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旋毛虫排泄分泌抗原的研究进展 被引量:31
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作者 王中全 崔晶 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期155-158,共4页
关键词 旋毛虫病 旋毛虫 排泄分泌抗原 研究
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旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠免疫保护作用的比较研究 被引量:21
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作者 申丽 洁朱声 +1 位作者 华罗仲 金雷莉 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期6-8,共3页
目的 比较旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠的免疫保护作用。方法 收集人工感染大鼠小肠内的成虫, 经研磨和冻融制备成虫可溶性抗原。采用体外培养的方法从培养液中提取旋毛虫成虫排泄分泌抗原。分别用两种抗原免疫小鼠, ... 目的 比较旋毛虫成虫可溶性抗原和排泄分泌抗原对小鼠的免疫保护作用。方法 收集人工感染大鼠小肠内的成虫, 经研磨和冻融制备成虫可溶性抗原。采用体外培养的方法从培养液中提取旋毛虫成虫排泄分泌抗原。分别用两种抗原免疫小鼠, 间隔1 周共免疫3 次, 末次免疫后1 周, 每只小鼠攻击感染100 条旋毛虫感染性肌肉幼虫。感染后1 周检查小鼠小肠内成虫数量和雌虫生殖力, 感染后5 周检查肌肉幼虫负荷。结果 成虫可溶性抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别为7955 % 、6225 % 和650 % 。成虫排泄分泌抗原诱导的成虫减虫率、新生幼虫减虫率和肌肉幼虫减虫率分别是9727 % 、8660 % 和900 % 。结论 实验结果表明旋毛虫成虫可溶性抗原和成虫排泄分泌抗原均能够诱导宿主产生较强的抗攻击感染的免疫力, 但后者的免疫原性更强。 展开更多
关键词 旋毛虫 成虫 可溶性抗原 排泄分泌抗原
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弓形虫抗体免疫胶体金快速检测试纸条的研制 被引量:28
3
作者 王艳华 李克生 +3 位作者 才学鹏 杜慧芳 李学瑞 张德林 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期29-32,共4页
将样品垫(加样区)、包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫、包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜、吸水垫依次首尾互相衔接粘贴在白色塑料板上,组装成检测弓形虫抗体的免疫胶体金快速试纸条。然后用其进... 将样品垫(加样区)、包被了弓形虫排泄分泌抗原和胶体金结合物的结合垫、包被了弓形虫排泄分泌抗原和抗弓形虫抗体的硝酸纤维素膜、吸水垫依次首尾互相衔接粘贴在白色塑料板上,组装成检测弓形虫抗体的免疫胶体金快速试纸条。然后用其进行动物弓形虫病血清抗体检测,并用弓形虫IHA诊断试剂进行对照试验。经对已知弓形虫阴、阳性血清检测,与弓形虫IHA检测结果的符合率为82.5%,金标试纸条较弓形虫IHA诊断试剂能提前2 d检测到抗体。结果表明,检测弓形虫抗体免疫胶体金试剂(金标试纸条)的敏感度高于IHA。 展开更多
关键词 弓形虫 快速检测 排泄分泌抗原 羊抗弓形虫抗体 肢体金试纸条
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猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B1蛋白原核表达条件的优化 被引量:13
4
作者 王秋霞 张美英 +5 位作者 张改平 王选年 宁长申 鲁琨 张龙现 菅复春 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期59-63,共5页
研究了培养基、温度、诱导时间I、PTG和氨苄青霉素终浓度以及诱导前后温度变化等不同条件对重组菌菌体生长和融合蛋白表达量的影响,以期获得猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)Ts8B1蛋白基因在大肠杆菌中的最大表达量。结果显示,使用TB培养基... 研究了培养基、温度、诱导时间I、PTG和氨苄青霉素终浓度以及诱导前后温度变化等不同条件对重组菌菌体生长和融合蛋白表达量的影响,以期获得猪囊尾蚴排泄分泌抗原(ES Ag)Ts8B1蛋白基因在大肠杆菌中的最大表达量。结果显示,使用TB培养基于37℃培养3 h后,采用终浓度为0.2mmol/L的IPTG和200mmol/L的氨苄青霉素在32℃过夜诱导培养,pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白表达量最大,表达的融合蛋白约占菌体总蛋白的33%。SDS-PAGE表明pGEX-6p-1/Ts8B1融合蛋白大小约为33 kDa,与预计的分子量大小一致,Western blot分析表明其能与猪囊尾蚴多克隆抗体起特异性反应,并获得最大产量的融合蛋白。为研究其在猪囊尾蚴病检测中的应用价值奠定了基础。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 排泄分泌抗原 Ts8B1蛋白 原核表达
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旋毛虫肌幼虫可溶性抗原、排泄分泌抗原的电泳分析 被引量:5
5
作者 朱兴全 窦兰清 +2 位作者 史晓红 石磊 牛炳亨 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期168-173,共6页
本文报道了应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(IEF)电泳及二维电泳(IEF/SDS-PAGE)对旋毛虫肌动虫排泄分泌(ES)抗原和肌幼虫可溶性抗原的分析结果。肌幼虫E... 本文报道了应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(IEF)电泳及二维电泳(IEF/SDS-PAGE)对旋毛虫肌动虫排泄分泌(ES)抗原和肌幼虫可溶性抗原的分析结果。肌幼虫ES抗原经SDS-PAGE后用考马斯亮蓝染色蛋白质,结果显示16条蛋白带,分子量范围21~80KD,其中主带9条。IEF电泳后分别用PAS染多糖、考马斯亮蓝R-250染蛋白质、Nile's蓝染脂、醋酸a-萘酯/坚固蓝染酪酶同工酶,结果肌幼虫ES抗原分别显示16,26、7及0条带;肌幼虫可溶性抗原分别显示21、38、4及11条带。二维电泳后用考马斯亮蓝G-250染色多肤斑点,结果ES抗原显示多肽斑点61个;肌幼虫可溶抗原显示122个多肽斑点。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄分泌抗原 肌幼虫 可溶性 抗原 电泳
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弓形虫排泄分泌抗原对B16F10黑素瘤小鼠CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞和NK细胞的影响 被引量:11
6
作者 焦玉萌 章黎 +2 位作者 葛以跃 梁越进 王勇 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期301-306,共6页
目的探讨弓形虫排泄分泌抗原(ESA)对B16F10黑素瘤小鼠CD4+CD25+Foxp3+T细胞和NK细胞数量和功能的影响,观察ESA对肿瘤生长的作用。方法将传代培养的B16F10黑素瘤细胞接种于C57BL/6小鼠右腋窝皮下,建立荷瘤动物模型。采用ESA腹腔注射进行... 目的探讨弓形虫排泄分泌抗原(ESA)对B16F10黑素瘤小鼠CD4+CD25+Foxp3+T细胞和NK细胞数量和功能的影响,观察ESA对肿瘤生长的作用。方法将传代培养的B16F10黑素瘤细胞接种于C57BL/6小鼠右腋窝皮下,建立荷瘤动物模型。采用ESA腹腔注射进行干预,将实验小鼠分为4组:PBS组、B16F10组、PBS+ESA组、B16F10+ESA组,分别于ESA干预后2、4、6d取脾,流式细胞术检测各组小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+T细胞和NK细胞占脾细胞的比例;WST-8法检测各组小鼠CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制功能;LDH法检测NK细胞杀伤B16F10功能;观测荷瘤鼠肿瘤体积动态变化。结果 ESA干预4、6d后,荷瘤鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+T细胞占脾细胞的比例分别为(1.65±0.18)%和(1.56±0.17)%,与荷瘤对照组[分别为(2.47±0.10)%和(2.82±0.12)%]比较差异均有统计学意义(P均<0.05);ESA干预可使CD4+CD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞的抑制功能下降。抑制作用以干预后4、6d较明显,抑制率分别为50.03%和50.00%,低于荷瘤对照组的75.03%和78.14%(P均<0.05);荷瘤鼠脾脏NK细胞占脾细胞的比例[(3.58±0.07)%]在ESA干预后6d显著高于荷瘤对照组的(2.61±0.13)%(P<0.05)。同时NK细胞杀伤B16F10细胞功能也增强,不同效靶细胞比(5∶1、10∶1、20∶1)下分别为26.51%、35.25%、60.19%,明显高于荷瘤对照组的16.81%、24.63%、45.62%(P均<0.05);ESA干预后,瘤体出现延缓生长,平均出瘤时间较对照组延迟6d,实验终点荷瘤第35天ESA干预组瘤体体积[(6208.34±443.64)mm3]明显小于荷瘤对照组[(9027.46±1362.01)mm3](P<0.05)。结论弓形虫ESA可通过下调荷瘤鼠CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例并抑制其功能和上调NK细胞比例并增强其杀伤功能,发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄分泌抗原 CD4+CD25+Foxp3+T细胞 NK细胞 黑素瘤
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斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA诊断肺吸虫病研究 被引量:9
7
作者 王光西 毛樱逾 +1 位作者 张跃辉 杨兴友 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第3期68-69,共2页
目的 探索斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的免疫诊断价值。方法 采用斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA检测 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清、6份日本血吸虫病人血清、4份华支睾吸虫病人血清、2 0份健康人血清中抗斯氏狸殖吸虫幼虫排... 目的 探索斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的免疫诊断价值。方法 采用斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA检测 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清、6份日本血吸虫病人血清、4份华支睾吸虫病人血清、2 0份健康人血清中抗斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的抗体IgG。结果 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原与 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清均呈阳性反应 ,与其它 2种吸虫病和健康人血清未发生反应。结论 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot -ELISA为诊断肺吸虫病敏感。 展开更多
关键词 斯氏狸殖吸虫 排泄分泌抗原 DOT-ELISA 肺吸出病 免疫诊断
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湖北株旋毛虫不同时期ES抗原的表达 被引量:6
8
作者 王燕 张国华 陈娟 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期341-343,共3页
目的 完成旋毛虫 (Trichinellaspiralis,Ts)湖北株排泄分泌抗原 (excretory secretoryantigen ,ES抗原 )中 4 3ku ,4 9ku及 5 3ku抗原的不同虫期的基因表达 ,并与旋毛虫昆明株中相对应的ES抗原进行对比 ,分析不同虫期、虫株对这 3类抗... 目的 完成旋毛虫 (Trichinellaspiralis,Ts)湖北株排泄分泌抗原 (excretory secretoryantigen ,ES抗原 )中 4 3ku ,4 9ku及 5 3ku抗原的不同虫期的基因表达 ,并与旋毛虫昆明株中相对应的ES抗原进行对比 ,分析不同虫期、虫株对这 3类抗原基因表达的影响。方法 根据已知的 3类抗原的基因序列设计合成 3对特异性引物 ,运用RT PCR技术检测抗原基因的表达 ,并以旋毛虫 18sRNA为标准进行对比。结果 RT PCR得到了湖北株两个虫期中的 4 3ku,4 9ku及 5 3ku的ES抗原mRNA产物 ,并与昆明株进行对比后发现 3类抗原在不同虫期表达有明显差异。结论 通过研究发现不同虫期的同类ES抗原的表达量有显著性差异。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄分泌抗原 RT-PCR
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血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成及免疫反应性分析 被引量:7
9
作者 华万全 余传信 +2 位作者 王阶 殷旭仁 钱春艳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第7期526-528,531,共4页
目的分析日本血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成及其与血吸虫感染兔疗前、疗后配对血清的免疫反应特征。方法采用7cm(pH5~8)的IPG和12%SDS-PAGE对血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成进行双向凝胶电泳分析,并用免疫印迹试验检测排泄分泌抗原各蛋... 目的分析日本血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成及其与血吸虫感染兔疗前、疗后配对血清的免疫反应特征。方法采用7cm(pH5~8)的IPG和12%SDS-PAGE对血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成进行双向凝胶电泳分析,并用免疫印迹试验检测排泄分泌抗原各蛋白点与疗前、疗后血清的反应性;采用PDQuest8.0图像分析软件对二维图像斑点进行分析,寻找差异反应蛋白点。结果血吸虫成虫排泄分泌抗原双向凝胶电泳图谱主要由215个蛋白斑点组成,其中16个斑点大、染色深,可能为高丰度的循环抗原;免疫印迹显示可被感染6周兔血清识别,但不能被治疗12周兔血清识别的蛋白斑点有84个,与感染6周兔血清的反应强度比与治疗12周兔血清的反应强度高2倍的蛋白点有38个。结论血吸虫成虫排泄分泌抗原中存在高丰度的能被短程抗体识别的抗原分子。 展开更多
关键词 血吸虫成虫 排泄分泌抗原 双向凝胶电泳 免疫印迹
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弓形虫免疫的研究─—弓形虫E/SA的免疫原性和特异性淋巴细胞对小鼠的免疫力 被引量:4
10
作者 张德林 杜重波 +1 位作者 李惠萍 马军武 《中国兽医科技》 CSCD 1994年第12期8-10,共3页
用弓形虫速殖子经细胞培养的排泄分泌抗原(E/SA)乳化后对小鼠免疫2次,7天后用强毒GJS株速殖予以致死性剂量(10 ̄3/只)腹腔注射攻毒效检,结果免疫鼠的存活时间明显长于对照鼠。在第二次试验中,E/SA免疫鼠通过眼... 用弓形虫速殖子经细胞培养的排泄分泌抗原(E/SA)乳化后对小鼠免疫2次,7天后用强毒GJS株速殖予以致死性剂量(10 ̄3/只)腹腔注射攻毒效检,结果免疫鼠的存活时间明显长于对照鼠。在第二次试验中,E/SA免疫鼠通过眼眶放血致死,无菌条件下取其肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结、脾脏,制成单个细胞,在37℃5%CO_2条件下培养2天,以不同剂量注射小白鼠;并同时制备健康鼠淋巴细胞注射小白鼠。注射后第二天用GJS速殖予以10 ̄3/只进行攻击效检,结果E/SA特异性淋巴细胞受鼠比对照鼠的存活时间延长8天,比健康鼠淋巴细胞受鼠的存活时间长4天,证明E/SA及其致敏的淋巴细胞对弓形虫的感染具有保护作用。 展开更多
关键词 弓形虫 排泄分泌抗原 免疫 弓形虫病 小鼠
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小鼠实验感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化 被引量:7
11
作者 王洁 崔晶 王中全 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2007年第4期266-268,共3页
目的观察小鼠感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化。方法将50只小鼠随机分成5组(每组10只),分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染300条幼虫,感染后1~6周每周尾部静脉采血,... 目的观察小鼠感染不同种旋毛虫后血清IgG抗体水平的变化。方法将50只小鼠随机分成5组(每组10只),分别感染旋毛虫(T1)、乡土旋毛虫(T2)、布氏旋毛虫(T3)、伪旋毛虫(T4)及纳氏旋毛虫(T7),每只感染300条幼虫,感染后1~6周每周尾部静脉采血,6周后每2周尾部静脉采血,至感染后20周,用旋毛虫肌幼虫ES抗原ELISA检测血清中抗旋毛虫IgG抗体水平。结果小鼠感染旋毛虫、乡土旋毛虫、布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫后3~5周,血清IgG抗体水平快速升高,至感染后第8周达高峰,此后旋毛虫和乡土旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平缓慢下降,布氏旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平迅速下降;小鼠感染伪旋毛虫后3~5周血清IgG抗体水平快速升高,至第16周达高峰,之后缓慢下降。5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平差异具有显著性(P<0.05)。结论5种旋毛虫感染小鼠的血清IgG抗体水平和动态变化不同;旋毛虫肌幼虫ES抗原可用于其他4种旋毛虫(乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫、纳氏旋毛虫)感染的血清学诊断及流行病学调查。 展开更多
关键词 旋毛虫 乡土旋毛虫 布氏旋毛虫 伪旋毛虫 纳氏旋毛虫 ELISA 排泄分泌抗原 小鼠
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弓形虫ESA诱导小鼠产生的CD8^+ T细胞对早期黑色素瘤生长的影响 被引量:7
12
作者 焦玉萌 方强 +4 位作者 夏惠 王雪梅 陶志勇 陈兴智 沈继龙 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期95-98,共4页
目的观察弓形虫排泄分泌抗原(TgESA)对B16F10黑色素瘤接种小鼠CD8+T细胞的影响,以及CD8+T细胞对B16F10黑色素瘤的作用。方法取RH株弓形虫速殖子体外培养12 h后,收集培养液,离心取上清,获得弓形虫ESA。15只C57BL/6小鼠随机分为A、B和C三... 目的观察弓形虫排泄分泌抗原(TgESA)对B16F10黑色素瘤接种小鼠CD8+T细胞的影响,以及CD8+T细胞对B16F10黑色素瘤的作用。方法取RH株弓形虫速殖子体外培养12 h后,收集培养液,离心取上清,获得弓形虫ESA。15只C57BL/6小鼠随机分为A、B和C三组(每组5只)。B组和C组每鼠右腋窝皮下接种B16F10黑色素瘤细胞2×105个,A组注射等量无菌PBS。接种后第7天,C组每只小鼠腹腔注射TgESA 100μl。接种后第13天,处死小鼠,无菌取脾。流式细胞仪检测各组小鼠CD3+CD8+T细胞所占脾细胞比例;采用免疫磁珠分选B组和C组脾细胞中的CD8+T细胞,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测两组CD8+T细胞对B16F10细胞的杀伤作用,分别设效靶细胞比为2.5∶1、5∶1和10∶1。另取30只C57BL/6小鼠随机分为E、F和G三组(每组10只),每鼠接种B16F10细胞2×105个。接种同时,F组和G组小鼠分别尾静脉注射分离自B组和C组的CD8+T细胞(2×105个/鼠)。观察小鼠瘤体生长情况,记录各组小鼠死亡数和死亡时间,共观察35 d。结果流式细胞仪检测结果显示,A、B和C组脾脏CD3+CD8+T细胞占脾细胞的比例分别为(13.86±0.13)%、(14.18±0.27)%和(15.74±0.28)%,C组显著高于其他两组(P<0.05)。LDH释放试验结果显示,不同效靶细胞比时,C组的CD8+T细胞杀伤活性均显著高于B组(均P<0.05)。G组的平均出瘤时间[(14.9±1.2)d]晚于F组[(11.9±0.7)d]和E组[(9.4±1.2)d](P<0.05)。3组小鼠自出瘤后瘤体均不断增长,但增长速度无明显差异,G组的瘤体面积始终小于其他两组(均P<0.05)。E、F和G组小鼠分别于B16F10细胞接种后第26、29和30天开始出现死亡,至观察终点(第35天),3组小鼠存活的数量分别为3、5和7只。结论TgESA可上调B16F10黑色素瘤小鼠CD8+T细胞的数量和杀伤功能,上调的CD8+T细胞具有早期延缓肿瘤生长的作用。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 排泄分泌抗原 CD8+ T细胞 黑色素瘤
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旋毛虫肌幼虫3种抗原的蛋白组分及免疫反应性比较研究 被引量:6
13
作者 马鸣旺 张志兰 +1 位作者 申丽洁 董明治 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第8期1929-1931,共3页
目的:研究大理猪源旋毛虫肌幼虫(Trichinela spiralis musclelarvae)3种抗原:虫体可溶性抗原(body soluble anti-gen,BSA)、表面抗原(surface antigen,SA)和排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen,ESA)的蛋白组分及其之间的差异,并... 目的:研究大理猪源旋毛虫肌幼虫(Trichinela spiralis musclelarvae)3种抗原:虫体可溶性抗原(body soluble anti-gen,BSA)、表面抗原(surface antigen,SA)和排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen,ESA)的蛋白组分及其之间的差异,并进一步比较分析其免疫反应性,为分离和筛选出免疫原性和免疫反应性强的旋毛虫肌幼虫抗原成分打基础。方法:采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对肌幼虫3种抗原蛋白成分进行分析;采用蛋白印迹(Western-blot)对成虫3种抗原蛋白组分进行免疫反应性分析。结果:SDS-PAGE电泳结果:BSA显示30条蛋白染色条带,分子量范围在100 kDa~12 kDa之间,其中主带11条;SA显示10条主要蛋白染色条带,分子量范围在105 kDa~28 kDa之间;ESA显示20条蛋白染色条带,分子量范围在112 kDa~10 kDa之间,其中主带11条。Western-blot结果:BSA出现25条反应条带,其中分子量为75 kDa、66 kDa、63 kDa、55 kDa、49 kDa、45 kDa、37 kDa、28 kDa、20 kDa、16 kDa的条带着色较深;SA出现7条反应条带;ESA显示14条反应带,其中53 kDa、49 kDa、45 kDa、43 kDa、35 kDa、27 kDa、18 kDa、12 kDa显色明显。结论:旋毛虫肌幼虫BSA与ESA较SA蛋白组分复杂,三者主带部分属低分子量区;免疫反应性的强度SA和ESA高于BSA,说明前两种抗原是旋毛虫肌幼虫刺激机体产生免疫应答的主要靶抗原。 展开更多
关键词 旋毛虫肌幼虫 虫体可溶性抗原 表面抗原 排泄分泌抗原
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细粒棘球蚴原头节虫体和排泄分泌抗原抗体系统检测犬粪抗原的比较研究 被引量:6
14
作者 焦伟 柴君杰 +2 位作者 伊斯拉音 付承 瞿群 《地方病通报》 2001年第1期1-5,共5页
用细粒棘球蚴原头节虫体及排泄分泌抗原—抗体系统进行交叉酶联免疫吸附试验的实验结果显示 :成虫虫体抗原和原头节虫体抗原呈现交叉反应 ,表明这两个发育阶段的虫体抗原具有主要的共同抗原组分 ;原头节排泄分泌抗原的免疫血清 Ig G与... 用细粒棘球蚴原头节虫体及排泄分泌抗原—抗体系统进行交叉酶联免疫吸附试验的实验结果显示 :成虫虫体抗原和原头节虫体抗原呈现交叉反应 ,表明这两个发育阶段的虫体抗原具有主要的共同抗原组分 ;原头节排泄分泌抗原的免疫血清 Ig G与成虫虫体抗原之间交叉滴度很低 ,但与原头节虫体抗原之间存在完全的交叉反应 ,因而提示原头节排泄分泌抗原是原头节的期特异性抗原 ,与其相应抗体具有较高的亲合力。检测犬粪标本的结果提示感染细粒棘球绦虫的犬粪抗原是一种广谱抗原。两种抗原 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 原头节 虫体抗原 排泄分泌抗原 期特异性抗原 家犬
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两种方法制备的旋毛虫ES抗原对小鼠免疫保护作用研究 被引量:6
15
作者 王国英 马远方 +3 位作者 刘广超 谷敬丽 张军 杜耀武 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期586-587,共2页
关键词 旋毛虫 排泄分泌抗原
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SDS-PAGE分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原 被引量:3
16
作者 王光西 许扬 +1 位作者 毛樱逾 张跃辉 《泸州医学院学报》 2001年第2期103-104,共2页
目的 :分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原 (ES -Ag)的分子生物学特性 ,有利于提高免疫诊断方法的敏感性和特异性。方法 :采用SDS -PAGE分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原。结果 :斯氏肺吸虫幼虫排泄分泌抗原在 2 4~ 6 0KD之间... 目的 :分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原 (ES -Ag)的分子生物学特性 ,有利于提高免疫诊断方法的敏感性和特异性。方法 :采用SDS -PAGE分析斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原。结果 :斯氏肺吸虫幼虫排泄分泌抗原在 2 4~ 6 0KD之间可见 4条显色带 ,其中 2 4KD为主带 ,成虫排泄分泌抗原在 2 0~ 6 0KD之间可见 5条显色带 ,其中 2 0KD和 32KD为主带。结论 :斯氏肺吸虫幼虫和成虫排泄分泌抗原共有的主区带为 2 0KD。 展开更多
关键词 斯氏肺吸虫 SDS-PAGE 抗原分子量 幼虫 成虫 排泄分泌抗原
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猪囊尾蚴排泄分泌抗原LRRC15蛋白真核表达及抗原表位预测 被引量:4
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作者 李丽竹 周必英 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期286-291,共6页
目的对猪囊尾蚴排泄分泌抗原中差异表达蛋白富含亮氨酸重复序列结构域15(leucine-rich repeat containing15,LRRC15)进行真核表达,并预测其抗原表位。方法通过在线软件ExPASy-Port Param和Protean软件预测LRRC15蛋白分子质量、稳定性、... 目的对猪囊尾蚴排泄分泌抗原中差异表达蛋白富含亮氨酸重复序列结构域15(leucine-rich repeat containing15,LRRC15)进行真核表达,并预测其抗原表位。方法通过在线软件ExPASy-Port Param和Protean软件预测LRRC15蛋白分子质量、稳定性、氨基酸序列组成及等电点和T淋巴细胞抗原表位。采用基于PCR的精确合成(PCR-based accuratesynthesis,PAS)技术设计全长拼接引物,合成LRRC15基因。构建重组质粒pcDNA3.4-LRRC15并转染至人胚胎肾细胞HEK293,表达LRRC15蛋白,并进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gelelectrophoresis,SDS-PAGE)和免疫印迹试验(Western blotting)鉴定。结果成功构建了重组质粒pcDNA3.4-LRRC15,表达分子质量约70 kDa的LRRC15目的蛋白。经ExPASy-Port Param软件预测,LRRC15属于亲水性蛋白,由644个氨基酸组成,分子质量为69.89 kDa,等电点为5.6;蛋白分子式为C_(3073)H_(4942)N_(846)O_(953)S_(28),不稳定系数为50.3,为一种不稳定蛋白。采用Protean软件预测发现,LRRC15蛋白位于292~295、353~361、521~526、555~564位氨基酸区段具有T细胞抗原表位优势,具有亲水性高、柔韧性好、表面可及性大、抗原性指数高的表位位于122~131、216~233、249~254、333~343、358~361、368~372、384~386、407~412、445~450、469~481、553~564、588~594、607~617、624~639位氨基酸区段。将重组质粒pc DNA3.4-LRRC15转染至HEK293细胞后,SDS-PAGE和Western blotting分析发现,在细胞分泌培养基、细胞裂解上清和沉淀中检测到LRRC15蛋白。从细胞培养基中纯化出LRRC15-His融合蛋白,SDS-PAGE显示在分子质量约为70 kDa处出现明显条带,Western blotting能够识别LRRC15重组蛋白条带。结论成功对猪囊尾蚴排泄分泌抗原中的LRRC15蛋白进行真核表达,并对其抗原表位进行了生物信息学预测,为进一步了解该蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 排泄分泌抗原 富含亮氨酸重复序列结构域15 真核表达 抗原表位 生物信息学预测
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猪囊尾蚴排泄分泌抗原TPx蛋白的筛选验证、T细胞抗原表位预测及真核表达 被引量:1
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作者 何威 李丽竹 +2 位作者 孙晓晴 罗波 周必英 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第2期174-179,184,共7页
目的 在对猪囊尾蚴及其排泄分泌抗原(excretory secretory antigen, ESA)非标定量(label-free quantification, LFQ)蛋白质组学分析的基础上,筛选并验证具有调控T细胞免疫应答功能的硫氧还蛋白过氧化物酶(thioredoxin peroxidase, TPx)... 目的 在对猪囊尾蚴及其排泄分泌抗原(excretory secretory antigen, ESA)非标定量(label-free quantification, LFQ)蛋白质组学分析的基础上,筛选并验证具有调控T细胞免疫应答功能的硫氧还蛋白过氧化物酶(thioredoxin peroxidase, TPx)蛋白,预测TPx蛋白的亲水性和T细胞抗原表位并进行真核表达。方法 对猪囊尾蚴ESA差异蛋白进行基因本体论(gene ontology, GO)富集和生物学功能注释,筛选TPx蛋白。运用平行反应监测技术(parallel reaction monitoring, PRM)验证TPx蛋白。运用Kyte&Doolittle法预测TPx蛋白的亲水性,运用Propred软件预测TPx蛋白T细胞抗原表位。采用基于PCR准确合成(PCR-based accurate synthesis, PAS)方法,全基因合成TPx抗原编码基因并克隆至pcDNA3.4载体,构建重组质粒pcDNA3.4-TPx,转染至HEK293细胞,表达和纯化TPx蛋白。结果 根据GO富集和生物学功能注释,筛选出差异表达量最大的TPx蛋白。TPx蛋白经PRM验证,LFQ蛋白质组学与靶向蛋白质组学对TPx蛋白表达量的趋势一致。预测该蛋白为亲水性蛋白,且含有多个可能的优势T淋巴细胞抗原表位。重组质粒pcDNA3.4-TPx构建正确,经SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定,在细胞培养上清获得相对分子质量约为26×10^(3)的TPx蛋白,且纯化后带有His标签的TPx重组蛋白能被抗His单克隆抗体识别。结论 成功实现了对猪囊尾蚴ESA中TPx蛋白的筛选、验证、T细胞抗原表位预测和真核表达,且表达的TPx蛋白具有反应原性,为该蛋白的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪囊尾蚴 排泄分泌抗原 硫氧还蛋白过氧化物酶 抗原表位预测 真核表达
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旋毛虫排泄分泌抗原的研究与应用 被引量:4
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作者 雷丽萍 诸欣平 《首都医科大学学报》 CAS 2003年第1期81-84,共4页
关键词 旋毛虫 排泄分泌抗原 研究
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旋毛虫肌幼虫排泄分泌抗原诊断早期旋毛虫病的研究 被引量:5
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作者 文慧 胡晨曦 +7 位作者 王李昂 王涵 刘春颖 宋艳艳 刘若丹 姜鹏 王中全 崔晶 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1058-1063,共6页
目的评价旋毛虫肌幼虫排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原诊断早期旋毛虫病的价值。方法应用旋毛虫肌幼虫ES抗原Western blot对旋毛虫感染后6~11d的小鼠血清及19d的早期旋毛虫病人血清进行检测,并与感染后35d的晚期旋毛虫病人和其他... 目的评价旋毛虫肌幼虫排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原诊断早期旋毛虫病的价值。方法应用旋毛虫肌幼虫ES抗原Western blot对旋毛虫感染后6~11d的小鼠血清及19d的早期旋毛虫病人血清进行检测,并与感染后35d的晚期旋毛虫病人和其他寄生虫病人血清的检测结果进行比较。结果 Western blot分析显示,肌幼虫ES蛋白中的2条蛋白带(41.5、55kDa)可被旋毛虫感染后7~11d的小鼠血清识别,6条蛋白带(41.5、44.1、45、55、61和65.2kDa)能被早期和晚期旋毛虫病人血清识别,阳性反应率均为100%(15/15);这6条蛋白带与裂头蚴病人和健康人血清无交叉反应,但与其他寄生虫病(血吸虫病、并殖吸虫病、华支睾吸虫病、棘球蚴病及囊尾蚴病)患者血清具有明显的交叉反应(19.12%~38.23%)。结论旋毛虫肌幼虫ES抗原中的41.5kDa^65.2kDa蛋白带可与旋毛虫感染早期血清反应,但与其他蠕虫病患者有明显的交叉反应。 展开更多
关键词 旋毛虫病 旋毛虫 肌幼虫 排泄分泌抗原 Western BLOT 早期诊断
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