和48 h, XFC对RA-FLS的最佳干预浓度和时间分别为648 mg/100 gXFC和72 h。实时定量PCR结果显示,与RA-FLS组相比,TNF-α处理的RA-FLS组ENST00000619282、 B细胞κ多肽基因增强子抑制蛋白激酶γ(IKBKG)、核因子κB抑制蛋白激酶α(IKKα)、 IKKβ、核因子κB抑制蛋白α(IκBα)、 NF-κB p65的表达显著升高,miR-148b-5p的表达显著降低;经XFC处理后,ENST00000619282、 IKBKG、 IKKα、 IKKβ、 IκBα、 NF-κB p65的表达显著降低,miR-148b-5p的表达显著升高。免疫荧光结果显示,与RA-FLS相比,TNF-α处理的RA-FLS组IKBKG蛋白的表达显著升高;经XFC处理后,IKBKG蛋白的表达显著降低。结论 ENST00000619282在RA-PBMC和RA-FLS中表达均升高,XFC通过下调ENST00000619282和NF-κB的表达、上调miR-148b-5p的表达,抑制RA炎症免疫反应和细胞凋亡。 展开更多
关键词 新风胶囊(xfc) 成纤维细胞样滑膜细胞(FLS) 外周血单个核细胞(PBMC) ENST00000619282 核因子κB(NF-κB)
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