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复合探针实时荧光PCR检测细菌耐药基因bla_(NDM-1)方法的建立 被引量:2
1
作者 吕虹 刘志红 +3 位作者 刘琪琦 孙晓彦 陈苏红 王升启 《生物技术通讯》 CAS 2012年第3期411-414,共4页
目的:建立一种检测编码新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1)的细菌耐药基因blaNDM-1的复合探针实时荧光PCR方法。方法:基于复合探针技术原理,以blaNDM-1基因作为待检靶基因建立检测方法,对PCR扩增体系中镁离子浓度、PCR退火温度等进行优化,并... 目的:建立一种检测编码新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1)的细菌耐药基因blaNDM-1的复合探针实时荧光PCR方法。方法:基于复合探针技术原理,以blaNDM-1基因作为待检靶基因建立检测方法,对PCR扩增体系中镁离子浓度、PCR退火温度等进行优化,并对检测的灵敏性、特异性、重复性等进行评价。结果:优化了最佳反应体系和扩增条件;以灵敏度质控品进行灵敏度实验,最低检测限可达2拷贝/体系;非耐药性菌株的检测结果均为阴性;批间批内变异系数均小于5%;只有产NDM-1的鲍曼不动杆菌检测为阳性,其他377株临床分离菌和阴性对照均无响应。结论:建立了检测含blaNDM-1基因的菌株的方法,具有很好的灵敏性、特异性和重复性。 展开更多
关键词 新德里金属β内酰胺酶1 blaNDM-1基因 实时荧光PCR 复合探针 分子诊断技术
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泛耐药基因NDM-1在大肠杆菌中的克隆表达及耐药性检测
2
作者 邹大阳 刘威 +6 位作者 尚伟 魏晓 李雪莲 王雪松 尹志涛 袁静 黄留玉 《生物技术通讯》 CAS 2012年第5期662-664,672,共4页
目的:构建bla(NDM-1)基因重组质粒,表达新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1),并检测携带bla(NDM-1)基因重组质粒的大肠杆菌的耐药状况。方法:PCR扩增编码NDM-1的基因bla(NDM-1),构建表达载体pGEX4T-1-NDM-1,并转化至大肠杆菌,转化子经PCR后测... 目的:构建bla(NDM-1)基因重组质粒,表达新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1),并检测携带bla(NDM-1)基因重组质粒的大肠杆菌的耐药状况。方法:PCR扩增编码NDM-1的基因bla(NDM-1),构建表达载体pGEX4T-1-NDM-1,并转化至大肠杆菌,转化子经PCR后测序,以确认构建和转化成功;用Western印迹验证重组蛋白的表达;用药敏纸片法检测含重组质粒pGEX4T-1-NDM-1的大肠杆菌的耐药谱;用E-test法测定其最低抑菌浓度(MIC)。结果:PCR及测序结果显示载体构建和转化成功;含重组质粒pGEX4T-1-NDM-1的大肠杆菌在37℃时,经1 mmol/LIPTG诱导5 h后,SDS-PAGE可见目的条带;除对替加环素和粘菌素敏感外,该重组子对多种碳青霉烯类抗生素耐药,E-test检测其对亚胺培南的MIC为64μg/mL。结论:构建了含泛耐药基因bla(NDM-1)的重组质粒,转入大肠杆菌后表达了融合蛋白,并对多种碳青霉烯类抗生素耐药。为进一步研究bla(NDM-1)基因和蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 新德里金属β内酰胺酶1 克隆表达 耐药性
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携带NDM-1基因ST571型肺炎克雷伯菌引起新生儿医院感染暴发的研究 被引量:13
3
作者 贾楠 李延年 +3 位作者 董丹丹 张会 李宜雷 朱元祺 《中国实验诊断学》 2017年第11期1873-1876,共4页
目的调查某医院儿科分离的6株对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的耐药基因型和相互间的同源性,为控制医院感染提供依据。方法采用梅里埃Vitek-2Compact对6株肺炎克雷伯菌进行鉴定及药敏试验。改良Hodge试验和金属酶E条检测菌株是否产碳青... 目的调查某医院儿科分离的6株对碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的耐药基因型和相互间的同源性,为控制医院感染提供依据。方法采用梅里埃Vitek-2Compact对6株肺炎克雷伯菌进行鉴定及药敏试验。改良Hodge试验和金属酶E条检测菌株是否产碳青霉烯酶。聚合酶链式反应扩增菌株是否携带碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶和Ampc等耐药基因,并测序确定其基因型。多位点序列(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)验证菌株之间的同源性。结果 6株肺炎克雷伯菌表现为多重耐药性,对临床常用的抗生素耐药。所有菌株改良Hodge和金属酶E条试验均阳性,且携带多个耐药基因。其中5株菌,分别携带NDM-1、SHV-11、DHA-1、oqxA和fosA3基因。另外1株ST11型肺炎克雷伯菌携带KPC-2、CTX-M-65、TEM-1和OXA-1基因。5株携带NDM-1基因的肺炎克雷伯菌中,有4株的PFGE带型相同,且都为ST571型,另一株为ST76型,带型与前4株不同。结论新生儿病房中存在携带NDM-1、SHV-11、DHA-1、oqxA和fosA3基因的ST571型肺炎克雷伯菌引起的医院感染暴发。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 生儿 医院感染 新德里金属β内酰胺酶1型
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1株同时携带mcr-1和NDM-6基因的泛耐药大肠埃希菌研究 被引量:1
4
作者 黄旭 孙鹏飞 +3 位作者 夏文颖 唐晨杰 倪芳 刘根焰 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第14期1696-1699,共4页
目的研究1株临床分离的黏菌素和碳青霉烯类均耐药的大肠埃希菌的耐药机制。方法用Vitek 2 Compact系统进行细菌鉴定;微量肉汤稀释法检测常见抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,亚胺培南和乙二胺四乙酸(IPM-EDTA... 目的研究1株临床分离的黏菌素和碳青霉烯类均耐药的大肠埃希菌的耐药机制。方法用Vitek 2 Compact系统进行细菌鉴定;微量肉汤稀释法检测常见抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC);改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,亚胺培南和乙二胺四乙酸(IPM-EDTA)协同实验检测金属β-内酰胺酶;用聚合酶链式反应(PCR)扩增联合测序技术检测多种耐药基因;用多位点序列分型技术分析菌株的分子分型;用质粒结合试验研究bla_(NDM-6)和mcr-1基因是否通过质粒传播;S1酶切-脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)和Southern印迹杂交分析携带bla_(NDM-6)和mcr-1质粒的分子特征。结果该株大肠埃希菌除替加环素敏感外,对β内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类药物耐药且同时对黏菌素类抗生素耐药。改良Hodge试验和IPM-EDTA协同试验结果阳性;PCR基因扩增及测序分析显示该菌株同时携带mcr-1,bla_(NDM-6),bla_(CTX-M-55),bla_(TEM-1),rmtB和aac(6')-Ib-cr;多位点序列分型(MLST)结果为ST156型;S1-PFGE和Southern blot结果显示bla_(NDM-6)基因位于大小约80 bp的质粒上,mcr-1基因位于大小约为33 bp的质粒上。结论同时携带mcr-1和bla_(NDM-6)的泛耐药大肠埃希菌已在临床出现,应引起高度重视。 展开更多
关键词 碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌 新德里金属β内酰胺酶 黏菌素耐药基因 质粒传播
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细菌耐药现状及治疗——从超级细菌谈起 被引量:37
5
作者 赵敏 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期104-108,共5页
全球细菌耐药形势十分严峻,多耐药、泛耐药革兰阴性菌逐年增加,成为抗感染治疗中的难点。2010年在全球多个地区出现的产新德里金属β-内酰胺酶Ⅰ型(NDM-1)革兰阴性细菌又一次敲响了警钟。NDM-1是新发现的碳青霉烯酶,多见于大肠埃希菌和... 全球细菌耐药形势十分严峻,多耐药、泛耐药革兰阴性菌逐年增加,成为抗感染治疗中的难点。2010年在全球多个地区出现的产新德里金属β-内酰胺酶Ⅰ型(NDM-1)革兰阴性细菌又一次敲响了警钟。NDM-1是新发现的碳青霉烯酶,多见于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,导致广泛耐药。临床研究中多黏菌素、替甲环素及磷霉素治疗多耐药、泛耐药肠杆菌感染有效。减少多耐药、泛耐药细菌的发生和传播重在预防。 展开更多
关键词 耐药 细菌 新德里金属β-内酰胺酶-1 变异
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产NDM-1肺炎克雷伯菌中国分离株的初步研究 被引量:25
6
作者 邹明祥 邬靖敏 +4 位作者 李军 豆清娅 周蓉蓉 黄嫄 刘文恩 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期616-621,共6页
目的探讨湖南地区出现的肺炎克雷伯菌新德里金属β-内酰胺酶1型(NDM-1)基因特征及其与耐药性的关系。方法临床菌株分离自湖南某综合医院一例重症肺炎并中毒性心肌炎患儿的痰液标本。采用全自动微生物分析系统VITEK-2 compact对菌株进行... 目的探讨湖南地区出现的肺炎克雷伯菌新德里金属β-内酰胺酶1型(NDM-1)基因特征及其与耐药性的关系。方法临床菌株分离自湖南某综合医院一例重症肺炎并中毒性心肌炎患儿的痰液标本。采用全自动微生物分析系统VITEK-2 compact对菌株进行鉴定及药敏检测;改良Hodge试验筛查碳青霉烯酶;双纸片协同试验及双纸片增效试验检测金属β-内酰胺酶;聚合酶链反应(PCR)特异性扩增NDM-1基因,并对扩增产物进行测序和BLAST分析;质粒接合转移试验分析其耐药机制,并对接合前后的药敏结果进行比较。结果该菌株经鉴定为肺炎克雷伯菌。改良Hodge试验、双纸片协同试验及双纸片增效试验均为阳性。PCR扩增产物基因序列与Gen-Bank中NDM-1基因FN396876.1同源性为100%。以筛选的接合子DNA为模板扩增NDM-1基因全长并测序,结果与供体菌NDM-1基因扩增产物完全一致。接合子E.coli J53(NDM-1)对所有β-内酰胺类药物的MIC值较受体菌E.coli J53均有很大提高,其中对厄他培南和亚胺培南MIC均提高了8倍以上,头孢他啶及头孢曲松则提高了64倍以上。结论中国大陆出现了产NDM-1肺炎克雷伯菌;NDM-1基因可在不同菌株之间传递,导致细菌对β-内酰胺类药物广泛耐药。 展开更多
关键词 新德里金属β-内酰胺酶1型 肺炎克雷伯菌 基因 耐药 中国
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关于超级细菌NDM-1的若干思考 被引量:20
7
作者 黄留玉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1409-1411,共3页
自印度出现耐药性"超级细菌"以来,英国、美国、加拿大、澳大利亚、荷兰等国也相继出现了"超级细菌"感染,使之成为继"非典"、"甲流"之后又一引起国际社会广泛关注的全球公共卫生问题。我国宁夏... 自印度出现耐药性"超级细菌"以来,英国、美国、加拿大、澳大利亚、荷兰等国也相继出现了"超级细菌"感染,使之成为继"非典"、"甲流"之后又一引起国际社会广泛关注的全球公共卫生问题。我国宁夏和福建也同时发现了"超级细菌"感染病例,再次引发了对滥用抗生素问题的思考。什么是超级细菌,为何会引起广泛关注,我们该如何应对?本刊特邀军事医学科学院疾病预防控制所专家撰写此文,以飨读者,为正确解读"超级细菌"提供参考。 展开更多
关键词 抗药性 细菌 新德里金属β-内酰胺酶-1 变异
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中药黄芩对NDM-1乙酸钙不动杆菌的抑菌及质粒消除的研究 被引量:14
8
作者 刘彦晶 张雅洁 +2 位作者 纪雪 李丽红 孙洋 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1018-1022,共5页
目的探讨中药黄芩不同提取部位对NDM-1乙酸钙不动杆菌的抑菌效果及质粒消除作用。方法测定黄芩醇提剂和水煎剂对NDM-1乙酸钙不动杆菌的最小抑菌浓度(MIC);观察亚抑菌浓度下对NDM-1乙酸钙不动杆菌生长曲线的变化;利用亚抑菌浓度黄芩醇提... 目的探讨中药黄芩不同提取部位对NDM-1乙酸钙不动杆菌的抑菌效果及质粒消除作用。方法测定黄芩醇提剂和水煎剂对NDM-1乙酸钙不动杆菌的最小抑菌浓度(MIC);观察亚抑菌浓度下对NDM-1乙酸钙不动杆菌生长曲线的变化;利用亚抑菌浓度黄芩醇提剂和水煎剂对乙酸钙不动杆菌NDM-1质粒进行消除,用平板影印法筛选质粒消除株,并比较质粒的消除率及表型变化。结果黄芩醇提剂对NDM-1乙酸钙不动杆菌的MIC值为1.56 mg·m L^(-1),水煎剂MIC值为6.25 mg·m L^(-1)。生长曲线实验结果表明,醇提剂对细菌的繁殖抑制作用更强。黄芩醇提剂和水煎剂均有不同程度的质粒消除作用,以醇提剂传代消除作用更为明显,消除率最高可达61.27%,水煎剂亦能达到49.78%。结论黄芩能够抑制NDM-1乙酸钙不动杆菌的生长并有效消除其耐药质粒,且醇提组分作用效果更佳,可用于控制超耐药不动杆菌的传播或临床感染的辅助治疗。 展开更多
关键词 黄芩 不动杆菌 新德里金属β-内酰胺酶-1 抑菌作用 质粒消除
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产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性分析 被引量:11
9
作者 张烨 董方 +3 位作者 宋文琪 郭凌云 王艳 刘钢 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期516-522,共7页
目的研究产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性。方法收集首都医科大学附属北京儿童医院2011年1月-2014年8月住院患儿血培养分离的非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKp);用微量肉汤稀释法测定15种抗菌... 目的研究产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性。方法收集首都医科大学附属北京儿童医院2011年1月-2014年8月住院患儿血培养分离的非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKp);用微量肉汤稀释法测定15种抗菌药物的MIC值;采用PCR法确定产NDM-1菌株;回顾分析病历资料了解感染产NDM-1菌株患儿的临床特征,并与感染非产NDM-1菌株患儿进行比较。结果 52株CRKp中共检出28株产NDM-1菌株。产NDM-1菌株组均为多重耐药菌,对青霉素、头孢菌素和哌拉西林-他唑巴坦的耐药率达100%(28/28),对氨曲南、甲氧苄啶-磺胺甲唑及庆大霉素的耐药率均>75%,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为100%(28/28)、92.9%(26/28)。产NDM-1菌株中碳青霉烯类高MIC值的菌株比例高于非产NDM-1菌株。产NDM-1菌株组的患儿中,82.1%(23/28)来自血液病房,常见基础疾病为血液系统恶性肿瘤(78.6%,22/28),20例(76.4%)患儿存在中性粒细胞缺乏伴发热;产与非产NDM-1肺炎克雷伯菌血流感染患儿相比,反复住院(P=0.202)、近期使用抗菌药物(P=0.615)、常见基础疾病(P=0.856)以及深静脉置管(P=0.099)方面差异无统计学意义。明确肺炎克雷伯菌感染后,37例患儿接受了碳青霉烯类药物联合敏感药物治疗。产NDM-1菌株组病死率与非产NDM-1菌株组相比无明显差异(2/28对3/24;P=0.625)。结论该院已出现产NDM-1肺炎克雷伯菌株,呈逐年增长趋势,此类细菌呈多重耐药,碳青霉烯类高MIC值的菌株所占比例高,临床特征上与非产NDM-1菌无明显区别。 展开更多
关键词 新德里金属β内酰胺酶-1 肺炎克雷伯菌 血流感染 儿童 碳青霉烯类抗生素
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携带bla_(NDM-1)基因的ST22型肺炎克雷伯菌引起新生儿医院感染 被引量:9
10
作者 徐茶 刘艳飞 +2 位作者 赵辉 贾楠 朱元祺 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2015年第11期854-859,共6页
目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床株的分子流行病学特征,为医院感染的控制和预防提供指导。方法 3株对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌临床菌株分离自山东某医院新生儿病房患儿的抽吸痰液和血液标本;用Vitek 2 Compact系统进行细菌... 目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌临床株的分子流行病学特征,为医院感染的控制和预防提供指导。方法 3株对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌临床菌株分离自山东某医院新生儿病房患儿的抽吸痰液和血液标本;用Vitek 2 Compact系统进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验检测菌株是否产碳青霉烯酶;PCR检测菌株携带的碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaBIC、blaOXA-48、blaNDM、blaIMP、blaVIM、blaSPM、blaAIM、blaGIM、blaSIM和blaDIM)、β-内酰胺酶基因(blaCTX-M、blaSHV、blaTEM和blaOXA-1)、Amp C酶基因(blaMOX、blaCIT、blaDHA、blaACC和blaEBC)、喹诺酮耐药相关基因(qnr A、qnr B、qnr S、oqx A和oqx B)和磷霉素耐药基因(fos A3),测序确认其基因型;用多位点序列分型和脉冲场凝胶电泳分析细菌的同源性;质粒接合和Southern杂交试验分析质粒的特性,并进行质粒不相容群检测。结果 3株肺炎克雷伯菌Hodge试验呈阳性,且对大部分抗菌药物耐药,均携带blaNDM-1、blaTEM-1、fos A3、oqx A和oqx B基因。脉冲场凝胶电泳显示3株菌的带型完全一致,属于同一克隆,而且多位点序列分型也都是ST22,提示存在流行。质粒接合和Southern杂交试验表明供体菌携带blaNDM-1质粒(p TA-NDM)可通过接合方式转移到受体菌,且质粒大小约220 000 bp,不相容群分型属于Inc A/C型质粒。结论同时携带blaNDM-1、blaTEM-1、fos A3、oqx A和oqx B基因的ST22型肺炎克雷伯菌在新生儿病房中的流行属国内外首次报道,应引起重视。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 新德里金属β-内酰胺酶1型 生儿 医院感染
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ST571型产NDM-1肺炎克雷伯菌检出及分子流行病学研究 被引量:9
11
作者 刘婧娴 俞静 刘瑛 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期402-408,共7页
目的探讨产新德里金属-β-内酰胺酶1(NDM-1)肺炎克雷伯菌检出的分子流行病学意义。方法实验菌株为从临床标本中分离到的1株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌。采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定及药敏试验,PCR及测序方法检测ND... 目的探讨产新德里金属-β-内酰胺酶1(NDM-1)肺炎克雷伯菌检出的分子流行病学意义。方法实验菌株为从临床标本中分离到的1株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌。采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定及药敏试验,PCR及测序方法检测NDM-1等碳青霉烯酶基因的表达,并对菌株进行质粒转移接合试验及多位点序列分型(MLST)。经检索Pub Med收集其他地区产NDM-1肺炎克雷伯菌的MLST数据,采用e BURST V3软件及Tree drawing软件进行分析。结果该菌株对包括碳青霉烯类在内的多种抗生素均高度耐药,携带NDM-1基因,MLST为ST571含有该基因的质粒通过接合方式成功转移到受体菌。共收集源自28个国家的238株产NDM-1肺炎克雷伯菌的MLST信息,包含41个ST型,CC258(clone complex)为主要流行株。结论我国首次检出ST571型产NDM-1肺炎克雷伯菌,耐药基因可能通过质粒进行传播。产NDM-1肺炎克雷伯菌的分子分型呈多样化,以CC258流行最广,本实验菌株与该克隆复合体菌株的亲缘关系甚远。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 新德里金属-β-内酰胺酶1 多位点序列分型 分子流行病学
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产NDM-1酶细菌研究进展 被引量:8
12
作者 孙长贵 《实验与检验医学》 CAS 2011年第2期99-101,共3页
2010年8月,The Lancet Infectious Diseases杂志发表了一篇由印度、英国、瑞典、巴基斯坦和澳大利亚学者的联合研究报告[1],报道了一种水解碳青霉烯类药物新的金属β-内酰胺酶NDM-1(NewDelhi Metallo-β-lactamase 1,新德里金属β-内... 2010年8月,The Lancet Infectious Diseases杂志发表了一篇由印度、英国、瑞典、巴基斯坦和澳大利亚学者的联合研究报告[1],报道了一种水解碳青霉烯类药物新的金属β-内酰胺酶NDM-1(NewDelhi Metallo-β-lactamase 1,新德里金属β-内酰胺酶1,简称NDM-1酶)及产NDM-1酶细菌在印度、 展开更多
关键词 细菌 耐药性 抗菌药物 新德里金属β-内酰胺酶-1 碳青霉烯
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产NDM-1肠杆菌科细菌的耐药机制和临床特征 被引量:7
13
作者 黄增光 夏淑 +4 位作者 肖书念 林倍州 王爱华 徐安 卓超 《中华临床感染病杂志》 CAS 2014年第5期393-400,共8页
目的 探讨临床分离的产NDM-1肠杆菌科细菌的耐药机制及携带blaNDM-1质粒的特征和基因环境.方法 连续收集2011年8月至2013年1月华南地区6家综合性医院临床非重复分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌48株,同时选择大肠埃希菌J53作为接合试... 目的 探讨临床分离的产NDM-1肠杆菌科细菌的耐药机制及携带blaNDM-1质粒的特征和基因环境.方法 连续收集2011年8月至2013年1月华南地区6家综合性医院临床非重复分离的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌48株,同时选择大肠埃希菌J53作为接合试验受体菌.对所有菌株进行碳青霉烯水解酶表型试验(改良Hodge试验),用PCR法检测碳青霉烯类水解酶相关基因.通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)观察携带blaNDM-1质粒的大小,通过对质粒进行酶切分析质粒的同源性及不相容群分型,并对临床上产NDM-1细菌感染患者的临床特征进行分析.结果 48株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌中有43株改良Hodge试验阳性.碳青霉烯酶耐药基因检测结果示,48株肠杆菌科细菌bla VIM、blaGIM和blaSPM均为阴性,19株细菌blaNDM-1基因为阳性,分别为3株大肠埃希菌、5株肺炎克雷伯菌、6株阴沟肠杆菌、3株弗劳地柠檬酸杆菌、1株产酸克雷伯菌和1株雷氏普罗威登斯菌.药敏试验结果显示,19株细菌均对亚胺培南、头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和哌拉西林/他唑巴坦耐药,对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率均为47.3%,但对阿米卡星的敏感率为68.4%.有13株产blaNDM-1细菌携带的blaNDM-1质粒均成功转移到大肠埃希菌J53中.接合子药敏试验结果显示,对亚胺培南、头孢他啶、头孢噻肟和哌拉西林/他唑巴坦仍耐药,但对阿米卡星、环丙沙星和左氧氟沙星均敏感.基因环境结果显示,接合子J-FR90(雷氏普罗威登斯菌)所有基因为阴性,其余12株细菌携blaNDM-1质粒blaSHV、aac-(6')-Ib基因均为阳性.PFGE显示,携blaNDM-1质粒大小基本一致,为50 kb左右.质粒之间有相似的酶切图谱,其相似度>80%.质粒不相容群为IncX3型.菌株传代500代后,PCR检测显示所携带的blaNDM-1质粒均未丢失.19例产NDM-1细菌感染患者中6例死亡,13例存活.结论 华南地区已出现产ND 展开更多
关键词 肠杆菌科 碳氢霉烯 新德里金属β-内酰胺酶-1 质粒
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携带blaIMP-4或blaKPC-2的产新德里金属β-内酰胺酶-1的肠杆菌科菌的基因型检测及其质粒转移传播机制的研究 被引量:7
14
作者 曾云祥 陈杨芳 +9 位作者 沈丽珍 金晓立 许建平 梁世周 罗坚 奚经巧 余方友 林洁 叶瑾 周林双 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期542-549,共8页
目的:分析携带blaIMP‐4或blaKPC‐2的产新德里金属β‐内酰胺酶‐1(NDM‐1)的肠杆菌科菌的基因型及其质粒转移传播机制。方法收集2012年4月至2014年10月间浙江省温州市和杭州市5家医院细菌培养非重复菌株中碳青霉烯类耐药(如亚胺... 目的:分析携带blaIMP‐4或blaKPC‐2的产新德里金属β‐内酰胺酶‐1(NDM‐1)的肠杆菌科菌的基因型及其质粒转移传播机制。方法收集2012年4月至2014年10月间浙江省温州市和杭州市5家医院细菌培养非重复菌株中碳青霉烯类耐药(如亚胺培南、美罗培南、厄他培南等耐药)肠杆菌科菌33株,应用全自动微生物分析仪对该类菌株进行鉴定和药物敏感试验。并用改良 Hogde试验、EDTA协同初筛金属酶试验、超广谱β‐内酰胺酶(ESBL)检测(采用美国临床和实验室标准协会推荐的双纸片方法)、高产头孢菌素(AmpC)酶检测(采用头孢西丁三维试验),对试验菌基因包括blaNDM‐1在内及ISAba125‐NDM连锁基因进行 PCR检测,并将扩增产物纯化、克隆后测序,对部分菌株及2株携带blaIMP‐4或blaKPC‐2的产blaNDM‐1基因的肺炎克雷伯菌进行质粒转移、接合与消除试验。结果33株碳青霉烯类耐药的肠杆菌科菌分别为肺炎克雷伯菌28株,产酸克雷伯菌1株,大肠埃希菌2株,植生乌拉尔菌1株,阴沟肠杆菌1株;分别来自浙江大学医学院附属邵逸夫医院13株、温州市中医院13株、温州市人民医院1株、温州医科大学附属第一医院3株、温州市中西医结合医院3株。有31株确定为产碳青霉烯酶,包括 blaKPC‐224株、blaNDM‐13株、blaNDM‐51株、blaIMP‐43株,其中blaNDM‐1阳性菌株中同时携带blaIMP‐4或 blaKPC‐2的各1株,将携带部分阳性基因的菌株与大肠埃希菌 EC600或肺炎克雷伯菌ATCC13833进行质粒转移结合试验,获得结合子进行相应基因检测,均获得相应 blaNDM‐1、ISAba125‐NDM等基因。结论碳青霉烯类耐药肠杆菌科菌中最常见的是 blaKPC‐2型;blaNDM‐1、blaNDM‐5基因与ISAba125‐NDM连锁基因可能有相关;2株 blaNDM‐1型阳性菌株中有1株同时携带 blaKPC‐2型基因、另1株同时携带金属酶blaIMP‐4型基 展开更多
关键词 碳青霉烯 肠杆菌科 新德里金属β-内酰胺酶-1 基因型
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清开灵注射液提取物及清开灵注射液与抗生素联合对含blaNDM-1超级细菌的抑菌效果 被引量:6
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作者 尚伟 王雪松 +3 位作者 邹大阳 张状年 廖祥儒 袁静 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期506-509,共4页
目的体外初步研究清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对含产新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase1,NDM-1)基因的耐药细菌(blaNDM-1细菌)的抑菌性。方法采用琼脂稀释法和K-B法对清开灵注... 目的体外初步研究清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对含产新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase1,NDM-1)基因的耐药细菌(blaNDM-1细菌)的抑菌性。方法采用琼脂稀释法和K-B法对清开灵注射液主成分板蓝根、金银花、栀子、黄芩苷4种药物提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对耐药超级细菌进行抑菌实验。并测定各提取液的最小抑菌浓度(MIC)值。结果清开灵主成分提取液对含blaNDM-1基因的耐药细菌均有不同程度的抑制效果,其中以黄芩苷为最好,对含blaNDM-1基因的耐药菌不动杆菌属/乙酸钙不动杆菌(WD)、鲍曼不动杆菌(WX)、嗜麦芽寡养单胞菌(WJ)和大肠杆菌pGEX-4T-NDM-1/DH5α(GST-NDM-1)的MIC分别为0.015、0.020、0.005、>0.020g/mL,而各提取液的MIC值的大小依次为黄芩苷、金银花、栀子、板蓝根;清开灵注射液与抗生素联合用药后,对含blaNDM-1基因多重耐药菌的抑菌效果非常明显,大大提高了各类抗生素单独用药的抑菌能力,其中以与青霉素类(青霉素G、美洛西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦)效果最好,抑菌效果提高10倍左右,其他抗生素类药物抑菌效果都有不同程度的提高。结论清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药对含blaNDM-1耐药基因细菌都有很好的抑菌效果,此研究为药物开发及对blaNDM-1超级耐药细菌的用药和治疗提供了理论依据。 展开更多
关键词 清开灵注射液提取物 抑菌效果 超级耐药细菌 新德里金属β-内酰胺酶-1基因 最小抑菌浓度
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“超级细菌”再认识 被引量:4
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作者 程延安 李梅 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2010年第12期1081-1083,共3页
"超级细菌"是含有新德里金属β内酰胺酶(NDM-1)基因的多重耐药菌的统称。自2009年7月首次报道后,先后在印度、巴基斯坦、英国、美国、日本及中国等均有报道。初步研究认为该菌对现存的多种抗生素耐药,应对措施不全,对公众健... "超级细菌"是含有新德里金属β内酰胺酶(NDM-1)基因的多重耐药菌的统称。自2009年7月首次报道后,先后在印度、巴基斯坦、英国、美国、日本及中国等均有报道。初步研究认为该菌对现存的多种抗生素耐药,应对措施不全,对公众健康具有潜在威胁;合理使用抗生素是预防"超级细菌"感染的有效方法。 展开更多
关键词 超级细菌 新德里金属β内酰胺酶(NDM-1) 抗生素 耐药性
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8株产NDM-1肠杆菌科细菌的耐药特点和流行性分析 被引量:4
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作者 张盼 沈振华 +2 位作者 张燕华 刘兴晖 李向阳 《检验医学》 CAS 2018年第7期616-621,共6页
目的研究温州医科大学附属第二医院临床分离的8株产新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)肠杆菌科细菌的耐药特点及分子生物学特点。方法采用Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统进行菌株的鉴定和体外药物敏感性试验;采用聚合酶链反应(PCR)... 目的研究温州医科大学附属第二医院临床分离的8株产新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)肠杆菌科细菌的耐药特点及分子生物学特点。方法采用Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统进行菌株的鉴定和体外药物敏感性试验;采用聚合酶链反应(PCR)扩增β-内酰胺酶基因,并对扩增产物进行测序和Blast比对分析。采用接合转移试验检测NDM-1耐药基因的水平转移能力。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性。结果 8株菌株对β-内酰胺类药物及β-内酰胺酶抑制剂复合物均表现出较高的耐药性,而对氨基糖苷类和氟喹诺酮类药物敏感性很好;各菌株多同时携带多种耐药基因,其中5株携带SHV基因、2株携带CTX-M-1基因、1株携带DHA-1基因。产NDM-1菌株(2株大肠埃希菌除外)接合成功,接合子对β-内酰胺类药物的耐药性很高。PFGE结果显示,2株大肠埃希菌为不同克隆株,而3株阴沟肠杆菌中有2株具有同源性,视为同一克隆株。结论产NDM-1肠杆菌科细菌多同时携带多种耐药基因,对β-内酰胺类药物及β-内酰胺酶抑制剂复合物均表现出较高的耐药性。NDM-1耐药基因具有水平转移能力。 展开更多
关键词 新德里金属β-内酰胺酶1 碳青霉烯 肠杆菌科 脉冲场凝胶电泳
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我国北方地区部分医院产新德里金属β-内酰胺酶肠杆菌分子流行病学研究 被引量:3
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作者 张丽萍 刘杰 +1 位作者 孟冬娅 薛文成 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期808-813,共6页
目的调查北京、沈阳、济南、兰州等我国北方地区医院中产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)耐药基因大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌流行情况。方法采用改良Hodge试验筛选产碳氢霉烯酶菌株;采用亚胺培南-EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶的产生;采... 目的调查北京、沈阳、济南、兰州等我国北方地区医院中产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)耐药基因大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌流行情况。方法采用改良Hodge试验筛选产碳氢霉烯酶菌株;采用亚胺培南-EDTA协同试验检测金属β-内酰胺酶的产生;采用聚合酶链式反应(PCR)扩增测序筛查NDM基因;采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)和多位点序列分析法(MLST)对阳性菌株进行同源性分析。结果 31株大肠埃希菌和84株肺炎克雷伯菌Hodge试验阳性。其中15株大肠埃希菌和15株肺炎克雷伯菌筛选出NDM基因。MLST结果序列型(ST分型)与PFGE分型吻合。PFGE试验结果显示大肠埃希菌SY01、SY02、SY03与JN06属于同一分群,大肠埃希菌SY01、SY02、SY03图谱完全相同,且与JN06图谱同源性较高,且这4株菌ST型均为ST167。结论产NDM耐药基因的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌已出现于我国北方地区多个省会城市,且有局部散在的克隆性流行,需引起临床科室和医院感染控制部门的高度重视。 展开更多
关键词 碳青霉烯 新德里金属β-内酰胺酶 分子流行病学
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产NDM-1耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌筛查研究 被引量:3
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作者 侯辰蕊 戎建荣 +3 位作者 栗子洋 李霞 王瑞雪 高春艳 《中国卫生检验杂志》 CAS 2015年第23期4157-4159,共3页
目的对本院2013年1月-2014年12月临床分离耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌进行blaNDM-1基因筛查,初探本院blaNDM-1基因携带阳性菌存在现状。方法采用MALDI-TOF质谱检测系统对所有菌株进行鉴定,用VITEK-2全自动微生物分析仪检测菌株的MIC值,筛... 目的对本院2013年1月-2014年12月临床分离耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌进行blaNDM-1基因筛查,初探本院blaNDM-1基因携带阳性菌存在现状。方法采用MALDI-TOF质谱检测系统对所有菌株进行鉴定,用VITEK-2全自动微生物分析仪检测菌株的MIC值,筛选其中耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,用改良Hodge试验进行表型确认,同时对试验菌株的blaNDM-1基因应用PCR方法进行筛检,其中阳性株外送进行PCR产物基因测序,测序结果进行BLAST比对。结果 14株耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌分别是8株肺炎克雷伯菌,6株大肠埃希菌。14株菌中有5株对替加环素敏感,9株对替加环素中介。仅从1株来自患者腹水标本中分离的肺炎克雷伯菌中检出blaNDM-1基因,基因序列同源性为99%。结论本次从肠杆菌科肺炎克雷伯菌中检出blaNDM-1基因,应为山西省首次报道,警示院感等相关部门应重视并加强对blaNDM-1基因携带菌的监测与筛查。 展开更多
关键词 新德里金属β-内酰胺酶-1 碳青霉烯 肠杆菌
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产NDM-1型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的耐药性及同源性分析 被引量:3
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作者 安淑娟 姚立琼 +4 位作者 金凤玲 朱海平 陈保锦 元淑巧 刘志武 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期621-623,共3页
目的调查产新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)细菌感染的流行情况及菌株同源性。方法对产NDM-1型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌进行细菌鉴定;用K-B法和E-test法检测抗菌药物敏感性;碳青霉烯酶表型筛选、改良Hodge试验、EDTA及E-test法同时测定金... 目的调查产新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)细菌感染的流行情况及菌株同源性。方法对产NDM-1型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌进行细菌鉴定;用K-B法和E-test法检测抗菌药物敏感性;碳青霉烯酶表型筛选、改良Hodge试验、EDTA及E-test法同时测定金属酶;PCR检测blaNDM-1基因;用基因组重复序列PCR(Rep-PCR)检测基因同源性。结果 13株产NDM-1型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌主要为肺炎克雷伯菌,除对阿米卡星、庆大霉素、氯霉素、四环素及左氧氟沙星耐药率<50%外,对其余抗菌药物几乎全耐药。13株可分为两个克隆组,说明我院存在产NDM-1型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的局部流行,以ICU较为突出。结论产NDM-1型碳青霉烯酶为我院肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的主要型别,且已在ICU中局部流行。 展开更多
关键词 新德里金属β-内酰胺酶1 碳青霉烯 肠杆菌科细菌 基因同源性
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