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LncRNA RGMB-AS1靶向miR-574-3p影响人前列腺癌细胞株DU145增殖、迁移与侵袭
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作者 骆雨 吴雄飞 +1 位作者 刘锋 蔡治涛 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期37-44,共8页
目的观察长链非编码核糖核酸(LncRNA)排斥导向分子B-反义链(RGMB-AS1)对人前列腺癌细胞株DU145增殖、迁移与侵袭的影响,并探讨其对微小核糖核酸-574-3p(miR-574-3p)的靶向作用。方法取人前列腺癌细胞株DU145,培养传代。设RGMB-AS1上调组... 目的观察长链非编码核糖核酸(LncRNA)排斥导向分子B-反义链(RGMB-AS1)对人前列腺癌细胞株DU145增殖、迁移与侵袭的影响,并探讨其对微小核糖核酸-574-3p(miR-574-3p)的靶向作用。方法取人前列腺癌细胞株DU145,培养传代。设RGMB-AS1上调组(转染pcDNA3.1-RGMB-AS1)、RGMB-AS1上调对照组(转染pcDNA3.1-control)、RGMB-AS1下调组(转染si-RGMB-AS1)、RGMB-AS1下调对照组(转染si-NC)、miR-574-3p上调组(转染miR-574-3p mimics)、miR-574-3p上调对照组(转染miR mimics-NC)、miR-574-3p下调组(转染miR-574-3p inhibitor)、miR-574-3p下调对照组(转染miR inhibitor-NC)、空白组,每组3个复孔。48 h后细胞增殖实验(CCK-8)法检测增殖活性并计算增殖抑制率;细胞划痕愈合实验检测迁移活性;Transwell小室检测侵袭活性;实时逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测LncRNA RGMB-AS1、miR-574-3p表达及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、P21、锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(VIM)基因表达;免疫印迹法检测Cyclin D1、P21、ZEB1、N-cadherin、E-cadherin、VIM蛋白表达;双荧光素酶基因报告实验检测LncRNA RGMB-AS1是否靶向miR-574-3p。结果与空白组、RGMB-AS1上调对照组、RGMB-AS1下调对照组、miR-574-3p上调对照组、miR-574-3p下调对照组比较,RGMB-AS1上调组、miR-574-3p上调组D值、划痕愈合率、侵袭细胞数、Cyclin D1、ZEB1、N-cadherin、VIM表达均下降(P<0.05),增殖抑制率、P21、E-cadherin表达均升高(P<0.05),RGMB-AS1下调组、miR-574-3p下调组D值、划痕愈合率、侵袭细胞数、Cyclin D1、ZEB1、N-cadherin、VIM表达均升高(P<0.05),增殖抑制率、P21、E-cadherin表达均下降(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-574-3p mimics组Wt-RGMB-AS1荧光素酶活性降低(P<0.05),Mut-RGMB-AS1荧光素酶活性无统计学意义改变(P>0.05)。结论上调LncRNA RGMB-AS1可靶向上调miR-574-3p抑制人前列腺癌细胞株DU145增殖、迁移与侵袭,推测与 展开更多
关键词 RNA 长链非编码 排斥导向分子b-反义链 前列腺肿瘤 细胞增殖 细胞运动 肿瘤浸润
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