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斑点叉尾触病毒性疾病综述 被引量:2
1
作者 夏露 熊冬梅 《北京水产》 2008年第4期61-63,共3页
本文综述了斑点又尾(鱼回)主要的病毒性疾病的流行情况、临床症状、诊断和治疗措施等,以期为斑点又尾(鱼回)的养殖生产和疾病防治提供参考依据。
关键词 斑点 斑点病毒 斑点呼肠弧病毒
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斑点叉尾鮰病毒对几种淡水鱼类细胞系感染性的初步研究 被引量:2
2
作者 刘学芹 王敏 +1 位作者 王卫民 Yuanan Lu 《水生态学杂志》 北大核心 2009年第6期76-79,共4页
研究斑点叉尾鮰病毒(Channel Catfish Virus,CCV)是否感染斑点叉尾鮰以外的鱼类,以评价CCV对我国珍稀、重要经济鱼类的潜在危害性。选择大眼鲑、草鱼、鲤、白鲟的细胞系为材料,从细胞病变、病毒增殖滴度等方面验证CCV对这些细胞系的感... 研究斑点叉尾鮰病毒(Channel Catfish Virus,CCV)是否感染斑点叉尾鮰以外的鱼类,以评价CCV对我国珍稀、重要经济鱼类的潜在危害性。选择大眼鲑、草鱼、鲤、白鲟的细胞系为材料,从细胞病变、病毒增殖滴度等方面验证CCV对这些细胞系的感染性。实验表明,CCV对上述细胞系均可以感染,但细胞病变出现时间、病变程度和增殖滴度各有差异。其中,草鱼鳍条细胞系(GCF)、鲤上皮瘤细胞系(EPC)对CCV高度敏感。CCV在EPC中的增殖滴度与在斑点叉尾鮰卵巢细胞系(CCO)中相当,在GCF中的增殖滴度甚至高于CCO。研究结果表明,CCV除了感染CCO以外,还可以感染其它多种鱼类的细胞系,说明CCV病毒可能对斑点叉尾鮰以外的淡水鱼类具有感染性和潜在的危害性。 展开更多
关键词 斑点病毒 感染性 细胞系
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斑点叉尾鮰病毒“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达检测 被引量:2
3
作者 熊海林 尹殿卯 +6 位作者 王卫民 王敏 李莉娟 刘玉林 刘学芹 吴兵 黄锋涛 《水生态学杂志》 北大核心 2011年第1期84-88,共5页
根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到"自杀性"DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1(+)中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰(Ictalurus punc-tatus)"自杀性"DNA疫... 根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到"自杀性"DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1(+)中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰(Ictalurus punc-tatus)"自杀性"DNA疫苗ps-ORF6与常规DNA疫苗pcd-ORF6,利用转化后的大肠杆菌菌液为模板进行PCR扩增、提取质粒酶切鉴定以及序列测定等方法证实重组质粒构建正确。将重组质粒转染人胚肾细胞(293T),间接免疫荧光试验表明ORF6均获得表达,但"自杀性"DNA疫苗的表达效果不如常规DNA疫苗,该研究为这2种疫苗进一步的鱼体试验奠定了基础。 展开更多
关键词 斑点病毒 “自杀性”DNA疫苗 构建 表达
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斑点叉尾鮰病毒病的传入风险评估报告 被引量:2
4
作者 任彤 汪琳 +7 位作者 尹羿 赵相鹏 马树宝 郑娟 蒲静 高志强 张伟 张利峰 《中国口岸科学技术》 2020年第1期43-49,共7页
本文为评估斑点叉尾鮰病毒病(CCVD)跨境传播风险提出科学可行的防控措施,基于病原学和流行病学特征,对CCVD进入我国的可能因素进行了风险分析。分析认为,CCVD的传人威胁主要来自疫区的活养殖斑点叉尾鮰等活敏感鱼类,还有用于食用的活敏... 本文为评估斑点叉尾鮰病毒病(CCVD)跨境传播风险提出科学可行的防控措施,基于病原学和流行病学特征,对CCVD进入我国的可能因素进行了风险分析。分析认为,CCVD的传人威胁主要来自疫区的活养殖斑点叉尾鮰等活敏感鱼类,还有用于食用的活敏感鱼类,以及冰冻、冰鲜的敏感鱼类。因此,根据进口对象制定不同的风险管理方案并采取相应的检疫措施,对有效控制CCVD传入我国具有重要意义。 展开更多
关键词 斑点病毒 传入风险 风险评估
原文传递
三重荧光定量PCR快速检测水产品中的双链DNA病毒的研究 被引量:1
5
作者 黄佳鸣 宁喜斌 +3 位作者 史秀杰 刘葒 丛健 兰文升 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期311-315,共5页
目的:建立对水产品中三种双链DNA病毒(斑点叉尾鮰病毒、锦鲤疱疹病毒、流行性造血器官坏死病毒)快速、敏感、特异的检测方法。方法:针对三种病毒的DNA聚合酶基因的保守序列设计三对特异性引物和三条Taqman探针,优化体系,建立三重荧光定... 目的:建立对水产品中三种双链DNA病毒(斑点叉尾鮰病毒、锦鲤疱疹病毒、流行性造血器官坏死病毒)快速、敏感、特异的检测方法。方法:针对三种病毒的DNA聚合酶基因的保守序列设计三对特异性引物和三条Taqman探针,优化体系,建立三重荧光定量PCR体系,并对该方法的灵敏性和特异性评估。结果:建立的三重荧光定量PCR体系特异性强,引物之间及引物和探针之间无相互干扰。对三种病毒的检测限均能达到102拷贝/μL。结论:该方法体系稳定,重复性好,可操作性强,对水产品中的双链DNA病毒的快速检测具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 斑点病毒 锦鲤疱疹病毒 流行性造血器官坏死病毒 三重荧光定量PCR
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斑点叉尾鮰病毒多克隆抗体的制备及其生物活性鉴定 被引量:1
6
作者 吴兵 罗宇良 +5 位作者 王敏 曹胜波 王卫民 陈龙 黄锋涛 刘学芹 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期631-634,共4页
利用斑点叉尾鮰卵巢细胞增殖斑点叉尾鮰病毒,然后将经过超速离心纯化的病毒免疫4周龄BABL/C雌鼠。每2周免疫1次,第4次免疫2周后,经眼眶采血,分离血清,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,并利用间接免疫荧光试验和与病毒孵育试验检测... 利用斑点叉尾鮰卵巢细胞增殖斑点叉尾鮰病毒,然后将经过超速离心纯化的病毒免疫4周龄BABL/C雌鼠。每2周免疫1次,第4次免疫2周后,经眼眶采血,分离血清,通过酶联免疫吸附试验检测其抗体效价,并利用间接免疫荧光试验和与病毒孵育试验检测所制备多克隆抗体的生物活性。结果表明,制备的多克隆抗体ELISA效价为1∶25 600,间接免疫荧光试验证明该多克隆抗体特异性良好,同时与病毒的孵育试验证明该多克隆抗体具备中和活性,能够有效阻断斑点叉尾鮰病毒对细胞的感染。 展开更多
关键词 斑点病毒 多克隆抗体 制备 效价 生物活性
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斑点叉尾鮰病毒ORF6基因的高效可溶表达及抗原性分析 被引量:1
7
作者 刘玉林 王卫民 +1 位作者 王敏 李莉娟 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第5期1001-1003,1048,共4页
利用GST融合基因表达系统表达GST-GP6融合蛋白,以质粒pMD19-T-ORF6为模板,扩增出ORF6基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-2,将所构建的重组质粒pGEX-4T-2-ORF6转化E.coli ER2566,并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得... 利用GST融合基因表达系统表达GST-GP6融合蛋白,以质粒pMD19-T-ORF6为模板,扩增出ORF6基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-2,将所构建的重组质粒pGEX-4T-2-ORF6转化E.coli ER2566,并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得产物进行10%SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果表明,大肠杆菌细胞经诱导高效表达出约42kD蛋白,其分子量与GST-GP6融合蛋白相符,表达产物以可溶的形式存在。Western blot分析表明,融合蛋白能够与斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。 展开更多
关键词 斑点病毒 ORF6基因 高效可溶表达 抗原性
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斑点叉尾■养殖与病害防治技术 被引量:3
8
作者 韦艳 祭仲石 +1 位作者 李传慰 殷志强 《渔业致富指南》 2019年第8期39-41,共3页
斑点叉尾鮰属于鲇形目,鮰科鱼类,原产于北美,其具有食性杂、生长快、适应能力强、肉质鲜美等有点,广受市场喜爱。自1984年由湖北水产科学研究所从美国引进我国后,经过多年的推广养殖,现已在我国多地养殖。但是随着斑点叉尾鮰养殖密度的... 斑点叉尾鮰属于鲇形目,鮰科鱼类,原产于北美,其具有食性杂、生长快、适应能力强、肉质鲜美等有点,广受市场喜爱。自1984年由湖北水产科学研究所从美国引进我国后,经过多年的推广养殖,现已在我国多地养殖。但是随着斑点叉尾鮰养殖密度的不断提高,苗种退化严重,导致其病害暴发严重,给鮰鱼养殖造成重大损失。 展开更多
关键词 斑点病毒 害防治 小瓜虫
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斑点叉尾病毒(CCV)结构蛋白的鉴定
9
作者 毕鹏 吴志新 +1 位作者 苏念 李莉娟 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第21期4841-4845,共5页
采用蔗糖密度梯度离心法分离纯化斑点叉尾病毒(Channel catfish virus,CCV),利用电喷雾-四级杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)对得到的样品进行分析。结果共鉴定了13种结构蛋白,包含1种未报道过的结构蛋白ORF22。实验结果为进一步研... 采用蔗糖密度梯度离心法分离纯化斑点叉尾病毒(Channel catfish virus,CCV),利用电喷雾-四级杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)对得到的样品进行分析。结果共鉴定了13种结构蛋白,包含1种未报道过的结构蛋白ORF22。实验结果为进一步研究CCV结构蛋白的功能及蛋白质组学提供了参考。 展开更多
关键词 斑点病毒(Channel CATFISH virus CCV) 结构蛋白 蔗糖密度梯度离心 质谱
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斑点叉尾鮰疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立 被引量:2
10
作者 杜玉东 陈孝煊 +5 位作者 吴志新 王敏 刘迁 夏君 王树云 李莉娟 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期604-608,共5页
针对斑点叉尾鮰疱疹病毒(CCV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5′端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法。对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性。结果表明:该... 针对斑点叉尾鮰疱疹病毒(CCV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5′端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法。对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性。结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍。用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA。该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾鮰疱疹病毒的检测、斑点叉尾鮰暴发性流行病的诊断。 展开更多
关键词 PCR-ELISA 斑点疱疹病毒 敏感性 特异性
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斑点叉尾鮰病毒囊膜蛋白基因ORF6和ORF10的原核表达及抗体制备
11
作者 王树云 陈孝煊 +4 位作者 王敏 周金敏 于艳梅 岳刚毅 李莉娟 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期764-767,共4页
为获得斑点叉尾鮰疱疹病毒ORF6和ORF10基因,设计特异性引物进行PCR扩增,成功构建pET-32a-ORF6和pET-32a-ORF10原核表达载体,经IPTG诱导后目的蛋白在大肠杆菌中成功表达并制备多抗,通过Western blot证明ORF10的抗体具有特异性,且ORF10为... 为获得斑点叉尾鮰疱疹病毒ORF6和ORF10基因,设计特异性引物进行PCR扩增,成功构建pET-32a-ORF6和pET-32a-ORF10原核表达载体,经IPTG诱导后目的蛋白在大肠杆菌中成功表达并制备多抗,通过Western blot证明ORF10的抗体具有特异性,且ORF10为病毒的结构蛋白。 展开更多
关键词 斑点疱疹病毒 囊膜蛋白 原核表达 多克隆抗体
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斑点叉尾鮰病毒病
12
作者 冯刚 《海洋与渔业》 2016年第1期59-59,共1页
病原 斑点叉尾鮰病毒病是流行较广的主要危害鱼种的一种爆发性传染性疾病,病原为斑点叉尾鮰病毒,是一种有囊膜病毒,病毒粒子呈二十面体,双链DNA,可生长温度10-35℃,最适温度为25-30℃。
关键词 囊膜病毒 斑点病毒 最适温度 性传染性疾 病毒粒子 二十面体 点状出血 DNA 鳍条基部 临床症状
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