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用Ciprofloxacin去除传代细胞株中的支原体污染的研究 被引量:3
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作者 陈如颖 喻峰 朱德厚 《细胞生物学杂志》 CSCD 1995年第2期90-93,共4页
在应用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个非常棘手的问题。对Vero和SP 2/0-Ag 14等细胞,应用Ciprofloxacin,10μg/ml处理14天,支原体检测全部转阴,经4个月的培养、传代、冻存、复苏,每次支原体检测均保持阴... 在应用细胞培养手段的生物学研究和生物工程产品中,支原体污染仍是一个非常棘手的问题。对Vero和SP 2/0-Ag 14等细胞,应用Ciprofloxacin,10μg/ml处理14天,支原体检测全部转阴,经4个月的培养、传代、冻存、复苏,每次支原体检测均保持阴性。对去除了支原体的Vero和LSC-116细胞株,测试了其生长特征和功能,均未见受影响。 展开更多
关键词 细胞培养 支原体去除 CIPROFLOXACIN
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一种新的抗生素联合用药方案清除细胞支原体污染的研究 被引量:2
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作者 黎少 梁永康 +2 位作者 冯思桦 彭青 高毅 《现代医院》 2021年第2期301-305,共5页
目的支原体污染是细胞培养过程中最为常见也较为棘手的问题,因此,解决细胞支原体污染问题存在必要性和迫切性。但是目前可用的商品化去除支原体试剂选择少,价格贵,本研究拟探索一种操作简单,成本低且去除支原体效果佳的抗生素联合用药... 目的支原体污染是细胞培养过程中最为常见也较为棘手的问题,因此,解决细胞支原体污染问题存在必要性和迫切性。但是目前可用的商品化去除支原体试剂选择少,价格贵,本研究拟探索一种操作简单,成本低且去除支原体效果佳的抗生素联合用药方案。方法选取四种抗生素药物联合用药:红霉素、氯霉素、泰乐菌素和环丙沙星,连续12天处理培养支原体污染的C3A肝癌细胞。首先通过倒置显微镜观察加药处理后,C3A细胞内颗粒、形态等变化;加药处理C3A细胞后通过CCK-8法检测其活率。其次,进行支原体聚合酶链式反应(PCR)检测和荧光染色,评价抗生素联合用药方案去除支原体的有效性。最后,实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测C3A细胞主要功能基因角蛋白(CK18)、白蛋白(ALB)、氨甲酰磷酸合成酶l(CPS1)和细胞色素P450酶系1A2(CYP1A2)等功能基因的表达恢复情况。结果经抗生素联合用药处理后,细胞形态更为规整,胞内颗粒显著减少,形态透亮折光度增强等特征变化,对C3A细胞活率无明显影响,抗生素联合用药组PCR电泳结果显示没有支原体DNA条带,同时荧光结果表明没有出现其余点状或者串点的支原体荧光,支原体去除后功能基因CK18、ALB、CPS1和CYP1A2相对表达量均升高。结论新的抗生素联合用药方案能够达到支原体去除效果,C3A细胞活率维持较好,去除支原体后细胞主要功能基因表达可得到恢复提升。 展开更多
关键词 抗生素处理 支原体去除 支原体检测 基因表达
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吕梁黑山羊成纤维细胞培养过程中支原体污染的快速发现及去除
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作者 吴苏君 李希 王曦 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期42-46,I0013,共6页
为了快速发现细胞培养过程中的支原体污染,并在污染发生早期有效去除,从而挽救细胞。以吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞为研究对象,通过显微镜直接观察法、DNA荧光染色法结合检测细胞,可在1 h内快速发现细胞是否存在支原体污染。对疑似支原体... 为了快速发现细胞培养过程中的支原体污染,并在污染发生早期有效去除,从而挽救细胞。以吕梁黑山羊耳缘成纤维细胞为研究对象,通过显微镜直接观察法、DNA荧光染色法结合检测细胞,可在1 h内快速发现细胞是否存在支原体污染。对疑似支原体污染的试验组细胞使用25μg/mL支原体抗生素(Plasmocin)连续处理14 d,再通过上述2种方法和PCR法结合检测细胞中是否仍存在支原体污染,绘制药物处理后试验组细胞的生长曲线。结果表明,支原体污染早期,用25μg/mL Plasmocin连续处理试验组细胞14 d后,高倍显微镜下细胞形态恢复,荧光试剂Hoechst 33342染色观察试验组细胞和对照组细胞均只见胞核,核外未见散在荧光,PCR未检测到支原体,药物处理后试验组细胞生长曲线正常。说明细胞已恢复正常生长,支原体抗生素Plasmocin可有效去除细胞培养中早期支原体污染。 展开更多
关键词 吕梁黑山羊 细胞培养 支原体污染 支原体去除 plasmocin
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丁胺卡那去除甲肝病毒培养细胞中支原体的效果观察
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作者 辛忠涛 李君文 +3 位作者 王新为 宋农 郑金来 芮期义 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期635-636,共2页
探索丁胺卡那去除HAV培养细胞中污染支原体的效果 ,发现常规剂量 (10 0U/ml)的丁胺卡那效果不显著 ,而采用突击处理 (30 0U/ml)与常规处理协同应用 ,取得显著效果 :细胞形态恢复正常 ,种植病毒后维持时间延长 ,且不影响细胞对病毒的敏... 探索丁胺卡那去除HAV培养细胞中污染支原体的效果 ,发现常规剂量 (10 0U/ml)的丁胺卡那效果不显著 ,而采用突击处理 (30 0U/ml)与常规处理协同应用 ,取得显著效果 :细胞形态恢复正常 ,种植病毒后维持时间延长 ,且不影响细胞对病毒的敏感性。 展开更多
关键词 丁胺卡那 培养细胞 支原体去除 甲型肝炎病毒
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