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牛睫毛毛囊生长期毛乳头细胞cDNA表达文库的构建 被引量:1
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作者 吴晓梅 郁枫 +2 位作者 陈佳 苏小舟 李静 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期22-25,共4页
为构建高质量的牛睫毛毛囊生长期毛乳头细胞cDNA表达文库,以新生荷斯坦牛上眼睑为组织材料,显微解剖分离出高纯度的生长期牛睫毛乳头,Trizol一步法提取总RNA后纯化mRNA;用ZAP Ex-press cDNA Synthesis Kit合成双链cDNA,进行末端修饰后接... 为构建高质量的牛睫毛毛囊生长期毛乳头细胞cDNA表达文库,以新生荷斯坦牛上眼睑为组织材料,显微解剖分离出高纯度的生长期牛睫毛乳头,Trizol一步法提取总RNA后纯化mRNA;用ZAP Ex-press cDNA Synthesis Kit合成双链cDNA,进行末端修饰后接入ZAP表达载体。经GigapackⅢGold Pack-aging extract体外包装,转染XL1-Blue MRF′宿主菌,形成初级文库后进一步扩增,形成稳定的cDNA文库,文库库容量为3.3×107pfu/mL,重组率达95%。为进一步筛选、克隆生长期睫毛毛乳头特异性表达的基因、阐明睫毛毛囊发育的基因调控之分子机制奠定了研究基础。 展开更多
关键词 新生斯坦 睫毛毛囊 生长期 毛乳头 CDNA表达文库
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