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抗人整合素ανβ_3单链抗体的构建和表达 被引量:3
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作者 王臣 侯利华 +6 位作者 张彦明 李建民 廖振林 杜桂鑫 陈薇 孙启鸿 童贻刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期159-162,共4页
目的 :利用基因工程抗体技术构建抗人整合素ανβ3 单链抗体(scFv)。方法 :从分泌抗人整合素ανβ3 单抗 (mAb)的杂交瘤细胞E10总RNA中 ,用RT PCR扩增VH 和VL 基因 ,对其核苷酸序列分析后 ,通过PCR在VH 和VL 基因间插入柔性连接子(Gly... 目的 :利用基因工程抗体技术构建抗人整合素ανβ3 单链抗体(scFv)。方法 :从分泌抗人整合素ανβ3 单抗 (mAb)的杂交瘤细胞E10总RNA中 ,用RT PCR扩增VH 和VL 基因 ,对其核苷酸序列分析后 ,通过PCR在VH 和VL 基因间插入柔性连接子(Gly4Ser) 3,组装成scFv基因 ,并克隆至原核表达载体pTIG TRX中。以重组子转化大肠杆菌BL2 1(DE3 )诱导目的基因表达。结果 :转化菌可表达相对分子质量 (Mr)为 3 10 0 0的scFv。Westernblot证实 ,具有His6标签蛋白的表达。经低剂量的IPTG诱导和较低温度培养 ,scFv获得了可溶性形式表达。表达产物经Ni NTA琼脂糖层析纯化后纯度达 91%以上。ELISA鉴定证实 ,scFv具有良好的抗原结合活性。结论 :成功地构建并表达抗人整合素ανβ3 的scFv ,为进一步临床研究奠定了基础。 展开更多
关键词 单链抗体 整合素αυβ3 构建 表达
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白介素-1β对小鼠胚胎体外发育及胚胎子宫内膜共培养体系分泌Hb—EGF、α_υβ_3的影响 被引量:2
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作者 刘萍 李允广 +1 位作者 徐艳 安全平 《中国优生与遗传杂志》 2012年第12期29-31,共3页
目的使用不同浓度的白介素-1β(IL-1β)对小鼠胚胎体外发育进行干预并检测与着床相关因子Hb—EGF、αυβ3的分泌,探讨IL-1β在胚胎着床中的作用。方法将IL-1β稀释成不同浓度,研究其对小鼠2-细胞期胚胎囊胚形成率及囊胚孵出率的影响,... 目的使用不同浓度的白介素-1β(IL-1β)对小鼠胚胎体外发育进行干预并检测与着床相关因子Hb—EGF、αυβ3的分泌,探讨IL-1β在胚胎着床中的作用。方法将IL-1β稀释成不同浓度,研究其对小鼠2-细胞期胚胎囊胚形成率及囊胚孵出率的影响,并用酶联免疫吸附法检测不同浓度的IL-1β对胚胎子宫内膜共培养体系Hb—EGF、αυβ3表达的影响。结果 2-细胞胚胎体外培养,经含不同浓度的IL-1β培养液干预,培养72h的囊胚率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.01)。1ng/ml和10ng/ml组培养96h的胚胎孵出率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。100ng/ml组的孵出率与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。胚胎-子宫内膜共培养体系经1ng/ml、10ng/mlIL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达上调,与对照组相比,有显著性差异(P<0.05);共培养体系经100ng/ml IL-1β干预后Hb—EGF、αυβ3蛋白表达与对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论合适的IL-1β可以促进体外培养小鼠胚胎发育及胚胎着床。 展开更多
关键词 白介-1β 胚胎 着床 结合性表皮生长因子 整合素αυβ3
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西罗莫司对大鼠移植心脏组织中整合素ανβ3mRNA表达的影响
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作者 胡名松 胡建国 郑宝石 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期168-171,共4页
目的研究大鼠移植心脏冠状血管组织中整合素αυβ3的表达情况及西罗莫司(SRL)对其的影响,探讨SRI。预防移植心脏血管病变的可能机制。方法实验共分4组,每组受者8只,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型:(1)同系移植组:供、受者均为W... 目的研究大鼠移植心脏冠状血管组织中整合素αυβ3的表达情况及西罗莫司(SRL)对其的影响,探讨SRI。预防移植心脏血管病变的可能机制。方法实验共分4组,每组受者8只,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型:(1)同系移植组:供、受者均为Wistar大鼠;(2)同种异体移植环孢素A组(CsA组):以Wistar大鼠作为供者,SD大鼠作为受者,移植后受者皮下注射CsA10mg·kg^-1·d^-1;(3)同种异体移植SRL组(SRL组):以Wistar大鼠作为供者,SD大鼠作为受者,移植后受者用SRL1.25mg·kg^-1·d^-1灌胃;(4)对照组:取未经任何处理的Wistar大鼠作为正常对照。移植后60d,取移植心脏组织,行Van Gieson染色观察移植心脏血管病理学改变,采用Mias system 4.1医学图像分析管理系统分析血管狭窄程度,采用逆转录聚合酶链反应法检测整合素αυβ3 mRNA的表达情况,分析整合素αυβ3 mRNA的表达与血管狭窄程度间的关系。结果对照组移植心脏未见血管内膜增厚和管腔狭窄;同系移植组血管内膜稍增厚,但未见管腔狭窄;CsA组血管内膜明显增厚,管腔狭窄,甚至有部分小动脉出现闭塞;SRL组血管内膜增生和血管狭窄程度明显轻于CsA组。对照组、同系移植组、CsA组、SRL组整合素αυβ3 mRNA的相对含量分别为(0.28±0.08)、(0.38±0.05)、(2.51±0.43)、(1.17±0.12),4组间比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。CsA组和SRL组移植心脏组织中整合素αυβ3 mRNA表达量与血管狭窄程度之间均呈正相关(r=0.654,P〈0.01)。结论SRL可降低大鼠同种异体移植心脏组织中整合素αυβ3 mRNA的表达量,SRL预防移植心脏血管病变的作用可能与其抑制整合素αυβ3 mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 西罗莫司 整合素αυβ3 心脏移植 血管病变
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